Page 40 - 《中国药房》2021年2期

峰面积的 RSD 分别为 1.57％、0.92％、2.20％、1.16％、 表5 化风丹药母中7种核苷类成分的加样回收率试验
1.15％、1.39％、1.42％（n＝6），表明仪器精密度良好。 结果（n＝6）
2.4.7 重复性试验 取化风丹药母发酵 1 周样品（编号 Tab 5 Results of recovery tests of 7 nucleosides in
Huafengdan yaomu（n＝6）
S3），约3 g，共6份，按“2.4.2”项下方法制备供试品溶液，
取样量， 已知含量， 加入量， 测得量， 加样回收率， 平均加样回率， RSD，
再按“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外 待测成分
g mg mg mg ％ ％ ％
标法计算样品含量。结果，尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、 尿嘧啶 1.503 0 0.253 7 0.257 0 0.511 1 100.16 97.41 2.24
尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷的含量分别为 0.169、0.081、 1.523 1 0.257 1 0.257 0 0.505 7 96.73
1.549 8 0.261 6 0.257 0 0.510 6 96.89
0.324、0.161、0.037、0.009、0.098 mg/g，RSD 分 别 为 1.500 3 0.253 3 0.257 0 0.495 3 94.16
1.25％、1.97％、1.18％、2.03％、2.94％、2.77％、2.02％ 1.549 1 0.261 5 0.257 0 0.510 0 96.69
1.523 4 0.257 1 0.257 0 0.513 6 99.81
（n＝6），表明方法重复性良好。 次黄嘌呤 1.503 0 0.122 3 0.124 0 0.247 1 100.65 96.87 2.67
2.4.8 稳定性试验 取“2.4.2”项下供试品溶液（编号 1.523 1 0.124 0 0.124 0 0.240 4 93.87
1.549 8 0.126 2 0.124 0 0.249 3 99.27
S3），分别于室温下放置 0、1、2、4、6、8、12 h 时按“2.4.1” 1.500 3 0.122 1 0.124 0 0.242 0 96.69
项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，尿嘧啶、次 1.549 1 0.126 1 0.124 0 0.245 6 96.37
1.523 4 0.124 0 0.124 0 0.241 0 94.35
黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷峰面积的RSD分
黄嘌呤 1.503 0 0.487 0 0.494 0 0.979 3 99.66 96.95 2.30
别 为 2.00％ 、2.13％ 、2.46％ 、1.58％ 、2.43％ 、1.27％ 、 1.523 1 0.493 5 0.494 0 0.977 7 98.02
1.549 8 0.502 1 0.494 0 0.970 4 94.80
2.78％（n＝7），表明供试品溶液于室温放置 12 h 内稳定
1.500 3 0.486 1 0.494 0 0.969 6 97.87
性良好。 1.549 1 0.501 9 0.494 0 0.963 9 93.52
1.523 4 0.493 6 0.494 0 0.977 0 97.85
2.4.9 加样回收率试验 取已知含量的化风丹药母发
尿苷 1.503 0 0.241 8 0.245 0 0.473 6 94.61 95.11 1.89
酵 1 周样品（编号 S3），约 1.5 g，共 6 份，精密称定，分别 1.523 1 0.245 1 0.245 0 0.475 0 93.84
精密加入各单一对照品溶液（精密称定尿嘧啶、次黄嘌 1.549 8 0.249 4 0.245 0 0.478 9 93.67
1.500 3 0.241 4 0.245 0 0.478 0 96.57
呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷对照品各12.85、6.20、 1.549 1 0.249 3 0.245 0 0.478 9 93.71
12.35、12.25、13.75、3.25、7.45 mg，加水制成上述成分质 1.523 4 0.245 1 0.245 0 0.485 8 98.24
肌苷 1.503 0 0.054 9 0.055 0 0.111 1 102.18 99.12 1.96
量浓度分别为 0.257、0.124、0.494、0.245、0.055、0.013、 1.523 1 0.055 6 0.055 0 0.110 1 99.09
0.149 mg/mL的单一对照品溶液）1 mL，按“2.4.2”项下方 1.549 8 0.056 6 0.055 0 0.111 2 99.27
1.500 3 0.054 8 0.055 0 0.107 6 96.00
法制备供试品溶液，再按“2.4.1”项下色谱条件进样测 1.549 1 0.056 5 0.055 0 0.110 9 98.91
定，记录峰面积并计算加样回收率，结果见表5。 1.523 4 0.055 6 0.055 0 0.110 2 99.27
鸟苷 1.503 0 0.012 9 0.013 0 0.025 8 99.23 98.08 2.82
2.4.10 样品含量测定 精密称取“2.2”项下不同发酵时
1.523 1 0.013 1 0.013 0 0.025 4 94.62
间的化风丹药母样品，约3 g，按“2.4.2”项下方法制备供 1.549 8 0.013 3 0.013 0 0.026 2 99.23
1.500 3 0.012 9 0.013 0 0.026 1 101.54
试品溶液，再按“2.4.1”项下色谱条件进样测定，记录峰
1.549 1 0.013 3 0.013 0 0.025 6 94.62
面积并按外标法计算样品含量，结果见表6。 1.523 4 0.013 1 0.013 0 0.026 0 99.23
胸苷 1.503 0 0.147 4 0.149 0 0.303 1 104.50 101.41 2.97
由表6可知，发酵0周（未发酵）时，化风丹药母中尿
1.523 1 0.149 4 0.149 0 0.299 7 100.87
嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤及总核苷的平均含量分别为 1.549 8 0.152 0 0.149 0 0.297 6 97.72
0.042、0.027、0.039、0.647 mg/g；发酵不同时间（1～4 周） 1.500 3 0.147 2 0.149 0 0.303 0 104.56
1.549 1 0.152 0 0.149 0 0.304 7 102.48
后，上述3种成分及总核苷的平均含量均明显高于发酵 1.523 4 0.149 4 0.149 0 0.295 9 98.32
0 周时，平均含量分别为 0.160～0.232、0.070～0.181、 表6 不同发酵时间化风丹药母中7种核苷类成分的含
0.298～0.651、0.845～1.292 mg/g。发酵 0 周时，化风丹 量测定结果（mg/g）
药母中尿苷、肌苷、鸟苷的平均含量分别为0.225、0.111、 Tab 6 Content determination results of samples at dif-
0.124 mg/g；发酵不同时间（1～4周）后，上述3种成分的 ferent fermentation times of 7 nucleosides in
Huafengdan yaomu（mg/g）
平均含量均明显低于发酵 0 周时，平均含量分别为
待测成分 发酵0周 发酵1周 发酵2周 发酵3周 发酵4周
0.026～0.162、0.034～0.071、0.009～0.032 mg/g。发酵 0 尿嘧啶 0.042 0.160 0.232 0.205 0.215
周时，胸苷的平均含量为0.079 mg/g；发酵不同时间（1～ 次黄嘌呤 0.027 0.077 0.070 0.111 0.181
黄嘌呤 0.039 0.298 0.621 0.548 0.651
4周）后，其含量稍有增加，为0.084～0.099 mg/g。
尿苷 0.225 0.162 0.026 0.044 0.085
3 讨论 肌苷 0.111 0.040 0.034 0.071 0.048
鸟苷 0.124 0.009 0.031 0.032 0.028
中药复方制剂化学成分复杂，选择梯度洗脱能有利
胸苷 0.079 0.099 0.090 0.094 0.084
[20]
[19]
于不同极性成分的分离 。本研究参考相关文献方法 ， 总核苷 0.647 0.845 1.104 1.105 1.292
·162 · China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 2 中国药房 2021年第32卷第2期