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2.6 金银花药材质量评价指标的建立 谱,确认了25个共有峰,相似度为0.775~0.994,表明此
结合“2.5”项下结果,选择同时满足 GRA 中关联度 10批金银花药材样品质量基本稳定,其中个别相似度较
大于 0.7 和 PLSR 中与抗炎药效成正相关的色谱峰为特 低的原因可能与栽培方式、采收加工方法等不同有关。
征峰(色谱峰 2、4、5、8、10、12、13、14、15、16、17、18、20、 通过 GRA 和 PLSR 分析进一步明确了 25 个共有峰中的
21、22、24),其峰面积之和记为Q。结合药效数据,金银 17 个与抗炎药效有密切的正相关性,除峰 7 外,其余均
[14]
花Q值越大表明其抗炎作用越强 。为避免因仪器、检 为 特 征 峰 ,10 批 金 银 花 药 材 的 峰 占 比 为 58.61% ~
测时间等条件的改变引起色谱峰峰面积的重现性问题 71.19%,暂定特征峰峰占比不得低于 51.8%,作为评价
所造成的系统误差,本研究采用“峰占比”(特征峰峰面 金银花药材是否合格的最低限。
积占共有峰峰面积总和的百分比来评价金银花药材中 参考文献
具有抗炎作用成分的相对比例,结果见表 8。由表 8 可 [ 1 ] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部[S]. 2015年
见,10批金银花药材峰占比的平均值为64.73%,按照质 版.北京:中国医药科技出版社,2015:172.
量标准研究方法,暂定以峰占比平均值的80%计为金银 [ 2 ] 宋英,盛蓉,陈佳,等.金银花压制饮片和传统饮片的比较
[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(16):24-26.
[14]
花质量评价的下限,即特征峰峰占比不得低于51.8% 。
[ 3 ] 刘惠,杨姣,朱志飞,等.基于总量统计矩分析法的金银
表8 10批金银花药材特征峰的峰占比(%%)
花、山银花 HPLC 指纹图谱评价[J].中国实验方剂学杂
Tab 8 Peak ratio of charasteristic peaks of 10 batches 志,2019,25(21):132-139.
of L. japonica(%%) [ 4 ] 胡璇,李卫东,张硕峰,等.四倍体金银花水提物抗炎作用
编号 峰占比 编号 峰占比 和急性毒性实验研究[J].中草药,2015,46(11):1649-
S1 60.13 S6 68.15 1652.
S2 58.61 S7 70.14 [ 5 ] 姜东京,杜伟锋,蔡宝昌.中药谱效关系在中药质量控制
S3 64.45 S8 65.76
S4 71.19 S9 64.47 方面的应用[J].中华中医药杂志,2015,30(11):3811-
S5 63.05 S10 61.38 3814.
3 讨论 [ 6 ] 洪美玲.病理学[M].北京:人民卫生出版社,1999:50.
[ 7 ] 周娟,张梦军,郭嘉伟,等.小鼠耳肿胀模型及药理应用
本研究前期分别考察了不同提取方法(超声、回
[J].国际检验医学杂志,2012,33(17):2102-2104.
流)、不同提取溶剂(甲醇、乙醇、50%甲醇、50%乙醇和
[ 8 ] 包婷雯,左明丽,王敏,等.藏药麻花秦艽不同部位醇提物
水)对金银花提取率的影响,结果发现以水回流提取2 h
的抗炎作用研究[J].中国药房,2018,29(22):3114-3118.
的提取率最高。前期还分别考察了不同流速(0.8、1.0、 [ 9 ] 邹培标,余捷惠,吴少娜,等.野西瓜乙醇提取物的抗炎作
1.2 mL/min)、不同流动相(甲醇-0.1%磷酸水溶液、乙 用研究[J].现代医院,2010(6):35-36.
腈-1%磷酸水溶液、乙腈-水、乙腈-0.1%甲酸水溶液、乙 [10] 汪蒙蒙,季兆洁,甘江华,等.霍山石斛的抗炎作用[J].中
腈-0.1%乙酸水溶液)对色谱峰分离效果的影响,结果 国实验方剂学杂志,2019,25(20):76-81.
显示,当流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液、流速为 1.0 [11] 罗婷,唐玉,王佳琪,等.层次分析法结合正交试验优化川
mL/min时,相邻色谱峰的分离效果最好且峰形对称、无 黄柏炒炭工艺[J].成都中医药大学学报,2018,41(4):
拖尾。 6-11.
中药谱效关系研究是将中药指纹图谱(活性物质) [12] 刘莹昕,刘飒,王威尧.层次分析法的权重计算及其应用
[J].沈阳大学学报(自然科学版),2014,26(5):372-375
与药效学研究结合起来,通过合理的谱-效模型和分
[13] 徐帮会,徐剑,张永萍,等.天麻HPLC指纹图谱及镇痛活
析方法,系统揭示中药活性成分与药理作用之间的关
性的谱效关系研究[J].中药材,2019,42(11):2588-2592.
系 [15-16] 。GRA 是通过灰色关联度来分析和确定系统因
[14] 范罗嫡,于玲,刘美霞,等.基于谱效关系的党参质量检测
素间的影响程度或因素对系统主行为贡献的一种测试 方法,中国:201910599103.7[P].2019-09-17.
方法,当关联度大于 0.7 时,各共有峰对药效有一定影 [15] 李力,潘倩雯,刘宏.灰色关联度分析法在中药谱效学研
响;且关联度越大则影响越强 。但GRA结果只能表达 究中的应用[J].中国药房,2018,29(11):1581-1584.
[17]
共有峰对药效的影响程度,具体是促进还是抑制则无法 [16] 蔡靓,张倩,杨丰庆.中药谱效学的应用进展[J].中草药,
判断。PLSR 在建模过程中集中了主成分分析、典型相 2017,48(23):5005-5011.
关分析和线性回归分析方法的特点,通过 PLSR 模型回 [17] 蒋思怡,宋小英,张丹丹,等.菝葜UPLC指纹图谱与其抗
归系数的正负来判断各共有峰对药效影响的趋势,即正 大鼠盆腔炎作用的谱效关系研究[J].中国中药杂志,
2019,44(15):3323-3329.
[18]
值为促进作用、负值为抑制作用 。因此,将两种分析
[18] 卞振华,胡敏敏,袁晓航,等.基于偏最小二乘回归法分析
方法联用,所得同时满足关联度大于0.7且PLSR模型回
五味子抑菌活性部位谱效关系[J].中成药,2019,41
归系数为正值的共有峰为特征峰,其对应化合物即为对
(11):2788-2791.
药效有较强促进作用的特征成分。 (收稿日期:2020-05-08 修回日期:2020-09-15)
本研究成功建立了 10 批金银花药材样品的指纹图 (编辑:邹丽娟)
·2502 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 20 中国药房 2020年第31卷第20期