Page 54 - 《中国药房》2021年5期
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components represented by No. 1，2，3，4，6，7 peaks are the material basis of antioxidant effect of C. chinensis inflorescence，
        and berberine hydrochloride is the material basis of antibacterial effect.
        KEYWORDS     Coptis chinensis inflorescence；HPLC；Fingerprint；Antioxidant activity；Antibacterial activity；Material basis


            黄 连 花 薹 系 毛 茛 科 植 物 黄 连 Coptis chinensis                     表1   黄连花薹样品信息
        Franch.、三 角 叶 黄 连 Coptis deltoidea C. Y. Cheng et     Tab 1 Information of of C. chinensis inflorescence
        Hsiao或云连Coptis teeta Wall.所开的花。经现代药理研               编号                 产地                    批号
        究发现，黄连花薹的化学活性物质在体内外具有清热解                            S1           重庆市石柱县中益乡建峰村莲花组           20180310-1-1
                                                            S2           重庆市石柱县中益乡建峰村莲花组           20180310-1-2
        毒、抗炎、抗病毒、保护胃肠道、抗肿瘤、降血糖、降血脂、
                                                            S3           重庆市石柱县中益乡建峰村莲花组           20180310-1-3
                                    [2]
                         [1]
        降血压等药理作用 。屠大伟等 测定黄连花薹的抗氧                            S4           重庆市石柱县中益乡建峰村莲花组           20180310-1-4
        化能力时发现，黄连花薹水浸出物具有清除羟自由基、                            S5           重庆市石柱县黄水镇万胜坝村田湾组          20180310-2-1
                                                            S6           重庆市石柱县黄水镇万胜坝村田湾组          20180310-2-2
        超氧自由基和过氧化氢的能力。相关研究显示，黄连花
                                                            S7           重庆市石柱县黄水镇万胜坝村田湾组          20180310-3-2
        薹中盐酸小檗碱和黄酮类成分含量较高，其中盐酸小檗                            S8           重庆市石柱县黄水镇万胜坝村田湾组          20180310-3-3
        碱具有明显的抑菌作用           [3－4] 。但黄连花薹具体是哪种成             S9           重庆市石柱县沙子镇龙源村源河组           20180310-4-1
                                                            S10          重庆市石柱县沙子镇龙源村源河组           20180310-4-2
        分发挥抗氧化、抑菌作用目前尚不明确，基于此，本课题
                                                            S11          重庆市石柱县冷水乡华龙村双坪组           20180310-4-3
        组采用高效液相色谱法（HPLC）建立黄连花薹的指纹图                          S12          重庆市石柱县冷水乡华龙村双坪组           20180310-5-2
        谱，对其指纹图谱中的共有峰与其抗氧化作用和抑菌作                            S13          四川省乐山市沙湾区范店乡先锋村           20180310-6-2
                                                            S14          四川省乐山市沙湾区范店乡先锋村           20180310-6-3
        用进行相关性分析，建立谱效关系，以期为其药效物质
        基础的明确和质量评价提供依据。                                     2 方法与结果
        1 材料                                                2.1  色谱条件
        1.1  主要仪器                                               色谱柱为Supersil C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动
            本研究所用主要仪器有：Waters 2695 型 HPLC 仪                 相为乙腈（A）-0.1％磷酸溶液（每1 000 mL中含有20 μL
        （美国 Waters 公司）、SQP 型万分之一电子分析天平（赛                    三乙胺，B），梯度洗脱（0～18 min，18％A→21％A；18～
        多利斯科学仪器北京有限公司）、PS-40型超声波清洗器                         40 min，21％A→27％A；40～58 min，27％A→60％A；
        （深圳市深华泰超声洗净设备有限公司）、TU-1810 型紫                       58～65 min，60％A→18％A；65～70 min，18％A）；流速
        外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）、                           为 1.0 mL/min；柱温为 25 ℃；检测波长为 329 nm；进样
        JJ-CJ-2FD 型洁净工作台（苏州市金净净化设备科技有                       量为10 μL。
        限公司）、DH3006A型电热恒温培养箱（西安禾普生物科                        2.2  溶液的制备
        技有限公司）、XFS-280型手提式压力蒸汽灭菌器（浙江                        2.2.1  供试品溶液的制备         精密称取黄连花薹粉末（过
        新丰医疗器械有限公司）。                                        二号筛，下同）0.2 g 置于锥形瓶内，精密加入甲醇 24.6
        1.2  主要药品与试剂                                        mL、盐酸0.4 mL，摇匀，称定质量，静置12 h后，超声（频
            本研究所用黄连花薹采自不同的黄连种植基地（样                          率 40 kHz ，功率 240 W，下同）30 min 后冷却至室温，以
        品信息见表1），经成都大学药学与生物工程学院刘涛教                           甲醇补足减失的质量，过滤，取续滤液适量，经 0.45 µm
        授鉴定为毛茛科植物黄连C. chinensis Franch.所开的花；                微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。
        其它药品与试剂有：盐酸小檗碱对照品（四川省维克奇                            2.2.2  对照品溶液的制备         取盐酸小檗碱对照品适量，
        生物科技有限公司，批号 wkq18020208，纯度≥98％），                    精密称定，置于25 mL量瓶中，加入甲醇溶解并定容，摇
        DPPH（上海麦克林生化科技有限公司，批号201424），阿                      匀，即得质量浓度为1.037 mg/mL的对照品溶液。
        莫西林胶囊（国药集团汕头金石制药有限公司，批号                             2.3 方法学考察
        170616，规格0.25 g），无水乙醇、水杨酸、七水硫酸亚铁、                   2.3.1  精密度试验      取黄连花薹粉末（编号S1）适量，按
        30％ H2O2 （成都市科隆化学品有限公司，批号分别为                       “2.2.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条
        2018071701、2017021001、2019040201、2019032101），牛      件连续进样6次。以5号峰（盐酸小檗碱，因其峰分离度
        肉 浸 膏（北 京 双 旋 微 生 物 培 养 基 制 品 厂 ，批 号                良好、峰面积大且稳定，故以其峰面积为参照）的峰面积
        20160303），蛋白胨、营养肉汤（北京奥博星生物技术有                       和保留时间为参照，记录各共有峰的相对峰面积和相对
        限责任公司，批号分别为20181022、20170108），甲醇、乙                  保留时间。结果，7个共有峰的相对峰面积的RSD均小
        腈（色谱纯），纯净水。                                         于 4.0％，相对保留时间的 RSD 均小于 1.0％，表明仪器
        1.3  菌种                                             精密度良好。
            本研究所用大肠埃希菌由成都大学附属医院提供。                          2.3.2  重复性试验      取黄连花薹粉末（编号S1）适量，共


        ·560 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 5                                    中国药房    2021年第32卷第5期
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