Page 46 - 《中国药房》2021年07期
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low-dose and medium-dose groups were improved partially,with statistical significance (P<0.05 or P<0.01);the pancreatic
tissue damage was alleviated,the morphology was relatively complete,the islet cells were closely arranged,and the vacuoles were
reduced. CONLUSIONS:HVP can reduce the level of blood glucose in diabetic model mice,increase insulin level and relieve
pancreatic injury. The mechanism may be related to its antioxidation.
KEYWORDS Hordeum vulgare polysaccharide;Diabetes mellitus;Antioixidation;Mice
糖尿病是由于体内胰岛素绝对缺乏或相对不足引 司,批号 1602086,规格 250 mg/片),葡萄糖测定试剂盒
起的慢性疾病,以血糖持续升高为特征,从而诱发各种 (上海荣盛生物技术有限公司,批号 20171027),小鼠胰
器官、组织损害与功能障碍,严重威胁着人类健康 [1-3] 。 岛素酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒(上海西唐生物科
2000年,全球成人糖尿病患者约1.51亿,到2019年已达 技有限公司,批号EL-M1382),超氧化物歧化酶(SOD)、
4.63 亿,预计 2045 年糖尿病患者总人数将超过 6.29 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、考马斯
[4]
亿 。糖尿病正在逐渐成为全球健康的经济负担,同时 亮蓝蛋白测定试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号
[5]
糖尿病患者也逐渐呈现出一种年轻化的趋势 。 分别为20171019、20171020、20171129、20171020),耐高
目前治疗糖尿病的药物多具有一些副作用,如体质 温淀粉酶(上海阿拉丁生化科技股份有限公司,批号
[6]
量增加、低血糖、过敏反应、乳酸酸中毒、水肿等 。因 a109182);其余试剂为实验室常用试剂或规格,水为超
此,开发天然的、副作用小的药物成为目前研究糖尿病 纯水。
治疗药物的重点。相关研究发现,植物多糖的降糖作用 1.3 动物
具有作用温和、毒副作用小、来源广泛等优点,极具开发 本研究所用动物为清洁级雄性昆明种小鼠,体质量
潜质,如灵芝、紫苏叶、红豆杉、三七等多糖的降血糖作 (20±2)g,购自上海斯莱克实验动物有限公司,动物生
用均有报道 [7-10] 。 产许可证为 SCXK(沪)2017-0005。小鼠饲养于每日光
青稞是禾本科大麦属作物,主要分布于海拔4 200~ 照12 h、温度(21.5±1.5)℃、相对湿度(47±5)%的动物
4 500米的高寒地区,具有高蛋白、高纤维、高维生素、低 房中。
脂肪、低糖等特点,并富含微量元素、β-葡聚糖等营养成 2 方法
分,研究表明青稞具有调节血糖、降低胆固醇、提高免疫 2.1 HVP制备
力等功能 [11-13] 。体外研究显示,青稞多糖(HVP)具有抑 参考文献[17]方法制备 HVP。称取青稞 60 g,以
制α-淀粉酶活性、降低淀粉消化率的作用 ;体内研究表 80%乙醇溶液为提取剂,于75 ℃回流2 h,以4 500 r/min
[14]
明,HVP能降低由链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型 离心15 min,收集沉淀并将其置于50 ℃干燥箱中烘干。
小鼠的空腹血糖(FBG)和糖耐受量(GTT) ,但其体内 将烘干后的沉淀加入 15 倍量水(按 mL/mg 计),搅拌均
[15]
降血糖的作用机制尚不明确。有研究指出,机体在持 匀后,以 20%Na2CO3溶液调 pH 至 10,并加入 9.0 mL(约
续高血糖状态下,活性氧簇(ROS)生成加速,可出现氧 270 U)耐高温淀粉酶,于 95 ℃回流 2 h 后,再以 1 mol/L
[16]
化应激和炎症反应 。基于此,本研究采用腹腔注射 HCl 溶液调pH至3.0~4.5以沉淀蛋白;以4 500 r/min离
STZ 复制小鼠糖尿病模型,并考察灌胃给予 HVP 后其 心15 min分离蛋白,取上清液以20% Na2CO3溶液调pH
降血糖的作用及机制,为其进一步研究和开发提供实验 至 7.0,然后浓缩至 60 mL;加入 35%硫酸铵溶液,析出
依据。 HVP 粗品,再加水复溶,以去除小分子杂质;经透析、浓
1 材料 缩、冷冻干燥后即得精制的 HVP 干燥样品(得率为
1.1 主要仪器 3.2%,纯度≥99.6%)。
本研究所用主要仪器有:5810型台式高速冷冻离心 2.2 分组、造模与给药
机(德国 Eppendorf 公司)、EL-204 型万分之一电子分析 小鼠禁食 12 h 后,随机取 10 只作为空白对照,其余
天平(瑞士 Mettler Toledo 公司)、ELx-800 型多功能酶标 80只小鼠每天腹腔注射STZ(120 mg/kg)1次,连续注射
仪(美国BioTek公司)、HH型数显恒温水浴锅(江苏科析 3 天后,根据其血清中 FBG 测定结果,剔除不符合模型
仪器有限公司)、CX21 型生物显微镜(日本 Olympus 公 要求(FBG 值小于 11.1 mmol/L 或大于 25 mmol/L)的小
[18]
司)、MR22i型低温高速离心机(法国Jouan公司)、S7/15 鼠 。将符合模型要求的小鼠随机分为模型组、二甲双
型超纯水机(英国ELGA LabWater公司)。 胍组(阳性对照,200 mg/kg,给药剂量参考文献[8])和
1.2 主要药品与试剂 HVP 低、中、高剂量组(75、150、300 mg/kg,根据预实验
本研究所用主要药品与试剂有:STZ(美国Sigma公 结果设置),每组10只。模型组和空白对照组小鼠每天
司,批号S0130),二甲双胍片(浙江亚太药业股份有限公 灌胃给予等量水,各给药组小鼠每天灌胃相应药物,每
·808 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 7 中国药房 2021年第32卷第7期