Page 63 - 《中国药房》2021年5期

由表 5 可知，与空白组比较，艾司唑仑组、安神胶囊 后的关联序，可直观反映茯苓水提物UPLC指纹图谱中
组和茯苓S1～S7、S9～S10水提物组小鼠入睡潜伏期均 各共有峰对其镇静催眠作用的贡献大小，揭示其主要药
显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01）；艾司唑仑组、安神胶囊 效物质：当关联度大于0.6时，表示该色谱峰代表的化学
组和茯苓 S1～S10 水提物组睡眠持续时间均显著升高 成分与药效指标有关联性；当关联度大于0.8时，表示该
（P＜0.05或P＜0.01），表明大部分产地的茯苓水提物对 色谱峰代表的化学成分与药效指标有较大关联性 。
[10]
小鼠的入睡潜伏期和睡眠持续时间均具有较好的改善 结果显示，茯苓水提物UPLC指纹图谱中24个色谱峰与
作用。 睡眠持续时间的关联度均大于 0.6（0.611 5～0.811 8）；
2.3 谱效关系分析 与入睡潜伏期的关联度，除14、24、2号峰外，其余色谱峰
2.3.1 单一药效和总药效的数据转化 参考文献[10]方 均大于 0.6（0.605 9～0.790 4）；与入睡率的关联度，除
法，将“2.2”项下小鼠入睡率、入睡潜伏期、睡眠持续时间 23、19、17、5 号峰外，其余色谱峰均大于 0.6（0.606 4～
采用升高率或降低率进行药效数据转化，其中，升高率 0.721 6）；与总药效的关联度，除 2、5、19 号峰外，其余色
或降低率计算公式为 Y′＝[Y0（k） －Y 0（k） ]/Y 0（k） ，k 为 10 批 谱峰均大于 0.6（0.619 0～0.781 2）。这说明茯苓水提物
（k）
茯苓水提物的编号（k＝1，2，3……10），Y0表示给药组各 对小鼠的镇静催眠作用是由多组分共同作用的结果。
单一药效的原始数据，Y 0表示空白组各单一药效的原始 其中，与总药效关联度较大的前 10 位峰分别为 15 号峰
数据；采用层次分析法 计算小鼠入睡率、入睡潜伏期 （猪苓酸 C）、16 号峰、8 号峰、11 号峰、12 号峰（茯苓酸
[10]
和睡眠持续时间对总药效的权重系数，并计算镇静催眠 A）、1 号峰、7 号峰（16α-hydroxytrametendic acid）、3 号
总药效（总药效＝入睡率权重系数×入睡率升高率+入睡 峰、9号峰（茯苓酸B）、20号峰（去氢茯苓酸），详见表7。
潜伏期权重系数×入睡潜伏期降低率+睡眠持续时间权 表7 茯苓水提物UPLC指纹图谱与镇静催眠药效的关
重系数×睡眠持续时间升高率）。结果，入睡率、入睡潜 联度
伏期、睡眠持续时间的权重系数分别为 0.142、0.429、 Tab 7 Correlation of UPLC fingerprint of P. cocos
0.429，镇静催眠单一药效及总药效的转化数据详见 aqueous extract with sedative and hypnotic ef-
表6。 fect
表6 镇静催眠单一药效及总药效的转化数据 入睡率 入睡潜伏期 睡眠持续时间 总药效
Tab 6 Sedative and hypnotic single efficacy and total 关联序 峰号 关联度 峰号 关联度 峰号 关联度 峰号 关联度
efficacy data after conversion 1 10 0.721 6 15 0.790 4 16 0.811 8 15 0.781 2
2 11 0.717 6 16 0.776 2 8 0.809 5 16 0.774 1
组别 入睡率升高率 入睡潜伏期降低率 睡眠持续时间升高率 总药效
茯苓S1水提物组 3 0.39 1.49 1.24 3 4 20 0.714 9 12 8 0.771 2 15 0.787 0 11 8 0.767 0
0.760 6
0.743 9
0.777 6
11
15
0.710 0
茯苓S2水提物组 4 0.35 2.24 1.68 5 12 0.706 4 7 0.750 0 9 0.747 2 12 0.734 9
茯苓S3水提物组 2 0.25 1.52 1.04
茯苓S4水提物组 6 0.31 1.50 1.63 6 7 6 8 0.699 1 9 1 0.732 0 12 1 0.747 1 1 7 0.723 6
0.693 7
0.731 4
0.712 8
0.701 9
茯苓S5水提物组 6 0.39 1.48 1.66 8 1 0.691 5 21 0.712 8 3 0.720 4 3 0.700 2
茯苓S6水提物组 2 0.31 1.48 1.05
茯苓S7水提物组 4 0.34 1.98 1.56 9 16 0.689 6 11 0.707 5 14 0.715 3 9 0.694 1
10 7 0.686 9 3 0.695 8 4 0.713 1 20 0.683 1
茯苓S8水提物组 5 0.16 1.87 1.59 11 3 0.678 9 13 0.689 0 20 0.709 6 18 0.679 5
茯苓S9水提物组 4 0.35 1.54 1.39
茯苓S10水提物组 3 0.32 1.26 1.11 12 14 0.671 2 20 0.670 9 18 0.706 9 6 0.673 6
13 4 0.657 6 17 0.654 5 6 0.697 2 14 0.672 7
2.3.2 数据处理 由于茯苓水提物的UPLC指纹图谱共 14 18 0.651 9 6 0.650 2 7 0.695 9 10 0.663 5
有峰数据与转化后的药效数据的量纲不一致，因此笔者 15 24 0.639 0 18 0.644 9 22 0.695 9 17 0.660 9
16 9 0.634 7 19 0.643 4 17 0.678 4 4 0.656 1
参考文献[11]方法，将转化后的药效数据（入睡率升高
17 2 0.627 4 22 0.637 7 21 0.675 3 22 0.650 1
率、入睡潜伏期降低率、睡眠持续时间升高率、总药效） 18 21 0.622 6 10 0.625 5 24 0.672 0 23 0.632 2
与 10 批茯苓水提物共有峰数据采用均值法进行数据归 19 22 0.613 2 23 0.623 9 23 0.671 9 21 0.630 7
一化处理。将归一化后的药效数据作为参考序列[记为 20 13 0.606 4 4 0.612 0 10 0.664 9 13 0.619 4
21 23 0.592 9 5 0.605 9 5 0.646 4 24 0.619 0
Y （k） ，将共有峰数据作为比较序列，记为Xi（k） ，计算参考序 22 19 0.586 3 14 0.592 6 13 0.636 2 2 0.593 5
列与比较序列的灰色关联系数[Ai（k） ] [12－13] ，计算公式为 23 17 0.581 9 24 0.564 3 2 0.628 5 5 0.568 3
Ai（k） ＝[Δi（k）min+ρ×Δi（k）max]/[Δi（k） +ρ×Δi（k）max]，其中ρ表示分辨系 24 5 0.576 0 2 0.541 8 19 0.611 5 19 0.567 3
数，通常取 0.5；Δ i（k）＝|Y （k）－Xi（k）|，i 表示茯苓水提物 3 讨论
UPLC指纹图谱中的共有峰编号（i＝1，2，3……24）。 本研究基于茯苓的传统用法，将茯苓进行煎煮后获
2.3.3 灰色关联度分析 基于“2.3.2”项下数据处理结 取其水提物，并建立其水提物的UPLC指纹图谱，以期研
果，分别计算各参考序列与比较序列之间灰色关联系数 究茯苓水提物镇静催眠作用的药效物质基础。笔者在
Ai（k） 的平均值，即为灰色关联度。将关联度按大小排序 建立10批不同产地茯苓水提物的UPLC指纹图谱时，对

中国药房 2021年第32卷第5期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 5 ·569 ·