Page 46 - 《中国药房》2021年5期

基于网络药理学研究黄连解毒汤调控巨噬细胞极化的作用机制 Δ

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李弼仁 ，莫雨晴 ，黄英杰 ，朱 泳 ，罗川晋 （1.海南省中医院急诊科，海口 570100；2.广州中医药大学第一
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临床医学院，广州 510405；3.广州中医药大学第一附属医院心血管科，广州 510405）
中图分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）05-0552-07
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.05.08

摘 要 目的：研究黄连解毒汤调控巨噬细胞极化的作用机制，以期挖掘其抗炎机制。方法：通过中药系统药理学数据库（TC-
MSP）、Swiss Target Prediction数据库筛选出黄连解毒汤的活性成分及预测靶点；通过 GeneCards、OMIM数据库获取巨噬细胞极
化的相关靶点，利用Cytoscape 3.6.0软件绘制黄连解毒汤活性成分-巨噬细胞极化靶点网络图；通过String数据库构建蛋白互作网
络并提取核心靶点；通过Cytoscape 3.6.0软件及DAVID网站进行基因本体（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）
通路富集分析。结合网络药理学分析结果，将小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组（10 μmol/L）和
黄连解毒汤含药血清组（将黄连解毒汤以10 g/kg灌胃大鼠并取血制得），除空白对照组和模型组加入培养基外，其余各组均加入
相应药液或含药血清100 μL，培养2 h；然后除空白对照组外，其余各组均加入脂多糖溶液（100 μg/L）培养24 h以诱导炎症。采用
Western blot法检测细胞中腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）的表达水平，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）法检测细胞中M1
型极化因子[白细胞介素1β（IL-1β）、一氧化氮合酶（iNOS）]和M2型极化因子[IL-10、缺氧诱导分化因子1（Fizz1）]mRNA的表达水
平。结果：共筛选到黄连解毒汤的50种活性成分（如刺槐黄素、汉黄芩素、槲皮素、β-谷甾醇等），其可通过失巢凋亡负调节、星形胶
质细胞活化等12个GO条目，以及雌激素信号通路、膀胱癌通路、AMPK信号通路等20条KEGG通路调控巨噬细胞极化。细胞试
验结果显示，与空白对照组比较，模型组细胞中AMPK蛋白以及Fizz1、IL-10 mRNA的表达水平均显著降低（P＜0.01），IL-1β、iNOS
mRNA 的表达水平均显著升高（P＜0.01）；与模型组比较，黄连解毒汤含药血清组和辛伐他汀组细胞中 AMPK 蛋白以及 Fizz1、
IL-10 mRNA的表达水平均显著升高（P＜0.05或P＜0.01），IL-1β、iNOS mRNA的表达水平均显著降低（P＜0.01）。结论：黄连解
毒汤可通过多个靶点、多个通路调控巨噬细胞极化；其可通过AMPK信号通路上调M2型极化因子的表达、下调M1型极化因子的
表达，调控巨噬细胞极化，发挥抗炎作用。
关键词 黄连解毒汤；巨噬细胞极化；AMPK信号通路；网络药理学；抗炎作用

Study on the Mechanism of Huanglian Jiedu Decoction Regulating Macrophage Polarization Based on
Network Pharmacology
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LI Biren ，MO Yuqing ，HUANG Yingjie ，ZHU Yong ，LUO Chuanjin（1. Dept. of Emergency，Hainan Hospital
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of TCM，Haikou 570100，China；2. The First Clinical Medical College，Guangzhou University of TCM，
Guangzhou 510405，China；3. Dept. of Cardiology，the First Affiliated Hospital of Guangzhou University of
TCM，Guangzhou 510405，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the mechanism of Huanglian jiedu decoction（HJD）regulating macrophage polarization in
order to explore its anti-inflammatory mechanism. METHODS：The active components and predicted targets of HJD were screened
through TCMSP and Swiss Target Prediction database；the related targets of macrophage polarization were obtained by GeneCards
and OMIM database，and the network diagram of active ingredient-macrophage polarization target of HJD was drawn by using
Cytoscape 3.6.0 software；protein interaction network was constructed by String database and core targets were extracted. Gene
ontology（GO）enrichment analysis and Kyoto Encyclopedia of genes and genomes（KEGG）pathway enrichment analysis were
carried out by using Cytoscape 3.6.0 software and DAVID website. Combined with the results of network pharmacology analysis，
RAW264.7 macrophage cells were divided into blank control group，model group，simvastatin group（10 μmol/L）and serum
containing HJD group（obtained from the blood after the rats
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.81673923）；广东省 were given HJD at the dose of 10 g/kg）. Except the blank
普通高校重点科研平台和科研项目（No.2018KQNCX038）
control group and model group were added culture medium，
＊ 主 治 中 医 师 ，硕 士 。 研 究 方 向 ：中 医 内 科 学 。 E-mail：
the other groups were added with 100 μ L of relevant drug
278701716@qq.com
# 通信作者：副主任医师，硕士。研究方向：冠心病的中医药防 solution or serum containing drug. After 2 h of culture，except
治。E-mail：lcj_0124@126.com for the blank control group，LPS solution （100 μ g/L） was

·552 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 5 中国药房 2021年第32卷第5期