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表6 31批样品主成分得分结果                           2.5.1 色谱条件      同“2.1”项。
        Tab 6 Results of main components score of 31 batches  2.5.2 溶液的制备     同“2.2”项。
               of samples                                   2.5.3  系统适用性考察        取混合对照品溶液,按“2.5.1”
        编号       主成分1      排名     编号     主成分1     排名        项下色谱条件进样测定,记录色谱图;分别取诃子和西
        H15       0.415 86  15    X10    1.189 60   1       青果样品(编号:H17、X1),按“2.5.2”项下方法制备供试
        H16       0.401 01  16    X9     1.083 45   2
        H17       0.245 27  17    X4     1.068 43   3       品溶液,再按“2.5.1”项下色谱条件进样测定,记录色谱
        H3       -0.509 85  18    X14    1.039 56   4       图。结果,没食子酸、安石榴苷A、安石榴苷B、诃子鞣酸
        H13      -0.624 53  19    X3     1.026 01   5       色谱峰与相邻色谱峰的分离度均大于 1.5,拖尾因子在
        H8       -0.713 08  20    X7     0.966 57   6
        H12      -0.733 36  21    X13    0.932 40   7       1.00~1.05之内,详见图2。
        H7       -0.845 91  22    X5     0.921 07   8       2.5.4  线性关系考察        分别取没食子酸、安石榴苷、诃
        H9       -0.856 27  23    X2     0.911 96   9       子鞣酸对照品适量,精密称定,分别用 70%甲醇溶解并
        H2       -0.916 53  24    X6     0.885 76  10       稀释,制成6个不同质量浓度的系列对照品溶液,其中没
        H6       -0.927 35  25    X8     0.883 35  11
        H11      -1.241 98  26    X12    0.871 24  12       食 子 酸 质 量 浓 度 分 别 为 0.35、3.51、35.09、105.27、
        H1       -1.299 89  27    X1     0.857 87  13       210.54、315.81 μg/mL,安石榴苷A质量浓度分别为2.84、
        H4       -1.337 62  28    X11    0.789 39  14       28.41、259.70、519.40、831.04、1 038.80 μg/mL,安石榴苷
        H10      -1.436 37  29
        H14      -1.465 86  30                              B 质量浓度分别为 2.84、28.41、259.70、519.40、831.04、
        H5       -1.580 21  31                              1 038.80 μg/mL,诃子鞣酸质量浓度分别为 0.34、3.40、
                                                     诃子
                                                            34.04、1 005.97、1 609.55、2 011.94 μg/mL。以质量浓度
                                                     西青果
                                                            为横坐标(x,μg/mL)、峰面积为纵坐标(y)进行回归分
            2
                                                            析,结果见表7。
            1
                                                                        表7 回归方程与线性范围
            0                                                   Tab 7  Regression equations and linear ranges
          t[2]
           -1                                               名称          回归方程             R  2     线性范围,μg/mL
                                                            没食子酸     y=9 452.7x-11 365  0.999 9    0.35~315.81
           -2
                                                            安石榴苷A    y=2 127.6x-18 829  0.999 5    2.84~1 038.80
                                                            安石榴苷B    y=4 310.1x-32 512  0.999 3    2.84~1 038.80
           -3
             -8  -6   -4  -2    0   2    4    6             诃子鞣酸     y=4 513.2x-15 896  0.999 9    0.34~2 011.94
                             t[1]
                  图4   31批样品的PLS-DA得分图                      2.5.5  检测限和定量限考察           取混合对照品溶液,以
                                                            70%甲醇等比例稀释后,按“2.5.1”项下色谱条件进样测
          Fig 4  PLS-DA score chart of 31 batches of samples
                                                            定,记录峰面积,以信噪比3 ∶ 1、10 ∶ 1分别确定检测限和
                                                            定量限。结果,没食子酸、安石榴苷A、安石榴苷B、诃子
           1.2
                                                            鞣酸的检测限分别为 0.04、0.02、0.02、0.11 ng,定量限分
           1.0
                                                            别为0.14、0.05、0.06、0.35 ng。
           0.8
          VIP值  0.6                                         2.5.6  精密度试验       分别取同一供试品溶液(编号:
           0.4                                              H17、X1),按“2.5.1”项下色谱条件连续进样6次,记录峰
                                                            面积。结果,两组样品没食子酸峰面积的 RSD 分别为
           0.2
                                                            1.21%、1.34%(n=6),安石榴苷A峰面积的RSD分别为
            0
                5    4    7    3     2    6    1    8       1.60%、1.42%(n=6),安石榴苷B峰面积的RSD分别为
                                 峰号
                                                            1.74%、1.51%(n=6),诃子鞣酸峰面积的 RSD 分别为
         图5 31批样品PLS-DA模型中8个共有峰的VIP值图                       0.52%、0.98%(n=6),表明方法精密度良好。
        Fig 5 VIP value graph of 8 common peaks in PLS-DA   2.5.7  稳定性试验       分别取同一供试品溶液(编号:
               model of 31 batches of samples               H17、X1),分别在室温下放置 0、2、4、6、8、12 h 时按
        2.5 多指标含量测定                                        “2.5.1”项下色谱条件进样测定,记录峰面积。结果,两
           “2.4”项下结果显示,峰2、3、4、5、7是区分诃子和西                    组样品没食子酸峰面积的 RSD 分别为 1.62%、1.36%
        青果的主要差异成分,由于峰5为未知物,故以其他4个                          (n=6),安石榴苷A峰面积的RSD分别为1.93%、1.67%
        共有峰对应的化合物没食子酸(峰 2)、安石榴苷 A(峰                        (n=6),安石榴苷B峰面积的RSD分别为1.98%、1.79%
        3)、安石榴苷B(峰4)、诃子鞣酸(峰7)为含量测定指标,                      (n=6),诃 子 鞣 酸 酸 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 1.08% 、
        对17批诃子和14批西青果进行定量分析。                                0.87%(n=6),表明供试品溶液在室温下放置 12 h 内稳


        ·2516 ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20                                 中国药房    2020年第31卷第20期
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