Page 123 - 《中国药房》2020年23期

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目前，国内温文旭等 仅从丝瓜中检测出13种多酚 分在固定相上相互分离的目的 。Du QZ等 使用慢速
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成分，分别是龙胆酸、L-酪氨酸、绿原酸、焦性没食子酸、 旋转逆流色谱法对丝瓜提取物进行酚类化合物的制备
多巴胺、原儿茶酸、儿茶酚、香草酸、表儿茶酸、对羟基苯 和分离，结果表明，该方法是一种制备大量天然产物（如
甲酸、4-甲基儿茶酚、丁香酸、对香豆酸。国外 Hlel TB 丝瓜多酚）的有效方法，可应用于工业化分离多酚类
等 采用气相色谱-质谱法和高效液相色谱-质谱法对丝 物质。
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瓜多酚成分进行分析，共检测出没食子酸、龙胆酸、绿原 3.2 大孔吸附树脂法
酸、4-羟基苯甲酸、儿茶酚、香草酸、芦丁、对香豆酸、阿 大孔吸附树脂法因具有工艺简单、操作便捷、吸附
魏酸、水杨酸、柚皮苷等11种多酚成分。 容量大等特点，适合于工业化生产中多酚类化合物的分
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2 丝瓜多酚的提取方法 离提纯 。Du QZ等 采用大孔吸附树脂法分离丝瓜乙
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由于多酚类化合物的多样性以及易与碳水化合物 醇提取物，并结合慢速旋转逆流色谱法分析丝瓜多酚的
和蛋白质形成结合物的特性，导致不同种类多酚类化合 抗氧化潜力。大孔树脂的吸附作用取决于吸附物质与
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物的理化特性与溶解性不同，因此从丝瓜中高效提取多 吸附剂之间的氢键与范德华力 ，更适用于从水溶液中
酚类化合物仍是一个具有挑战性的工作 。目前，多酚 提取低极性或非极性化合物，对于极性较强的多酚类化
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类化合物常用的提取方法有溶剂萃取法、加压液体萃取 合物的分离则较为困难 ，因此在对丝瓜多酚分离时可
法、酶辅助法、微波辅助法、超声辅助法、超临界流体萃 与其他方法联用，以达到有效分离的目的。
取法等，其中最常用的是溶剂萃取法和超声辅助法 。 4 丝瓜多酚含量测定方法
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2.1 溶剂萃取法 4.1 福林酚比色法
溶剂萃取法是最常见的一种提取方法，它利用“相 测定丝瓜多酚含量的方法主要有福林酚比色法和
似相溶”原理将多酚类化合物萃取出来，通常使用不同 色谱分析法，其中福林酚比色法通常被用来测定丝瓜总
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极性的溶剂萃取不同成分 。温文旭 选取乙醇等不同 多酚的含量，其原理为酚类化合物在碱性溶液中可与钨
有机溶剂作为提取剂进行优化，结果表明，以乙醇为提 钼酸发生还原反应，生成蓝色化合物，其颜色深浅与酚
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取剂，在料液比为1∶20（g/mL）、pH为3～4的条件下，丝 类化合物含量呈正相关 。朱海生等 将丝瓜多酚提取
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瓜多酚类化合物的提取效率最好，所得总多酚含量可达 分离后，使用福林酚比色法对丝瓜总多酚的含量进行测
约 50 mg/kg。虽然溶剂萃取法对多酚类化合物有较好 定。结果显示，在可见光波长 750 nm、0.5 mol/L Na2CO3
的回收率，但也存在溶剂用量大、提取时间长、溶剂毒 溶液环境、反应温度 30 ℃、反应时间 60 min 的条件下，
性、目标化合物有可能降解等缺点。 丝瓜总多酚含量与吸光度成良好的线性关系。福林酚
2.2 超声辅助法 比色法具有稳定性高、操作便捷、可批量检测等优点，适
超声辅助法是利用超声波细胞破碎仪发出的声波 用于丝瓜总多酚的含量测定，但缺点是无法对单一成分
产生高速、强烈的空化效应和搅拌效应，破坏植物药材 进行测定。
的细胞，使溶剂更易渗透进入，从而达到缩短提取时间、 4.2 色谱分析法
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提高提取率的目的 。超声辅助法因使用无毒溶剂替 色谱分析法是除比色法之外最常用的一类测定方
代有毒有机溶剂，且具有回收率高、损耗小等优势，被认 法，包括目前常用的液相色谱法、超高效液相色谱法等，
为是一种绿色提取技术，使其广泛应用于植物多酚类化 可用于测定丝瓜多酚的含量。液相色谱法因使用便捷、
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合物的提取 。朱海生等 使用超声辅助法对丝瓜总多 灵敏度高等优点而广泛用于多酚类成分的含量测定 ，
酚化合物进行提取，结果表明，丝瓜果肉与 80％乙醇按 但其存在耗时长、消耗试剂多等缺点 。超高效液相色
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1 ∶ 10（kg/L）的料液比混合，于 40 ℃条件下经超声提取 谱法相比于传统高效液相色谱法具有更高的灵敏度及
30 min后，提取丝瓜总多酚化合物的效果好。超声辅助 分离度，且分离时间短，可大大节约操作时间与溶剂损
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法提取效果主要受提取溶剂、提取剂浓度、料液比、超声 耗 。温文旭等 利用超高效液相色谱快速测定丝瓜中
温度、超声时间等多方面的影响，这些因素相互作用影 酚类化合物的组分及含量，在样品中共检测出 13 种酚
响提取物的含量及提取效率，因此使用超声辅助法提取 酸，为丝瓜酶促褐变底物的后续研究提供了测定方法。
丝瓜多酚时可与响应面法相结合，以筛选出最佳的提取 5 丝瓜多酚的生物活性
条件 。 5.1 抗氧化
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3 丝瓜多酚的分离纯化方法 生物体在自身代谢以及外界环境影响下会产生大
3.1 制备性色谱法 量的活性氧自由基，其中超氧阴离子自由基与羟基自由
制备性色谱法是利用选择性分配原理，即不同物质 基最具代表性，活性氧自由基过多会导致人体正常细胞
在两相间的分配能力不同，从而达到使混合物中不同组 和组织的破坏而引起各种疾病 。丝瓜中多酚化合物
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中国药房 2020年第31卷第23期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 23 ·2929 ·