Page 55 - 《中国药房》2021年5期

6 份，按“2.2.1”项下方法平行制备供试品溶液，再按 花薹样品间的化学成分差异较小，详见表2。
“2.1”项下色谱条件进样测定。以 5 号峰的峰面积和保 表 2 14 批黄连花薹样品 HPLC 指纹图谱相似度评价
留时间为参照，记录各共有峰的相对峰面积和相对保留 结果
时间。结果，7 个共有峰的相对峰面积的 RSD 均小于 Tab 2 Evaluation results of the similarity of HPLC
5.0％，相对保留时间的 RSD 均小于 2.5％，表明本方法 fingerprints of 14 batches of C. chinensis
的重复性良好。 inflorescence
2.3.3 稳定性试验 取黄连花薹粉末（编号S1）适量，按 编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 S13 S14
“2.2.1”项下方法制备供试品溶液，分别于室温下放置0、 S1 1.000 0.948 0.967 0.938 0.995 0.994 0.969 0.997 0.927 0.958 0.963 0.957 0.920 0.916
S2 0.948 1.000 0.991 0.990 0.962 0.964 0.996 0.968 0.994 0.997 0.996 0.998 0.994 0.992
2、4、8、10、24 h 后，再按“2.1”项下色谱条件进样测定。
S3 0.967 0.991 1.000 0.994 0.969 0.969 0.996 0.984 0.986 0.996 0.998 0.996 0.985 0.984
以5号峰的峰面积和保留时间为参照，记录各共有峰的 S4 0.938 0.990 0.994 1.000 0.941 0.942 0.989 0.962 0.991 0.991 0.995 0.994 0.995 0.995
相对峰面积和相对保留时间。结果，7 个共有峰的相对 S5 0.995 0.962 0.969 0.941 1.000 0.999 0.978 0.994 0.942 0.967 0.969 0.966 0.932 0.928
S6 0.994 0.964 0.969 0.942 0.999 1.000 0.977 0.993 0.941 0.969 0.970 0.966 0.934 0.929
峰面积的 RSD 均小于 7.0％，相对保留时间的 RSD 均小
S7 0.969 0.996 0.996 0.989 0.978 0.977 1.000 0.984 0.991 0.997 0.998 0.999 0.986 0.984
于 2.5％，表明供试品溶液在室温下放置 24 h 内稳定性 S8 0.997 0.968 0.984 0.962 0.994 0.993 0.984 1.000 0.952 0.976 0.981 0.976 0.947 0.944
良好。 S9 0.927 0.994 0.986 0.991 0.942 0.941 0.991 0.952 1.000 0.992 0.989 0.995 0.993 0.994
2.4 黄连花薹HPLC指纹图谱的生成、相似度评价和共 S10 0.958 0.997 0.996 0.991 0.967 0.969 0.997 0.976 0.992 1.000 0.996 0.998 0.990 0.989
S11 0.963 0.996 0.998 0.995 0.969 0.970 0.998 0.981 0.989 0.996 1.000 0.998 0.990 0.989
有峰指认 S12 0.957 0.998 0.996 0.994 0.966 0.966 0.999 0.976 0.995 0.998 0.998 1.000 0.991 0.991
2.4.1 HPLC 指纹图谱的生成 取 14 批黄连花薹粉末 S13 0.920 0.994 0.985 0.995 0.932 0.934 0.986 0.947 0.993 0.990 0.990 0.991 1.000 1.000
适量，分别按“2.2.1”方法制备供试品溶液，再按“2.1”项 S14 0.916 0.992 0.984 0.995 0.928 0.929 0.984 0.944 0.994 0.989 0.989 0.991 1.000 1.000
下色谱条件进样测定。采用《中药色谱指纹图谱相似度 2.4.3 共有峰的指认 以 14 批黄连花薹的 HPLC 指纹
评价系统》（2012 版）对 14 批黄连花薹样品的指纹图谱 图谱为研究对象，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价
进行分析，得黄连花薹样品 HPLC 对照指纹图谱（R）和 系统》（2012版）软件，设置时间窗口为0.1 min，选择指纹
叠加指纹谱图，详见图1、图2。 图谱中峰形较好的色谱峰进行多点校正，采用中位数法
生成对照图谱，可知其共有 7 个共有峰；结合对照品的
0.16
0.14 HPLC 图谱，指认出 5 号峰为盐酸小檗碱，详见图 3。以
0.12
0.10 盐酸小檗碱峰面积为参照，计算共有峰的相对保留时间
AU 0.08
0.06 和相对峰面积，详见表3、表4。
0.04
0.02 0.12 盐酸小檗碱
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 0.10
t，min
0.08
图1 黄连花薹样品的HPLC对照指纹图谱（R）
AU 0.06
Fig 1 HPLC control fingerprint（R）of C. chinensis
0.04
inflorescence
0.02
800 0
750
700 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
650 t，min
600
550 图3 对照品的HPLC图
500
mV 450 Fig 3 HPLC chromatogram of substance control
400
U， 350
300 2.5 黄连花薹抗氧化作用考察
250
200
150 2.5.1 DPPH自由基清除率测定 精密称取黄连花薹粉
100
50 末 0.12 g 于锥形瓶内，精密加入水 100 mL，超声提取 30
0
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 min后，冷却至室温，快速滤过；取其续滤液3.3 mL于10
t，min
mL量瓶中，加水稀释至刻度，制成质量浓度为0.4 mg/mL
图2 14批黄连花薹样品的HPLC叠加指纹图谱
的样品溶液。精密移取样品溶液 2 mL 和 DPPH 溶液 2
Fig 2 HPLC superimposed fingerprint of 14 batches
mL 于 25 mL 比色管中避光反应 20 min 后，采用紫外分
of C. chinensis inflorescence
光光度计于517 nm波长下测定吸光度值Ai；另移取样品
2.4.2 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评 溶液 2 mL 和水 2 mL 于 25 mL 比色管中避光反应 20
价系统》（2012 版）进行相似度评价。结果，14 批黄连花 min，于相同波长下测定吸光度值 Aj；另移取 DPPH 溶液
薹样品的相似度均不低于 0.916，提示不同产地的黄连 2 mL 与水 2 mL 于 25 mL 比色管中避光反应 20 min，于

中国药房 2021年第32卷第5期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 5 ·561 ·