Page 51 - 《中国药房》2021年07期

staining； the levels of cholinergic indexes [acetylcholine （Ach）， choline acetyltransferase （ChAT） and acetylcholinesterase
（AchE）] in cerebral tissues were detected by ELISA. The expression of BDNF，ERK and CREB mRNA in cerebral tissue were
detected by RT-PCR；expression or phosphorylation level of BDNF，ERK，CREB protein，apoptosis related proteins（Bcl-2，Bax
and Caspase-3）were detected by Western blot. RESULTS：Compared with blank control group，escape latency，distance at T1-T3，
cumulative immobility time and the expression of Caspase-3 protein in cerebral tissues were significantly increased in model group
（P＜0.05）；the times of crossing platform，alternation rate，the number of Nissl staining positive neurons in hippocampus tissues，
the levels of Ach and ChAT in cerebral tissues，Bcl-2/Bax ratio，mRNA and protein expression of BDNF，mRNA expression of
ERK and CREB，the phosphorylation of ERK1/2 and CREB were significantly decreased（P＜0.05）.Compared with model group，
escape latency，distance at T1-T3，cumulative immobility time，the number of Nissl staining positive neurons，AchE level in
cerebral tissues and relative expression of Caspase-3 protein were significantly decreased in ICA high-dose group（P＜0.05）；the
times of crossing platform，alternation rate，levels of Ach and ChAT in cerebral tissues，Bcl-2/Bax ratio，mRNA and protein
expression of BDNF， mRNA expression of ERK and CREB， the phosphorylation of ERK1/2 and CREB were increased
significantly（P＜0.05）. Above indexes in ICA low-dose and medium-dose groups were partially improved significantly than model
group（P＜0.05）. CONCLUSIONS：ICA can improve cognitive function in schizophrenia model rats.Its mechanism may be related
to regulating cholinergic system，inhibiting neuronal apoptosis，and promoting the expression of BDNF/ERK/CREB signaling
pathway.
KEYWORDS Icariin； Schizophrenia； Cognitive function； BDNF/ERK/CREB signaling pathway； Neuronal apoptosis；
Cholinergic system；Rat

精神分裂症是一类危害极大的终生性精神疾病，多 迷宫视频分析系统（上海欣软信息科技有限公司）、
发于青壮年，患者常表现出感知、思维、情感、行为等多 CKX41 型光学显微镜（日本 Olympus 公司）、iMark 型酶
方面的障碍及精神活动不协调，一般无意识障碍或明显 标仪（美国 Bio-Rad 公司）、Exicycler96 型荧光定量聚合
的智力、能力障碍，但对其日常生活、工作、社交有严重 酶链反应（PCR）仪（韩国Bioneer公司）、WD-9413B型全
[1]
影响 。目前，精神分裂症的确切病因尚不明确，可能与 自动凝胶成像系统（北京六一仪器厂）。
[2]
遗传、神经递质异常、胎儿时期脑部发育异常等有关 。 1.2 主要药品与试剂
近年来，公众心理和精神健康问题也越来越突出，由于 本研究所用主要药品与试剂有：ICA（成都瑞芬思生
精神分裂症患者有极高的自残、自杀倾向，故成为我国 物 科 技 有 限 公 司 ，批 号 20190101，纯 度 ＞98％），
精神类疾病的防治重点 。精神分裂症的症状复杂多 MK-801、Trizol 试 剂（美 国 Sigma 公 司 ，批 号 分 别 为
[3]
样，其中认知功能障碍是核心症状之一，研究表明，脑源 M20181001、M20181215），Nissl染色剂、BCA试剂盒、辣
性神经营养因子/细胞外信号调节蛋白激酶/环磷腺苷反 根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋白G二抗、ECL
应元件结合蛋白（BDNF/ERK/CREB）信号通路、神经胆 发光剂（上海碧云天生物技术有限公司，批号分别为
碱能系统可参与学习和记忆的调控，形成认知 [4－5] 。另 20180524、20181230、20190101、20181105），Trizol 试剂
外，神经细胞的凋亡在精神分裂症发病过程中也具有重 （美国Invitrogen，批号H20180510），逆转录试剂盒（日本
要作用，如凋亡标记蛋白 B 淋巴细胞瘤 2（Bcl-2）及其相 TaKaRa公司，批号LA100805），乙酰胆碱（Ach）、胆碱乙
关 X 蛋白（Bax）、胱天蛋白酶 3（Caspase-3）等在此过程 酰转移酶（ChAT）、乙酰胆碱酯酶（AchE）酶联免疫吸附
中常出现异常表达 [6－7] 。淫羊藿苷（Icariin，ICA）是淫羊 法（ELISA）试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号分
藿的干燥茎叶提取物，具有丰富的药理学活性——如陈 别 为 20180710、20181201、20180815），羊 抗 兔 BDNF、
[8]
溪等 研究发现，ICA 可改善精神分裂症模型小鼠高活 ERK1/2、磷 酸 化 ERK1/2（p-ERK1/2）、CREB、磷 酸 化
[9]
动性和焦虑状态；Li等 研究发现，ICA可抑制内质网应 CREB（p-CREB）、B 淋巴细胞瘤 2（Bcl-2）及其相关 X 蛋
激信号，改善认知功能，对老年痴呆模型小鼠具有神经 白（Bax）、胱天蛋白酶 3（Caspase-3）单克隆抗体和羊抗
保护作用。但 ICA 是否可改善精神分裂症患者的认知 大鼠 GADPH 单克隆抗体（美国 Abcam 公司，批号分别
功能障碍尚不清楚。有鉴于此，本研究通过腹腔注射N- 为 GR12158-2、GR10528-1、GR11325-4、GR15231-3、
甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂 MK-801 复制精 GR11487-1、 GR13605-4、 GR18204-2、 GR13326-2、
神分裂症模型大鼠，观察ICA对其认知功能损伤的改善 GR155682-3）；水为蒸馏水。
作用，并基于BDNF/ERK/CREB信号途径初步分析其作 1.3 动物
用机制，以期为ICA的临床应用提供理论依据。 本研究所用动物为清洁级 SD 雄性 6～8 周龄大鼠，
1 材料 体质量200～240 g，购自北京维通利华实验动物技术有
1.1 主要仪器 限公司，动物生产许可证号为SCXK（京）2019-0035。大
本研究所用主要仪器有：XER-XM101 型 Morris 水 鼠饲养于温度为22～24℃、相对湿度为40％～60％的环

中国药房 2021年第32卷第7期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 7 ·813 ·