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表 3 各组细胞培养液中 IL-4、IL-6 和 TNF-α水平测定 活化（即磷酸化），Akt活化后可激活下游蛋白mTOR（即
[24]
结果（x±±s，n＝3） 使其磷酸化） 。研究证实，AMPK/mTOR与Akt/mTOR
Tab 3 Levels of IL-4，IL-6 and TNF-α in cell culture 是两条经典的自噬信号通路 [25-26] 。近年来，大量的研究
fluid in each group（x±±s，n＝3） 表明，自噬参与淋巴细胞的发育、固有免疫和适应性免
[27]
组别 质量浓度，μg/mL IL-4，pg/mL IL-6，pg/mL TNF-α，pg/mL 疫应答途径 。在过去的10年里，自噬已经成为T细胞
空白对照组 0 130.20±2.44 128.67±9.26 548.11±55.36 稳态、激活和分化的重要调节因素，基础自噬能够维持T
阳性对照组 5 158.66±1.61 ＊＊ 146.64±11.35 ＊ 760.76±28.58 ＊＊
人参根提取物组 32 145.80±5.93 ＊＊ 142.67±8.50 ＊ 642.31±59.22 ＊ 细胞的内环境稳态，活化诱导的巨自噬被认为是细胞增
人参根提取物组 125 158.89±2.46 ＊＊ 149.01±8.88 ＊ 716.10±92.67 ＊ 殖和代谢的关键调控因素，也是效应CD8 T细胞记忆产
+
人参根提取物组 500 167.59±3.63 ＊＊ 161.09±5.73 ＊＊ 791.10±81.86 ＊＊ [28]
生的关键 。Beclin1 是哺乳类动物中第一个被确认的
注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊
＊＊
自噬特异性调控基因，通过BH3区域、CCD及ECD在细
＊
Note：vs. blank control group，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
胞自噬和凋亡过程中发挥至关重要的作用 。LC3是控
[29]
LC3Ⅰ 16 kDa 制自噬膜的形成和自噬体与溶酶体融合的关键蛋白，
在自噬体膜的延伸和成熟中发挥关键作用，其分为
LC3Ⅱ 14 kDa
LC3Ⅰ和LC3Ⅱ两种亚型，自噬发生时，可溶性LC3Ⅰ被
Beclin-1 60 kDa 活化，并修饰形成 LC3-Ⅱ后通过融合蛋白转位至自噬
体膜，从而促进自噬体的成熟，参与自噬体形成 [30-32] 。
p-Akt 60 kDa LC3Ⅱ是自噬体的标志分子，其含量的多少与自噬泡数
量的多少呈正比，因此自噬程度与 LC3Ⅱ表达水平呈正
Akt 56 kDa 相关 。本研究结果发现，人参根提取物可增加小鼠脾
[30]
淋巴细胞自噬水平，使 AMPK 的磷酸化水平提高，AKT
p-AMPK 63 kDa
与 mTOR 的磷酸化水平降低，并可上调自噬相关蛋白
[10]
Beclin-1的表达，增加LC3BⅠ到LC3BⅡ的转化 ，这说
AMPK 63 kDa
明人参根提取物可活化小鼠脾淋巴细胞，并通过AMPK/
mTOR和AKT/mTOR途径诱导细胞自噬。
p-mTOR 289 kDa
综上所述，人参根提取物能通过激活 AMPK、抑制
AKT活化来抑制mTOR活性，从而诱导小鼠脾淋巴细胞
mTOR 289 kDa
发生自噬、激活脾淋巴细胞活性、调节细胞因子分泌来
发挥免疫增强作用。后续本课题组将在此基础上进一
β-actin 42 kDa
步探究其作用的分子机制及其对淋巴细胞不同亚群的
空白对照组 32 μg/L人参 125 μg/L人参 500 μg/L人参
根提取物组 根提取物组 根提取物组 影响。
图2 各组细胞中自噬相关蛋白表达的电泳图 参考文献
Fig 2 Electrophoretogram of the expression of au- [ 1 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S]. 2020年
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表4 各组细胞中自噬相关蛋白表达水平测定结果（x±±
2016：31.
s，n＝3）
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Tab 4 The expression of autophagy-related proteins
贵阳中医学院学报，2019，41（5）：89-92.
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质量浓度， LC3BⅡ/ p-AMPK/ p-AKT/ p-mTOR/ Beclin-1/ 的分子机制研究[D].开封：河南大学，2013.
组别
μg/L LC3BⅠ AMPK AKT mTOR β-actin
空白对照组 0 5.23±0.06 0.51±0.01 1.51±0.04 0.62±0.07 0.39±0.04 [ 5 ] 姚根兰，张娅萍，欧阳柳凤，等.人参抗疲劳作用的研究进
人参根提取物组 32 5.49±0.02 0.59±0.03 1.20±0.05 0.58±0.03 0.64±0.03 ＊＊ 展[J].世界中西医结合杂志，2015，10（8）：1174-1177.
人参根提取物组 125 8.68±0.05 ＊ 1.49±0.03 ＊＊ 0.86±0.11 ＊＊ 0.46±0.02 ＊＊ 0.81±0.01 ＊＊ [ 6 ] 潘鑫鑫，郑卫红.人参总皂苷抗衰老作用的实验研究[J].
人参根提取物组 500 11.2±0.03 ＊＊ 1.98±0.02 ＊＊ 0.39±0.08 ＊＊ 0.40±0.02 ＊＊ 0.87±0.02 ＊＊
中国老年学杂志，1995，15（5）：288-290.
注：与空白对照组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
＊
[ 7 ] SONG JH，SONG HH，et al. Antiviral activity of ginse-
＊
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Note：vs. blank control group，P＜0.05， P＜0.01
nosides against coxsackievirus B3，enterovirus 71，and hu-
协同磷脂酰肌醇依赖性蛋白激酶1/2促进三磷酸磷脂酰 man rhinovirus 3[J]. J Ginseng Res，2014，38（3）：173-
肌醇与其自身结合，Akt 由细胞质转移至细胞膜并发生 179.
中国药房 2020年第31卷第21期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 21 ·2601 ·