Page 63 - 《中国药房》2021年第4期

0.01），详见图1、图2。 mRNA 的相对表达量均显著升高（P＜0.01）。与顺铂组
10 6 10 6 和丹皮酚组比较，低、中、高浓度联用组细胞中 PI3KCA

10 5 10 5 mRNA（除低浓度联用组外）、Akt mRNA（除低、中浓度
PI-A 10 4 PI-A 10 4 联用组外）、mTOR mRNA 的相对表达量均显著降低，
P-gp mRNA（除中浓度联用组外）、PTEN mRNA（除低浓
10 3 10 3
度联用组外）的相对表达量均显著升高（P＜0.01），详见
10 2 10 2
10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 表3。
FITC-A FITC-A 表 3 丹皮酚与顺铂联用对 MG-63 细胞中 PI3KCA、
A.空白对照组 B.顺铂组
10 6 10 6 Akt、mTOR、P-gp、PTEN mRNA 相对表达量的
10 5 10 5 影响（x±±s，n＝3）
PI-A 10 4 PI-A 10 4 Tab 3 Effects of paeonol combined with cisplatin on
relative expression of PI3KCA，Akt，mTOR，
10 3 10 3
P-gp and PTEN mRNA in MG-63 cells（x±±s，
10 2 10 2
10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 n＝3）
FITC-A FITC-A
C.丹皮酚组 D.低浓度联用组 组别 PI3KCA mRNA Akt mRNA mTOR mRNA P-gp mRNA PTEN mRNA
10 6 10 6 空白对照组 1 1 1 1 1
顺铂组 0.562±0.051 ＊＊ 0.636±0.069 ＊＊ 0.573±0.091 ＊＊ 1.703±0.112 ＊＊ 1.868±0.231 ＊＊
10 5 10 5
丹皮酚组 0.564±0.053 ＊＊ 0.646±0.072 ＊＊ 0.574±0.089 ＊＊ 1.727±0.131 ＊＊ 1.902±0.252 ＊＊
PI-A 10 4 PI-A 10 4 低浓度联用组 0.465±0.045 ＊＊ 0.509±0.084 ＊＊ 0.442±0.056 ＊＊##ΔΔ 2.341±0.195 ＊＊##ΔΔ 2.398±0.278 ＊＊
中浓度联用组 0.355±0.046 ＊＊##ΔΔ 0.443±0.087 ＊＊ 0.339±0.053 ＊＊##ΔΔ 2.001±0.314 ＊＊ 3.239±0.351 ＊＊##ΔΔ
10 3 10 3
高浓度联用组 0.277±0.066 ＊＊##ΔΔ 0.321±0.067 ＊＊##ΔΔ 0.255±0.049 ＊＊##ΔΔ 2.284±0.234 ＊＊##ΔΔ 3.749±0.412 ＊＊##ΔΔ
10 2 10 2 注：与空白对照组比较， P＜0.01；与顺铂组比较，P＜0.01；与丹
##
＊＊
10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6
ΔΔ
FITC-A FITC-A 皮酚组比较，P＜0.01
E.中浓度联用组 F.高浓度联用组 Note：vs. blank control group， P＜0.01；vs. cisplatin group， P＜
＊＊
##
图 1 丹皮酚与顺铂联用对 MG-63 细胞凋亡率影响的 0.01；vs. paeonol group，P＜0.05，P＜0.01
ΔΔ
Δ
流式细胞图 4 讨论
Fig 1 Flow cytometries of the effects of paeonol com- 本研究通过CCK-8细胞增殖及细胞毒性检测发现，
bined with cisplatin on the apoptotic rate of 与空白对照组比较，各药物组骨肉瘤细胞各时间点（24、
MG-63 cells 48、72 h）的增殖率均显著降低；与顺铂组和丹皮酚组比
40 ＊＊##ΔΔ 较，低、中、高浓度联用组细胞各时间点的增殖率（除低
浓度联用组作用24 h外）均显著降低。这说明丹皮酚与
30 ＊＊##ΔΔ
顺铂联用可协同抑制骨肉瘤细胞的增殖，且有浓度依赖
％
凋亡率， 20 ＊＊##Δ 性和时间依赖性趋势。
＊＊
＊＊
本研究通过 AnnexinⅤ-FITC/PI 双染法检测细胞凋
10
亡情况，结果显示，与空白对照组比较，各药物组骨肉瘤
0 细胞的凋亡率均显著升高；与顺铂组和丹皮酚组比较，
空白对照组 顺铂组 丹皮酚组 低浓度 中浓度 高浓度
联用组 联用组 联用组 低、中、高浓度联用组细胞的凋亡率均显著升高。这说
组别
明丹皮酚与顺铂联用可促进骨肉瘤细胞凋亡，且有浓度
##
＊＊
注：与空白对照组比较， P＜0.01；与顺铂组比较，P＜0.01；与丹
皮酚组比较，P＜0.05，P＜0.01 依赖性趋势。
Δ
ΔΔ
＊＊
##
Note：vs. blank control group， P＜0.01；vs. cisplatin group， P＜ PI3K是一种可催化磷脂酰肌醇D3位磷酸化的脂类
0.01；vs. paeonol group，P＜0.05，P＜0.01 激酶，研究证实骨肉瘤中存在着PI3KCA基因突变，后者
ΔΔ
Δ
图 2 丹皮酚与顺铂联用对 MG-63 细胞凋亡率的影响 可激活 PI3K 通路，其表达水平与骨肉瘤恶性程度相
（x±±s，n＝3） 关 。Akt是一个丝/苏氨酸蛋白激酶，是PI3K关键的下
[18]
Fig 2 Effects of paeonol combined with cisplatin on 游效应分子 。mTOR 是一种与 PI3K/Akt 通路相关的
[19]
the apoptotic rate of MG-63 cells（x±±s，n＝3） 蛋白激酶 。PI3K 活化产生的信使 PIP3 可激活其下游
[20]
3.3 丹皮酚与顺铂联用对 MG-63 细胞中 PI3KCA、 的 Akt，Akt 激活使肿瘤细胞对凋亡耐受性增加、细胞生
Akt、mTOR、P-gp、PTEN mRNA表达的影响 长代谢异常加速；Akt 通过磷酸化作用激活其下游的底
与空白对照组比较，各药物组细胞中PI3KCA、Akt、 物 mTOR，引起肿瘤细胞癌蛋白分泌增加、细胞周期循
mTOR mRNA 的相对表达量均显著降低，P-gp、PTEN 环加快、G期时程缩短，导致肿瘤迅速发生、发展。
中国药房 2021年第32卷第4期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 4 ·441 ·