Page 76 - 《中国药房》2020年第24期
P. 76

仙 鹤 草 为 蔷 薇 科 植 物 龙 芽 草 Agrimonia pilosa                    表1 仙鹤草样品来源信息
        Ledeb.的干燥地上部分，主产于我国浙江、江苏、湖北、安                           Tab 1  Information source of A. pilosa samples
        徽等地，多在夏秋两季茎叶茂盛时采收；具有收敛止血、                           编号       产地      采收时间    编号      产地      采收时间
        截疟、止痢等功效，多用于治疗咯血、吐血、崩漏下血、疟                          S1    安徽省亳州市    2017年8月  S9    四川省成都市   2017年7月
                                                            S2    安徽省亳州市    2017年8月  S10   河南省南阳市   2017年7月
        疾、血痢等 。仙鹤草中主要含有黄酮类、三萜类、鞣质                           S3    安徽省亳州市    2017年8月  S11   河南省南阳市   2017年7月
                  [1]
        类以及酚类等化学成分，以黄酮类、鞣质类成分居                              S4    浙江省衡州市    2017年7月  S12   河南省南阳市   2017年7月
        多 [2-5] 。现代药理研究表明，仙鹤草中的黄酮类成分具有                      S5    浙江省衡州市    2017年7月  S13   江苏省淮安市   2017年8月
                                                            S6    浙江省衡州市    2017年7月  S14   江苏省淮安市   2017年8月
        抗菌、抗病毒、降血糖、抗氧化等重要药理活性                    [6-8] ；鞣质
                                                            S7    四川省成都市    2017年7月  S15   江苏省淮安市   2017年8月
        类成分能在体外抑制肝癌、胃癌细胞增殖，其收敛止血                            S8    四川省成都市    2017年7月
        及广谱抗菌等作用显著           [8-15] 。该药材临床使用量较大，            2 方法与结果
                                            [6]
        控制其质量对确保临床疗效有着重要意义 。                                2.1 仙鹤草药材HPLC特征图谱测定方法的建立
            浸出物测定系指用水或其他适宜的溶剂对药材和                           2.1.1  色谱条件      色谱柱：Eclipse XDB-C18 （250 mm×
                                   [16]
        饮片中的可溶性物质进行测定 ，是中药材质量控制的                            4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-0.1％磷酸水溶液（B），
        重要部分，但2015年版《中国药典》（一部）“仙鹤草”项下                       梯度洗脱（0～30 min，13％A；30～65 min，13％A→
        仅记载其鉴别和检查等方法 ，而未对浸出物含量进行                            22％ A；65～80 min，22％ A→30％ A；80～100 min，
                                 [1]
        限定，也未采用液相色谱法等分析手段进行质量评价。                            30％A）；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：254
        中药特征图谱是一种能较全面反映药材质量的重要方                             nm；进样量：10 μL。
                                       [17]
        法，被广泛应用于药材的质量评价 。基于此，本研究                            2.1.2  溶液的制备      ①混合对照品溶液：分别称取鞣花
        拟优选仙鹤草浸出物的提取工艺并测定其浸出物含量；                            酸、槲皮苷、芹菜素、山柰酚对照品适量，精密称定，加
        同时，建立仙鹤草药材特征图谱，并基于其浸出物含量                            甲醇制成每 1 mL 分别含鞣花酸 10.72 μg、槲皮苷 70.65
        和药材特征图谱，采用熵权逼近理想解排序法（TOP-                           μg、芹菜素 6.96 μg、山柰酚 4.18 μg 的混合对照品溶液，
        SIS）综合评价15批不同产地仙鹤草药材的质量，为进一                         用0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。②供试品溶
        步确保该药材质量的有效、稳定以及优质种源的筛选提                            液：取仙鹤草药材粉末（过三号筛，下同）1.0 g，精密称
        供参考依据。                                              定，置于具塞锥形瓶中，精密加入 50％乙醇 25 mL，密
        1 材料                                                塞，称定质量，加热回流45 min，取出，放冷，再次称定质
        1.1  仪器                                             量，用50％乙醇补足减失的质量，用0.22 μm微孔滤膜滤
            ARC 型高效液相色谱（HPLC）仪，含二极管阵列                       过，取续滤液，即得。
        （PDA）检测器（美国 Waters 公司）；KQ-700DE 型数控超                2.1.3  精密度试验      取仙鹤草药材（编号：S14）粉末适
        声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；ME204E 型万                        量，按“2.1.2②”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”
        分之一分析天平（瑞士 Mettler Toledo 公司）；111B 型二               项下色谱条件连续进样 6 次测定，结果得 12 个特征峰。
        两装高速中药粉碎机（瑞安市永历制药机械有限公司）；                           以峰面积较大、分离度较好的 6 号色谱峰作为参照峰
        DHG-9147A 型电热恒温干燥箱（上海精宏实验设备有                       （S）进行计算，其余11个特征峰相对保留时间的RSD均
        限公司）；HWS28 型电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪                         小于1.0％（n＝6）、相对峰面积的RSD均小于2.0％（n＝
        器有限公司）。                                             6），表明方法精密度良好。
        1.2  药品与试剂                                          2.1.4  重复性试验      取同一批仙鹤草药材（编号：S14）
            槲 皮 苷 对 照 品（批 号 ：111538-201606，纯 度 ：≥           粉末适量，共6份，按“2.1.2②”项下方法平行制备供试品
        90.6％）、芹菜素对照品（批号：111901-201603，纯度：≥                 溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定。以 6 号色谱
        99.2％）、山柰酚对照品（批号：110861-201611，纯度：≥                 峰作为参照峰（S）进行计算，其余11个特征峰相对保留
        95.5％）、鞣花酸对照品（批号 111959-201903，纯度：≥                 时间的RSD均小于1.0％（n＝6）、相对峰面积的RSD 均
        89.3％）均购自中国食品药品检定研究院；磷酸、甲醇、乙                        小于2.0％（n＝6），表明方法重复性较好。
        腈均为色谱纯，乙醇为分析纯，水为超纯水。                                2.1.5  稳定性试验      取仙鹤草药材（编号：S14）粉末适
            15 批仙鹤草药材分别于 2017 年采集自安徽亳州                      量，按“2.1.2②”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”
        市、浙江衡州市、四川成都市、河南南阳市、江苏淮安市，                          项下色谱条件分别于室温下放置0、2、4、8、12、24 h时进
        并于同市不同乡镇各采集3批，经过广东一方制药有限                            样测定。以 6 号色谱峰作为参照峰（S）进行计算，其余
        公司魏梅主任药师鉴定为蔷薇科植物龙芽草 A. pilosa                       11 个特征峰相对保留时间的 RSD 均小于 1.0％（n＝6）、
        Ledeb.的干燥地上部分，且符合 2015 年版《中国药典》                     相对峰面积的 RSD 均小于 2.0％（n＝6），表明供试品溶
        （一部）要求 。12批仙鹤草样品来源信息见表1。                            液在室温下放置24 h内稳定性良好。
                  [1]

        ·3014 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 24                                 中国药房    2020年第31卷第24期
   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81