Page 37 - 《中国药房》2021年2期

detection limits were 0.008 7，0.025 5，0.007 9，0.084 1，0.035 7，0.026 9，0.027 5 μg/mL，respectively. RSDs of precision，
repeatability and stability tests（12 h）were all less than 3％. The sample recovery rates were 94.16％-100.16％（RSD＝2.24％，n＝
6），93.87％-100.65％（RSD＝2.67％，n＝6），93.52％-99.66％（RSD＝2.30％，n＝6），93.67％-98.24％（RSD＝1.89％，n＝6），
96.00％-102.18％（RSD＝1.96％，n＝6），94.62％-101.54％（RSD＝2.82％，n＝6），97.72％-104.56％（RSD＝2.97％，n＝6）.
After fermentation for 0-4 weeks，the contents of the above 7 components and total nucleosides were 0.042-0.232，0.027-0.181，
0.039-0.651，0.026-0.225，0.034-0.111，0.009-0.124，0.079-0.099，0.647-1.292 mg/g，respectively. After fermentation for 1-4
weeks，the contents of uracil，hypoxanthine，xanthine and total nucleosides were significantly increased，compared with 0 week of
fermentation；the contents of uridine，inosine and guanosine were significantly lower than those in 0 weeks. CONCLUSIONS：The
established fingerprint has strong characteristics and simple to operate，which can be used for the quality control of Huafengdan
yaomu；the content determination method is accurate and reliable，and can be used to simultaneously determine the contents of 7
active nucleosides；the content of nucleosides in Huafengdan muyao is affected by fermentation time.
KEYWORDS Huafengdan yaomu；HPLC；Fingerprint；Nucleosides；Content determination

化风丹是贵州省传统名药，具有息风镇痉、豁痰开 1 材料
窍的功效，临床用于治疗风痰闭阻、中风偏瘫、癫痫等 1.1 仪器
症，疗效显著 [1－2] 。化风丹的制备分为药母制备和成药 本研究所用的仪器有：LC-20AT 型 HPLC 仪（包括
制备。其中，药母是将川乌、半夏、天南星、白附子、郁金 LC-20AT 型二元泵、SPD-20A 型紫外-可见光检测器，日
等药材粉碎，再加入六神曲和牛胆汁混匀，于自然条件 本 Shimadzu 公司）、METTLER AE240 型万分之一电子
下发酵，经阴干后即得 [3－5] 。含有毒性成分的中药是中 分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）、KQ-500DE型数控
药重要组成部分，在中药复方制剂中的应用十分广泛， 超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、SHZ-D（Ⅲ）
[6]
在临床实践中发挥了重要治疗作用 。化风丹药母中含 型循环水真空泵[邦西仪器科技（上海）有限公司]、
有川乌、半夏、天南星等多种含毒性成分的中药，有研究 HSX-250型恒温恒湿培养箱（上海海向仪器设备厂）。
认为，发酵可以减弱药物毒副作用，增强疗效，改变药物 1.2 药品与试剂
的原有性能，有利于成分溶出并产生新的活性成分和治
尿嘧啶对照品（批号 100469-201302，纯度 99.6％）、
[7]
疗作用 。而化风丹药母采用发酵法进行炮制，目的就
次黄嘌呤对照品（批号140661-201704，纯度100％）、黄嘌
在于减少副作用、增强疗效。
呤对照品（批号140662- 201606，纯度100％）、尿苷对照品
目前，关于化风丹药母质量检测仅有药母中毒性生
（批号 110887-201802，纯度 99.5％）、肌苷对照品（批号
物碱乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲
140669-201606，纯度98.6％）、鸟苷对照品（批号111977-
[8]
酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱的报道 ，暂无有关其药母
201501，纯度93.6％）、胸苷对照品（批号101215-201401，
中有效成分含量的研究，且关于化风丹药母质量控制及
纯度 100％）均购自中国食品药品检定研究院；药材样
发酵前后主要化学成分或指标性成分的变化也未见相
品 天 南 星 、半 夏 、白 附 子、川乌、郁金（批号分别为
关文献报道。因此，建立综合评价化风丹药母质量的方
20190506、20190412、20190215、20190116、20190309）和
法尤为重要。化风丹药母中的天南星、半夏、白附子为
六神曲（批号 190207）均购自亳州康美中药城，5 种药材
天南星科植物，化学成分相似，都含有生物碱、核苷、挥
经贵州中医药大学中药民族药资源研究院肖承鸿高级
发油、氨基酸、有机酸等成分 [9－11] 。其中，核苷类如肌苷、
实验师鉴定分别为天南星科植物天南星 Arisaema eru-
尿苷、鸟苷、黄嘌呤、尿嘧啶、次黄嘌呤、胸苷等成分具有
bescens（Wall.）Schott 的干燥块茎，天南星科植物半夏
广泛的药理活性，如调节免疫、调节脑细胞代谢、镇静中
Pinellia ternata（Thunb.）Breit.的干燥块茎，天南星科植
枢神经、抗血小板聚集等 [12－15] 。有文献报道，半夏、天南
物独角莲 Typhonium giganteum Engl.的干燥块茎，毛茛
星和白附子均含有肌苷、尿苷、鸟苷、黄嘌呤等成分 ，
[16]
因此核苷类成分可以作为化风丹药母的指标性成分。 科植物乌头 Aconitum carmichaelii Debx.的干燥母根，姜
指纹图谱及多成分检测能提供丰富的指标成分或 科植物温郁金Curcuma zvenyujin Y. H. Chenet C. Ling的
药效成分信息，可全面反映药品的质量，近年来已被广 干燥块根；牛胆汁收集自屠宰场（按前期研究筛选pH值
泛应用于中药材和中成药的质量控制领域 [17－18] 。为此， 为6.27～7.29）；甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水
本研究建立了化风丹药母的高效液相色谱（HPLC）指纹 为超纯水。
图谱，同时采用HPLC法测定不同发酵时间样品中尿嘧 2 方法与结果
啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷等7种核苷 2.1 化风丹药母的制备
类成分的含量，旨在为化风丹药母的整体质量评价和质 按化风丹药母处方比例（生川乌 ∶ 白附子 ∶ 生半夏 ∶
量控制提供参考。 生南星 ∶ 郁金 ∶ 六神曲＝1 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 0.5 ∶ 0.005，g/g，下同）

中国药房 2021年第32卷第2期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2 ·159 ·