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表1 引物序列及扩增产物长度 表 2 各组小鼠体质量、TA 湿质量测定结果（x±±s，n＝
Tab 1 Primary sequence and amplified product length 10）
基因名称 序列 扩增产物长度，bp Tab 2 Body weight and TA wet weight of mice in each
Bax 上游 5′-CTGACATGTTTTCTGACGGC-3′ 189 group（x±±s，n＝10）
下游 5′-TCAGCCCATCTTCTTCCAGA-3′
组别 体质量，g TA湿质量，mg
Bcl-2 上游 5′-CGCTGGGAGAACAGGGTA-3′ 151
下游 5′-GGGCTGGGAGGAGAAGAT-3′ 假手术组 22.81±2.05 57.52±7.13
Caspase-3 上游 5′-AGATACCGGTGGAGGCTGACT-3′ 159 模型组 16.98±2.42 ＊ 35.97±5.21 ＊
四君子汤低剂量组 17.39±1.16 38.85±3.52
下游 5′-TCTTTCGTGAGCATGGACACA-3′ #Δ #Δ
β-actin 上游 5′-TGATGGGTGTGAACCACGAG-3′ 126 四君子汤中剂量组 19.92±2.09 43.09±4.36
下游 5′-GCCCTTCCACAATGCCAAAG-3′ 四君子汤高剂量组 21.06±1.04 #Δ 44.76±6.07 #Δ
复方α-酮酸片组 21.36±2.51 #Δ 46.75±7.30 #Δ
蛋白浓度。加入蛋白上样缓冲液，进行蛋白变性，然后 注：与假手术组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05；与四君
＊
#
进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电 子汤低剂量组比较，P＜0.05
Δ
#
＊
泳（100 V、1.5 h），湿法转至聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上 Note：vs. sham operation group， P＜0.05；vs. model group，P＜
Δ
0.05；vs. Sijunzi decoction low-dose group，P＜0.05
（250 mA 、90 min）；TBST缓冲液洗膜5 min×3次，5％脱
脂牛奶封闭 1 h；分别加入 Atrogin-1、MuRF-1、ROCK1、
PTEN、p-PTEN、PI3K、Akt、p-Akt 及β-actin 一抗（稀释度
均为1 ∶ 1 000），4 ℃孵育过夜；次日，TBST缓冲液洗膜5
min×3 次，加入二抗（稀释度为 1 ∶ 1 000），室温孵育 1 h；
经 ECL 化学发光显色后，使用凝胶成像系统采集图像。
采用 Image J 1.8.0 软件对图像光密度进行分析，以目的
A.假手术组 B.模型组
蛋白条带与内参β-actin 条带的光密度比值表示目的蛋
白的相对表达水平，以p-PTEN/PTEN、p-Akt/Akt的光密
度比值表示PTEN、Akt蛋白的磷酸化水平。
2.9 统计学方法
采用SPSS 19.0软件进行统计分析。试验数据均以
x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比
较采用LSD-t检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。 C.四君子汤低剂量组 D.四君子汤中剂量组
3 结果
3.1 小鼠体质量和TA湿质量测定结果
与假手术组比较，模型组小鼠体质量、TA湿质量显
著降低（P＜0.05）；与模型组比较，四君子汤中、高剂量
组和复方α-酮酸片组小鼠体质量、TA湿质量均显著升高
（P＜0.05），且均显著高于四君子汤低剂量组（P＜0.05）； E.四君子汤高剂量组 F.复方α-酮酸片组
四君子汤中、高剂量组和复方α-酮酸片组之间小鼠体质 图1 各组小鼠TA横截面显微图（×200）
量、TA 湿质量差异无统计学意义（P＞0.05）。各组小鼠 Fig 1 Micrographs of TA cross-sectional area of mice
体质量、TA湿质量测定结果见表2。 in each group（×200）
3.2 小鼠TA横截面积测定结果 3.3 小鼠TA蛋白合成与分解代谢能力测定结果
与假手术组比较，模型组小鼠TA明显萎缩，肌纤维 与假手术组比较，模型组小鼠 TA 单位时间内蛋白
变细，横截面积显著减小（P＜0.05）；与模型组比较，四 质合成代谢能力显著减弱、分解代谢能力显著增强（P＜
君子汤中、高剂量组和复方α-酮酸片组小鼠 TA 肌纤维 0.05）；与模型组比较，四君子汤中、高剂量组和复方α-酮
变粗，横截面积显著增大（P＜0.05），且四君子汤高剂量 酸片组小鼠TA单位时间内蛋白质合成代谢能力显著增
组和复方α-酮酸片组小鼠TA横截面积显著大于四君子 强、分解代谢显著减弱（P＜0.05）；与四君子汤低剂量组
汤低剂量组（P＜0.05）；四君子汤中、高剂量组和复方α- 比较，四君子汤高剂量组和复方α-酮酸片组小鼠单位时
酮酸片组之间小鼠TA横截面积差异无统计学意义（P＞ 间内蛋白质合成代谢能力显著增强、分解代谢显著减弱
0.05）。各组小鼠的 TA 横截面显微图见图 1，横截面积 （P＜0.05）；四君子汤中、高剂量组和复方α-酮酸片组之
测定结果见表3。 间小鼠TA单位时间内蛋白合成与分解代谢能力差异均

中国药房 2020年第31卷第19期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 19 ·2361 ·