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人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖和细胞因子分泌的影

响及机制研究 Δ

李芳宇 ，齐 滨 ，边 帅 ，赵 月 ，卢姝言 ，王佳雯 ，赵大庆 （1.长春中医药大学药学院，长春 130117；2.
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长春中医药大学人参科学研究院，长春 130117）
中图分类号 R285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）21-2597-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.21.07
摘 要 目的：研究人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞自噬、增殖及细胞因子分泌的影响，并研究其作用机制。方法：将小鼠脾淋巴
细胞分为空白对照组、阳性对照组（刀豆蛋白A，5 μg/mL）和不同质量浓度人参根提取物组（32、125、500 μg/mL，以冻干粉末计）。
各组细胞加入相应药物培养48 h后，分别采用吖啶橙染色法检测细胞的自噬情况；采用CCK-8法检测细胞的增殖情况；采用酶联
免疫吸附法测定细胞培养液中白细胞介素4（IL-4）、IL-6、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平；采用Western blotting法检测细胞中微管
相关蛋白轻链β 3 （LC3B）、酵母ATG6同源物（Beclin-1）的表达水平以及腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、蛋白激酶B（AKT）、雷帕霉
素靶蛋白（mTOR）的磷酸化水平。结果：与空白对照组比较，32、125、500 μg/mL人参根提取物均能够增加小鼠脾淋巴细胞酸性自
噬体的数量（P＜0.05或P＜0.01）；125、500 μg/mL人参根提取物均可显著提高细胞存活率，显著提高细胞中IL-4、IL-6和TNF-α的
水平，显著促进细胞中LC3BⅠ向LC3BⅡ转化，显著上调细胞中Beclin-1蛋白表达水平，显著提高AMPK蛋白的磷酸化水平，显著
降低AKT和mTOR蛋白的磷酸化水平，差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。结论：人参根提取物能通过激活AMPK、抑制
AKT活化来抑制mTOR活性，从而诱导小鼠脾淋巴细胞发生自噬、激活脾淋巴细胞活性、调节细胞因子分泌以发挥免疫增强作用。
关键词 人参根提取物；脾淋巴细胞；自噬；细胞因子；免疫增强作用

Study on the Effects of Ginseng Root Extract on Autophagy，Proliferation and Cytokine Secretion of Mice
Splenic Lymphocytes and Its Mechanism
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LI Fangyu ，QI Bin ，BIAN Shuai ，ZHAO Yue ，LU Shuyan ，WANG Jiawen ，ZHAO Daqing（1. School of
Pharmacy，Changchun University of TCM，Changchun 130117，China；2. Institute of Ginseng Science，
Changchun University of TCM，Changchun 130117，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the effects of ginseng root extract on autophagy，proliferation and cytokine of splenic
lymphocyte of mice，and to study its mechanism. METHODS：The splenic lymphocyte of mice were divided into blank control
group，positive control group（concanavalin A，5 μg/mL），different concentration of ginseng root extract groups（32，125，500
μg/mL，by lyophilized powder）. After 48 h of culture with the corresponding medicine，acridine orange staining method was used
to detect autophagy of splenic lymphocyte；CCK-8 assay was used to detect the cell proliferation；ELISA assay was used to
determine the levels of IL-4，IL-6 and TNF-α in cell culture；Western blotting method was used to detect the expression of LC3B
and Beclin-1，as well as the phosphorylation of AMPK，AKT and mTOR. RESULTS：Compared with blank control group，32，
125，500 μg/mL ginseng root extract could increase the number of acidic autophagosomes in splenic lymphocytes of mice（P＜0.05
or P＜0.01）；125，500 μg/mL Ginseng root extract could significantly enhance the survival rate of splenic lymphocytes，the levels
of IL-4，IL-6 and TNF-α and the transformation of LC3BⅠ to LC3BⅡ，significantly increased the protein expression of Beclin-1，

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Δ 基金项目：国家重点研发计划项目（No.2017YFC1702100）；吉
[15] LI XT，ZHOU ZY，JIANG Y，et al. PEGylated VRB plus
林省教育厅“十三五”科学技术项目（No.JJKH20190478KJ）
＊硕士研究生。研究方向：中药生物技术。E-mail：L18843926718 quinacrine cationic liposomes for treating non-small cell
@163.com lung cancer[J]. J Drug Target，2015，23（3）：232-243.
# 通信作者：研究员，硕士生导师，博士。研究方向：中药化学、中 （收稿日期：2020-05-12 修回日期：2020-09-21）
药生物技术。E-mail：zhaodaqing1963@163.com （编辑：林 静）

中国药房 2020年第31卷第21期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 21 ·2597 ·