Page 39 - 《中国药房》2021年2期

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50 合对照品溶液制备同“2.3.3”项下方法，以水为阴性对照
3 6 7 8
mV 25 4 溶液。
U， 5
0 表3 化风丹药母的相似度评价结果
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Tab 3 Results of similarity evaluation of Huafengdan
t，min
A.混合对照品溶液 yaomu
50
mV 25 1 5 6 7 编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 R
U， 3 4 8 S1 1.000 0.546 0.676 0.596 0.681 0.722 0.708 0.769 0.732 0.724 0.768 0.718 0.821
0
S2 0.546 1.000 0.939 0.410 0.502 0.520 0.552 0.574 0.566 0.504 0.512 0.538 0.712
0 5 10 15 20 25 30 35 40
t，min S3 0.676 0.939 1.000 0.484 0.586 0.612 0.637 0.702 0.687 0.610 0.649 0.627 0.809
B.供试品溶液 S4 0.596 0.410 0.484 1.000 0.498 0.540 0.589 0.613 0.585 0.863 0.826 0.612 0.738
125
100 S5 0.681 0.502 0.586 0.498 1.000 0.992 0.923 0.909 0.921 0.64 0.648 0.900 0.882
mV 75
U， 50 S6 0.722 0.520 0.612 0.540 0.992 1.000 0.934 0.931 0.938 0.688 0.699 0.917 0.910
25 S7 0.708 0.552 0.637 0.589 0.923 0.934 1.000 0.974 0.956 0.707 0.714 0.952 0.929
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 S8 0.769 0.574 0.702 0.613 0.909 0.931 0.974 1.000 0.979 0.745 0.776 0.929 0.954
t，min S9 0.732 0.566 0.687 0.585 0.921 0.938 0.956 0.979 1.000 0.714 0.733 0.924 0.939
C.阴性对照溶液 S10 0.724 0.504 0.610 0.863 0.640 0.688 0.707 0.745 0.714 1.000 0.906 0.731 0.852
注：1.尿嘧啶；3.次黄嘌呤；4.黄嘌呤；5.尿苷；6.肌苷；7.鸟苷；8.胸苷 S11 0.768 0.512 0.649 0.826 0.648 0.699 0.714 0.776 0.733 0.906 1.000 0.762 0.867
S12 0.718 0.538 0.627 0.612 0.900 0.917 0.952 0.929 0.924 0.731 0.762 1.000 0.924
Note：1. uracil；3. hypoxanthine；4. xanthine；5. uridine；6. ino-
R 0.821 0.712 0.809 0.738 0.882 0.910 0.929 0.954 0.939 0.852 0.867 0.924 1.000
sine；7. guanosine；8. thymidine
图3 化风丹药母的高效液相色谱图 2.4.3 系统适用性试验 取上述混合对照品溶液、供试
Fig 3 HPLC chromatograms of Huafengdan yaomu 品溶液、阴性对照溶液各适量，按“2.4.1”项下色谱条件
进样测定，记录色谱图。结果，各待测成分色谱峰与
表1 化风丹药母指纹图谱共有峰的相对保留时间
相邻色谱峰的分离度均大于 1.5，理论板数均不低于
Tab 1 Relative retention time of common peak in the
10 000，详见图3。
fingerprints of Huafengdan yaomu
2.4.4 线性关系考察 取“2.4.2”项下混合对照品溶液
峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 1、2、4、6、8、10 mL，分别置于 10 mL 量瓶中，加水定容，
1 0.490 0.490 0.491 0.491 0.492 0.489 0.493 0.492 0.489 0.489 0.490 0.491
2 0.671 0.672 0.671 0.671 0.671 0.669 0.671 0.677 0.672 0.671 0.671 0.671 混匀，得系列线性工作溶液；精密吸取上述系列线性工
3 0.863 0.864 0.866 0.865 0.864 0.863 0.864 0.859 0.863 0.864 0.863 0.861 作溶液，按“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，
4 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 以待测成分质量浓度（X，μg/mL）为横坐标、峰面积（Y）
5 1.303 1.305 1.310 1.303 1.303 1.303 1.310 1.300 1.310 1.300 1.303 1.304
6 2.067 2.071 2.074 2.074 2.072 2.073 2.071 2.077 2.064 2.073 2.084 2.083 为纵坐标进行线性回归，结果见表4。
7 2.130 2.133 2.146 2.144 2.144 2.143 2.140 2.150 2.142 2.145 2.145 2.144 表4 化风丹药母中7种核苷类成分的回归方程与线性
8 2.499 2.507 2.522 2.512 2.510 2.502 2.496 2.511 2.506 2.503 2.504 2.501
范围
表2 化风丹药母指纹图谱共有峰的相对峰面积 Tab 4 Regression equations and linear ranges of 7
Tab 2 Relative peak area of common peak in the fin- nucleosides in Huafengdan yaomu
gerprints of Huafengdan yaomu 待测成分 回归方程 r 线性范围，μg/mL
峰号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 尿嘧啶 Y＝49 842X+19 617 0.999 6 0.87～8.7
1 0.958 1.341 1.908 1.233 1.193 1.226 1.216 1.768 1.736 1.289 1.675 1.090 次黄嘌呤 Y＝62 377X+22 510 0.999 7 1.51～15.1
2 0.083 0.372 0.102 0.171 0.088 0.086 0.174 0.081 0.086 0.112 0.083 0.180 黄嘌呤 Y＝47 738X+32 023 0.999 5 6.08～60.8
3 0.098 0.451 0.493 0.450 0.349 0.384 0.455 0.498 0.473 0.393 0.319 0.275 尿苷 Y＝34 414X+13 148 0.999 6 1.52～15.2
4 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 肌苷 Y＝36 341X+14 491 0.999 6 1.82～18.2
5 0.431 0.351 0.316 0.319 0.394 0.355 0.359 0.38 0.348 0.360 0.433 0.390 鸟苷 Y＝39 970X+15 268 0.999 6 1.48～14.8
6 0.041 0.067 0.136 0.147 0.161 0.156 0.104 0.138 0.149 0.148 0.071 0.072 胸苷 Y＝258 772X+18 987 0.999 3 1.63～16.3
7 0.015 0.077 0.120 0.097 0.111 0.092 0.033 0.072 0.085 0.077 0.078 0.076 2.4.5 定量限与检测限考察 取“2.4.2”项下混合对照
8 0.261 0.255 0.284 0.351 0.337 0.333 0.274 0.256 0.325 0.308 0.267 0.245
品溶液适量，用水逐级稀释，按“2.4.1”项下色谱条件进
2.3.9 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评
样测定，分别以信噪比 10 ∶ 1、3 ∶ 1 计算定量限、检测限。
价系统（2012 版）》，以 S1 为对照，对 12 批化风丹药母发 结果，尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷的
酵1周样品进行整体相似度评价。结果，12批化风丹药 定量限分别为0.027 4、0.076 3、0.250 4、0.172 3、0.101 1、
母指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为 0.712～0.954， 0.078 3、0.084 2 μg/mL，检测限分别为 0.008 7、0.025 5、
详见表3。 0.007 9、0.084 1、0.035 7、0.026 9、0.027 5 μg/mL。
2.4 7种核苷类成分的含量测定 2.4.6 精密度试验 取“2.4.2”项下混合对照品溶液，按
2.4.1 色谱条件 同“2.3.1”项下色谱条件。 “2.4.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记录峰面积。
2.4.2 溶液的制备 供试品溶液制备同“2.3.2”项下，混 结果，尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷

中国药房 2021年第32卷第2期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2 ·161 ·