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适量,分别用 12、10、10 倍量水(mL/g)加热回流提取 3 抑制率=(右耳质量-左耳质量)/左耳质量×100% 。
[7]
次,每次 2 h,合并滤液,浓缩,制成质量浓度为 0.6 g/mL 采用 SPSS 17.0 软件对数据进行统计分析;计量资料均
(以生药量计)的药液。 以 x±s 表示,组间比较采用 t 检验;P<0.05 为差异有统
计学意义。结果,与空白对照组比较,化学药阳性对照
18
560
520 组、中药阳性对照组和S1~S10组小鼠耳肿胀度均显著
480
440 降低(P<0.01),说明 10 批金银花均能显著抑制二甲苯
400
360 20 所致的小鼠耳廓炎症肿胀,其中河北获鹿产金银花的抗
mV 320
280
U, 240 21 炎作用相对较强(耳肿胀抑制率为49.13%),详见表3。
200 22 23 25 表3 各组小鼠耳肿胀度和肿胀抑制率的检测结果(n=
160
120 2 10 12)
80 9
40
0 Tab 3 Results of ear swelling degree and inhibition
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80 rate of swelling in mice of each group(n=12)
t,min
注:2.新绿原酸;9.绿原酸;10.马钱苷;18.芦丁;20.金丝桃苷;21.木 组别 耳肿胀度(x±s), 耳肿胀抑制率, 组别 耳肿胀度(x±s), 耳肿胀抑制率,
犀草素;22.异绿原酸B;23.异绿原酸A;25.异绿原酸C mg % mg %
空白对照组 27.72±2.40 S5组 15.05±4.74 ** 29.58
Note:2. neochlorogenic acid;9. chlorogenic acid;10. loganin;18.
化学药阳性对照组 13.92±3.47 ** 49.78 S6组 19.52±2.95 ** 33.91
rutin;20. hyperoside;21. luteolin;22. isochlorogenic acid B;23. iso- ** **
中药阳性对照组 13.36±4.39 51.80 S7组 18.01±6.56 38.28
chlorogenic acid A;25. isochlorogenic acid C S1组 14.37±5.60 ** 48.16 S8组 18.32±4.34 ** 45.71
图3 对照品溶液叠加色谱图谱 S2组 16.88±5.47 ** 47.47 S9组 16.75±6.11 ** 49.13
Fig 3 Superposition chromatograms of reference sub- S3组 14.56±5.77 ** 35.03 S10组 14.10±5.29 ** 39.10
S4组 17.11±6.14 ** 39.57
stance
**
注:与空白对照组比较, P<0.01
表2 10批金银花药材样品的相似度评价结果 Note:vs.blank control group, P<0.01
**
Tab 2 Similarity evaluation results of 10 batches of L. 2.4.3 小鼠足肿胀实验 参照文献方法 进行小鼠足肿
[6]
japonica 胀实验。取小鼠 156 只,按“2.4.2”项下方法分组、给药。
编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 R 于末次给药1 h后,在每只小鼠右后足跖部皮内注射1%
S1 1.000 0.947 0.975 0.965 0.942 0.931 0.953 0.918 0.991 0.947 0.979 角叉菜胶 0.1 mL,分别于注入前及注入后 1、2、3、4、6 h
S2 0.947 1.000 0.979 0.897 0.795 0.788 0.850 0.775 0.938 0.800 0.881
S3 0.975 0.979 1.000 0.959 0.868 0.870 0.923 0.848 0.983 0.870 0.943 测定右后足容积,并按以下公式计算足肿胀抑制率:足
S4 0.965 0.897 0.959 1.000 0.940 0.959 0.987 0.931 0.985 0.937 0.985 肿胀抑制率(%)=[(空白对照组平均足肿胀度-给药
S5 0.942 0.795 0.868 0.940 1.000 0.992 0.972 0.982 0.942 0.994 0.981 组平均足肿胀度)/空白对照组平均足肿胀度]×100% 。
[8]
S6 0.931 0.788 0.870 0.959 0.992 1.000 0.986 0.983 0.943 0.986 0.984
S7 0.953 0.850 0.923 0.987 0.972 0.986 1.000 0.964 0.969 0.962 0.990 按“2.4.2”项下方法对数据进行统计分析。结果,10批金
S8 0.918 0.775 0.848 0.931 0.982 0.983 0.964 1.000 0.921 0.973 0.966 银花对角叉菜胶所致的小鼠足炎症肿胀均有抑制作用,
S9 0.991 0.938 0.983 0.985 0.942 0.943 0.969 0.921 1.000 0.945 0.987 其中河南新乡产金银花的抗炎作用相对较强(足肿胀抑
S10 0.947 0.800 0.870 0.937 0.994 0.986 0.962 0.973 0.945 1.000 0.980 制率为59.86%~79.51%),详见表4。
R 0.979 0.881 0.943 0.985 0.981 0.984 0.990 0.966 0.987 0.980 1.000
表4 各组小鼠足肿胀抑制率的检测结果(n=12)
[6]
2.4.2 小鼠耳肿胀实验 参照文献方法 进行小鼠耳肿
Tab 4 Results of inhibition rate of foot swelling in
胀实验。将156只小鼠随机分成13组,分别为空白对照
mice of each group(n=12)
组、化学药阳性对照组(阿司匹林肠溶片,20 mg/kg)、中 足肿胀抑制率,%
药阳性对照组(蒲地蓝消炎片,7.68 mg/g)和 10 批金银 组别 1 h 2 h 3 h 4 h 6 h
花组[记为 S1~S10 组,金银花水提取液,12 mg/g(以生 空白对照组
化学药阳性对照组 42.52 43.18 55.87 66.20 84.58
药量计)],每组12只。化学药阳性对照组和中药阳性对
中药阳性对照组 50.77 25.70 38.26 49.41 79.86
照组给药剂量按相应品种的临床成人1日剂量计,S1~ S1组 40.99 26.73 28.33 32.45 53.72
S10组给药剂量按《中国药典》中金银花药材的1日剂量 S2组 59.89 45.48 58.18 56.74 66.87
计。除空白对照组小鼠灌胃等体积生理盐水外,其余各 S3组 29.98 36.53 46.43 54.44 58.22
S4组 57.33 40.33 45.76 59.91 64.49
组小鼠均灌胃相应药物,每日1次,连续15 d。末次给药 S5组 59.86 48.62 57.59 70.62 79.51
30 min 后,于各组小鼠右耳正反两面均匀涂抹二甲苯 S6组 33.45 43.45 48.80 66.19 70.85
50 μL致炎,并以左耳作为对照。30 min后,将各组小鼠 S7组 40.27 36.52 52.07 61.90 67.52
S8组 40.51 47.78 53.48 59.16 68.58
颈椎脱臼处死,用直径 8 mm 打孔器在左右耳相对称部 S9组 34.68 38.57 56.37 68.82 70.79
位取耳片,分别称定质量,并按以下公式计算耳肿胀度 S10组 60.26 46.74 53.90 58.61 64.74
[6]
和肿胀抑制率:耳肿胀度=右耳质量-左耳质量,肿胀 2.4.4 棉球肉芽肿实验 参照文献方法 进行小鼠棉球
·2500 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20 中国药房 2020年第31卷第20期