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2.5.2 稳定性试验 取“2.3”项下同一供试品溶液（编
1 800
号：S3）适量，分别于室温下放置0、2、4、6、12 h时按“2.4” 1 700 R2
1 600 CS34
项下色谱条件进样测定，记录色谱图。以王不留行黄酮 1 500 CS33
1 400 CS32
苷峰为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面 1 300 CS31
1 200
CS30
积。结果，各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD mV 1 100 CS29
1 000
CS28
均小于3.0％（n＝5），表明供试品溶液于室温下放置12 h U， 900 CS27
CS26
800
700 CS25
内稳定性良好。 600 CS24
500 CS23
2.5.3 重复性试验 取饮片样品（编号：S3）粉碎，过三 400 CS22
CS21
300
号筛，取粉末适量，共6份，分别按“2.3”项下方法制备供 200 CS20
100
CS19
0 CS18
试品溶液，再按“2.4”项下色谱条件进样测定，记录色谱 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
图。以王不留行黄酮苷峰为参照，计算各共有峰的相对 t，min
保留时间和相对峰面积。结果，各共有峰相对保留时间 图2 17批炒王不留行的UPLC叠加指纹图谱
和相对峰面积的 RSD 均小于 1.0％（n＝6），表明本方法 Fig 2 UPLC overlay fingerprint of 17 batches of stir-
重复性良好。 fried Vaccariae Semen
2.6 UPLC指纹图谱的生成及相似度评价
100
分别取17批王不留行生品饮片和17批炒王不留行
80
饮片，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.4”项下 mV 60
色谱条件进样测定，记录色谱图。将图谱导入《中药色 U， 40
20
谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》，分别以 S1、 0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
CS18样品的指纹图谱为参照图谱，以2号峰为参照峰（S t，min
峰）进行保留时间校正并进行全峰匹配，生成叠加指纹 A.混合对照品
图谱，采用平均数法生成共有模式图（对照特征图谱为 250
R1、R2），详见图1、图2。 200
mV 150
1 900 U， 100
1 800 50
1 700 R1
1 600 S17 0
1 500 S16 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
1 400 S15
1 300 S14 t，min
1 200 S13 B.王不留行生品对照图谱（R1）
1 100 S12
mV 1 000 S11
U， 900 S10 180
800 S9 160
700 S8 140
600 S7 120
500 S6 mV 100
400 S5 U， 80
300 S4 60
200 S3 40
100 S2 20
0 S1 0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
t，min t，min
C.炒王不留行对照图谱（R2）
图1 17批王不留行生品的UPLC叠加指纹图谱
注：1.刺桐碱；2.王不留行黄酮苷
Fig 1 UPLC overlay fingerprint of 17 batches of Vac-
Note：1. erythrine；2. vaccarin
cariae Semen crude product
图3 共有峰对照品归属色谱图
由图 1、图 2 可见，各共有峰较稳定，具有指纹图谱 Fig 3 Ownership chromatogram of reference sub-
特征性，可初步认定为王不留行生品与其炮制品的指标 stance for common peaks
成分群。王不留行生品和炒王不留行的UPLC叠加指纹 批炒王不留行分别进行相似度评价。结果，所有批次样
图谱中，分别有共有峰5个；通过与混合对照品溶液进行 品的相似度均大于0.99，表明王不留行生品与其炮制品
比对，指认了其中2个成分，即1号色谱峰为刺桐碱峰，2 的化学成分一致性较好，详见表2。
号色谱峰为王不留行黄酮苷峰。因王不留行黄酮苷峰 2.7 指纹图谱的化学计量学分析
分离效果好、出峰稳定且保留时间适中，故以其保留时 2.7.1 聚类分析 以各共有峰的峰面积为原始数据，运
间和峰面积作为参照（S）。共有峰对照品归属色谱图见 用SPSS 20.0软件，采用组间平均数联结法，以夹角余弦
图3。 作为样品相似度的距离公式，对17批王不留行生品和炒
以共有模式作为对照图谱，将 17 批王不留行和 17 王不留行进行系统聚类。结果，S1～S17 王不留行生品

中国药房 2020年第31卷第19期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 19 ·2367 ·