Page 72 - 《中国药房》2020年第24期

800 1 80 子丙素、五味子酯甲峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝6），
700 70
600 60 表明供试品溶液于室温下放置12 h内稳定性良好。
500 3 50 6
mV 400 mV 40 2.1.9 加样回收率试验 取已知含量的样品粉末（编
U， 300 U， 30
200 2 4 20 号：S1），约 0.25 g，共 6 份，分别加入“2.1.2”项下两种对
100 5 10 照品溶液适量，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再
0 0
0 5 10 15 20 25 0 10 20 30 40 50 按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加
t，min t，min 样回收率。结果，五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲
A.混合对照品溶液（洗脱条件1） B.五味子酯甲对照品溶液（洗脱条件2）
素、五味子乙素、五味子丙素、五味子酯甲的加样回收率分
800 80
1
700 70 别为 98.14％～101.53％（RSD＝1.08％，n＝6）、97.16％～
600 60
500 50 101.05％（RSD＝1.54％ ，n＝6）、98.29％ ～101.41％
mV 400 mV 40
U， 300 4 U， 30 （RSD＝1.29％，n＝6）、97.17％～100.36％（RSD＝1.20％，
200 3 20
100 5 10 6 n＝6）、97.32％～102.43％（RSD＝1.77％，n＝6）、98.02％～
0 0
100.40％（RSD＝0.84％，n＝6）。
0 5 10 15 20 25 0 10 20 30 40 50
t，min t，min 2.1.10 样品含量测定 取 39 批南、北五味子样品粉末
C.供试品溶液（编号：S1，洗脱条件1） D.供试品溶液（编号：S1，洗脱条件2）
适量，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”
800 3 80
700 70 项下色谱条件进样测定，每样品平行测定4次，记录峰面
600 60
500 50 积并按外标一点法计算样品含量，结果见表 3（表中，均
mV 400 mV 40
U， U， 以检测结果的平均值表示，下同）。由表3可知，北五味
300 30 6
200 20 子中五味子醇甲含量较高，南五味子中五味子酯甲含量
100 5 10
0 0 较高，且南五味子中未检出五味子醇甲、五味子醇乙和
0 5 10 15 20 25 0 10 20 30 40 50 五味子乙素。
t，min t，min
E.供试品溶液（编号：S36，洗脱条件1） F.供试品溶液（编号：S36，洗脱条件2） 2.2 颜色测定
20.0 20.0 2.2.1 三色空间值的测定方法 每批药材样品随机选
17.5 17.5
15.0 15.0 取一定量，平铺满整个测试器皿。每份样品随机选 10
12.5 12.5
mV 10.0 mV 10.0 处，平行3份，采用色差仪测定ΔL 、Δa 、Δb ，取平均值，
＊
＊
＊
U， 7.5 U， 7.5
＊
＊
5.0 5.0 以白纸为标准样品。其中，ΔL 与亮度呈正相关，ΔL 越
2.5 2.5 ＊ ＊
0 0 大，样品颜色越明亮；Δa 为红-绿色轴，Δa 越大表示样
＊
＊
0 5 10 15 20 25 0 10 20 30 40 50 品越红，越小表示样品越绿；Δb 为黄-蓝色轴，Δb 越大
t，min t，min
＊
G.空白溶液（洗脱条件1） H.空白溶液（洗脱条件2） 表示样品越黄，越小表示样品越蓝；ΔE 表示待测样品颜
＊2
＊
＊2
＊2
注：1.五味子醇甲；2.五味子醇乙；3.五味子甲素；4.五味子乙素；5. 色的总色差，ΔE ＝（ΔL +Δa +Δb ） 1/2[16] 。
五味子丙素；6.五味子酯甲 2.2.2 精密度试验 取样品（编号：S1）适量，置于测试
Note：1. schizandrol A；2. schizandrol B；3. schisandrin A；4.
器皿中，按“2.2.1”项下方法于同一时间连续测定三色空
schisandrin B；5. schisandrin C；6. schisantherin A
间值 6 次。结果，ΔL 、Δa 、Δb 的 RSD 分别为 1.84％、
＊
＊
＊
图1 高效液相色谱图
2.44％、2.25％（n＝6），表明方法精密度良好。
Fig 1 HPLC chromatograms
2.2.3 不同光照强度下的稳定性试验 取样品（编号：
表2 回归方程与线性范围
S1）适量，置于测试器皿中，按“2.2.1”项下方法分别于同
Tab 2 Regression equation and linear range
日内 8：00、10：00、12：00、13：00、15：00、17：00 时测定三
待测成分 回归方程 r 线性范围，μg
五味子醇甲 Y＝6 311.5X + 55.161 1.000 0 0.204 8～2.560 0 色空间值，每个时间点平行测定3次，取平均值。结果，
五味子醇乙 Y＝6 497.8X－13.707 0.999 9 0.049 3～0.616 3 ΔL 、Δa 、Δb 的RSD分别为1.63％、2.92％、2.46％（n＝
＊
＊
＊
五味子甲素 Y＝6 569.5X－20.164 0.999 9 0.098 4～1.230 0 6），表明不同光照强度对试验结果的稳定性影响较小。
五味子乙素 Y＝7 159.9X－11.605 0.999 9 0.046 3～0.578 8
五味子丙素 Y＝5 931.2X+9.302 4 0.999 8 0.010 6～0.132 0 2.2.4 样品稳定性试验 取样品（编号：S1）适量，置于
五味子酯甲 Y＝929.25X+0.239 5 0.999 6 0.100 0～1.500 0
测试器皿中，按“2.2.1”项下方法于室温下连续 5 天在同
S1）适量，分别于室温下放置 0、2、4、6、8、12 h 时按 一时间点测定三色空间值。结果，ΔL 、Δa 、Δb 的RSD
＊
＊
＊
“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，五 分别为 1.85％、2.65％、2.82％（n＝5），表明样品稳定性
味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味 良好，在短期内表面颜色无明显变化。
·3010 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 24 中国药房 2020年第31卷第24期