Page 52 - 《中国药房》2021年3期

blood circulation and removing blood stasis. METHODS：The effects of different concentration of 12 active components [caffeic
acid（1.56-200 μmol/L），ferulic acid（1.56-200 μmol/L），senkyunolide H（3.125-200 μmol/L），n-butylidenephthalide（3.125-200
μmol/L），ligustilide（1.56-200 μmol/L），cryptotanshinone（0.625-80 μmol/L），tanshinol sodium（1.56-200 μmol/L），paeoniflorin
（1.56-200 μmol/L），formononetin（1.56-200 μmol/L），salvianolic acid B（1.56-200 μmol/L），catechin（1.56-200 μmol/L）and
astragaloside Ⅳ（1.56-200 μmol/L）] on the proliferation of HUVECs were evaluated by CCK-8 assay. The effects of above active
components（3 dose groups，setting up 0 μmol/L blank control group，hereinafter）on mRNA expression of key proteins JAK2，
STAT3，Akt，ERK in JAK/STAT signal pathway were measured by RT-PCR. The effects of each active component on the
expression of PAI-1，VCAM-1，ICAM-1，VEGF and NF-κB p65 were detected by ELISA. RESULTS：Ferulic acid（6.25，25-200
μg/mL），senkyunolide H（6.25-200 μmol/L），ligustilide（200 μmol/L），cryptotanshinone（10-80 μmol/L），paeoniflorin（1.56，
6.25，12.5 μmol/L），salvianolic acid B（1.56-12.5 μmol/L，200 μmol/L）and catechin（25 μmol/L）could significantly inhibit the
proliferation of HUVECs；caffeic acid （1.56，12.5 μ mol/L），ligustilide （50 μ mol/L），trashinol sodium （6.25 μ mol/L） and
paeoniflorin（1.56，100，200 μmol/L）could significantly promote the proliferation of HUVECs （P＜0.05 or P＜0.01）. Compared
with blank control group，mRNA expression of JAK2，STAT3 and Akt were decreased significantly in some dose groups of ferulic
acid，formononetin，salvianolic acid B and astragaloside Ⅳ（P＜0.05 or P＜0.01）；the expression of PAI-1 were significantly
decreased in some dose groups of caffeic acid，ferulic acid and n-butylphthalide；the expression of ICAM-1 and VCAM-1 were
decreased significantly in some dose groups of caffeic acid，ferulic acid，n-butenylphthalide，cryptotanshinone，formononetin and
catechin；the expression of NF-κ B p65 were decreased significantly in some dose groups of ferulic acid，n-butenylphthalide，
formononetin，salvianolic acid B and astragaloside Ⅳ；the expression of VEGF were increased significantly in some dose groups of
caffeic acid and catechin（P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS：The active components of Naoxintong capsule may play the role
of promoting blood circulation and removing blood stasis by inhibiting the expression of JAK/STAT signal pathway key protein
mRNA and PAI-1，ICAM-1，VCAM-1，NF-κB p65 in HUVEC，and promoting the expression of VEGF.
KEYWORDS Naoxintong capsule； Human umbilical vein endothelial cells； Vasoactive substances； Adhesion molecule；
Inflammation factors；Active component；JAK/STAT signal pathway；Mechanism

脑心通胶囊组方是在《医林改错·卷下·瘫痿论》中 因素，核因子κB（NF-κB）与多种关键炎症因子如细胞因
补阳还五汤的基础上加味虫类药、活血化瘀药共 16 味 子类[肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素 6（IL-6）]、黏
中药而成，具有益气活血、化瘀通络的功效 [1－2] 。相关 附分子类（VCAM-1、ICAM-1）等的表达有关 [11－12] 。相关
研究报道，脑心通胶囊主要通过抗动脉粥样硬化、抗炎 研究发现，有机酸类（如咖啡酸、阿魏酸、丹参素钠、丹酚
性反应、抗血小板聚集、改善血管内皮功能和抗心肌缺 酸 B）、苯酞内酯类（如洋川芎内酯 H、丁烯基苯酞、藁本
血再灌注损伤等药理作用发挥治疗心脑血管疾病的作 内酯）、黄酮类（如隐丹参酮、芒柄花素、儿茶素）和皂苷
用 [1－4] 。 类（如芍药苷、黄芪甲苷）等是脑心通胶囊的主要药效成
Janus 激酶/信号转导子及转录激活子（JAK/STAT） 分 [13－15] 。而上述药效成分如何通过调节JAK/STAT信号
信号通路是目前心脑血管疾病分子生物学研究领域的 通路、血管活性物质、黏附分子和炎症因子发挥治疗脑
[5]
热点 ，其通路相关蛋白JAK2、STAT3、蛋白激酶B（Akt） 血管疾病药效的物质基础和作用机制尚不清楚。因此，
和细胞外调节蛋白激酶（ERK）与活血化瘀和血管新生 本研究以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为载体，通过考
[6]
的作用关系密切，并参与血管内皮功能的调节 。纤溶 察脑心通胶囊各药效成分对其JAK/STAT信号通路相关
酶原激活系统是体内防止血栓形成的重要机制，纤溶酶 蛋白（JAK2、STAT3、Akt、ERK）mRNA、血管活性物质
原激活物抑制因子 1（PAI-1）是由血管内皮细胞合成和 （PAI-1、VEGF）、黏附分子（VCAM-1、ICAM-1）及炎症因
释放的活性物质，在机体内含量越高，形成血栓的可能 子（NF-κB p65）等相关指标的影响，研究该药活血化瘀
[7]
性也就越高 ；血管内皮生长因子（VEGF）可通过刺激血 作用的分子机制，为其临床应用提供数据支撑。
管内皮细胞增殖、迁移、分化、管腔形成等，促进血管生 1 材料
[8]
成 ；内皮细胞黏附分子主要有血管内皮细胞黏附分子1 1.1 主要仪器
（VCAM-1）和细胞间黏附分子 1（ICAM-1），在细胞信号 本研究所用的主要仪器有：Light Cycler 96 型实时
传导与活化、凝血和血栓形成、组织损伤修复等生理和 荧光定量聚合酶链式反应（PCR）仪（瑞士 Roche 公司），
病理过程中发挥重要作用，当机体内黏附分子含量升 Veriti TM 96-Well Thermal Cycler型梯度PCR仪（美国ABI
高，容易形成血栓 [9－10] ；炎症是心脑血管疾病的关键驱动 公司），NanoDrop One型超微量分光光度计、3111型CO2

·302 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 3 中国药房 2021年第32卷第3期