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表1 各组细胞中ADM含量测定结果（x±±s，n＝10） 表2 各组细胞中Bcl-2、Cleaved-Caspase-9 p37蛋白表
Tab 1 Content of ADM in cells in each group（x±±s， 达水平测定结果（x±±s，n＝3）
n＝10） Tab 2 Protein expression levels of Bcl-2 and Cleaved-
Caspase-9 p37 in cells in each group（x ±± s，
组别 荧光强度
敏感组 62.13±12.08 n＝3）
耐药组 69.02±7.97 组别 Bcl-2/GAPDH Cleaved-Caspase-9 p37/GAPDH
索拉非尼组 88.24±7.07 ## 敏感组 0.60±0.08 0.41±0.10
脱脂膏组 77.32±7.89 # 耐药组 0.98±0.06 ＊＊ 0.54±0.09
CⅡ-3组 79.79±6.09 ## 索拉非尼组 0.85±0.16 0.96±0.10 ##
#
注：与耐药组比较，P＜0.05，P＜0.01 脱脂膏组 1.09±0.12 ▲ 0.49±0.05 ▲▲
##
Note：vs. drug-resistance group，P＜0.05，P＜0.01 CⅡ-3组 0.66±0.08 ## 0.75±0.11 #▲
##
#
##
#
＊ ＊
3.3 美洲大蠊提取物对耐药细胞 HepG2/ADM 中凋亡 注：与敏感组比较， P＜0.01；与耐药组比较，P＜0.05，P＜
▲
▲▲
相关蛋白表达的影响 0.01；与索拉非尼组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊ ＊
Note：vs. sensitivity group， P＜0.05；vs. drug-resistance group，
与敏感组比较，耐药组细胞中 Bcl-2 蛋白表达水平
▲▲
# P＜0.05，P＜0.01；vs. sorafenib group， P＜0.05， P＜0.01
##
▲
显著升高（P＜0.05），Cleaved-Caspase-9 p37 蛋白表达水
细胞中 MDR1、BCRP mRNA 表达水平均显著降低（P＜
平差异无统计学意义（P＞0.05）。与耐药组比较，CⅡ-3
0.05或P＜0.01），但LRP mRNA表达水平显著升高（P＜
组细胞中 Bcl-2 蛋白表达水平显著降低（P＜0.01），索拉
0.05）；CⅡ-3 组细胞中 MDR1、LRP、BCRP mRNA 表达
非尼组、CⅡ-3 组细胞中 Cleaved-Caspase-9 p37 蛋白表
水平均显著降低（P＜0.01）。与索拉非尼组比较，脱脂
达水平均显著升高（P＜0.05 或 P＜0.01）。与索拉非尼
膏组、CⅡ-3 组细胞中 MDR1 mRNA 表达水平均显著降
组比较，CⅡ-3组细胞中Bcl-2蛋白表达水平差异无统计
低（P＜0.01），CⅡ-3组细胞中LRP mRNA表达水平差异
学 意 义（P＞0.05）。 各 组 细 胞 中 Bcl-2、Cleaved-Cas-
无统计学意义（P＞0.05）。各组细胞中 MDR1、LRP、
pase-9 p37蛋白表达电泳图见图3，蛋白表达水平测定结
BCRP mRNA表达水平测定结果见表3。
果见表2。
表3 各组细胞中MDR1、LRP、BCRP mRNA表达水平
测定结果（x±±s，n＝3）
Bcl-2 26 kDa
Tab 3 mRNA expression levels of MDR1，LRP and
BCRP in cells in each group（x±±s，n＝3）
GAPDH 36 kDa
组别 MDR1 LRP BCRP
敏感组 耐药组 索拉非尼组 脱脂膏组 CⅡ-3组 敏感组 0.82±0.042 ＊＊ 0.56±0.12 ＊＊ 0.75±0.04 ＊＊
1.00±0.00
1.00±0.00
耐药组
1.00±0.00
A. Bcl-2 索拉非尼组 1.32±0.00 ## 0.68±0.10 ## 0.25±0.06 ##
Full-length Caspase-9 46 kDa 脱脂膏组 0.38±0.03 ##▲▲ 1.32±0.09 #▲▲ 0.93±0.01 #▲▲
Cleaved-Caspase-9 p37 37 kDa CⅡ-3组 0.51±0.02 ##▲▲ 0.57±0.05 ## 0.70±0.02 ##▲▲
Cleaved-Caspase-9 p35 35 kDa
注：与敏感组比较， P＜0.01；与耐药组比较，P＜0.05，P＜
##
#
＊ ＊
0.01；与索拉非尼组比较， P＜0.01
▲▲
GAPDH 36 kDa
＊ ＊
Note：vs. sensitivity group， P＜0.05；vs. drug-resistance group，
敏感组 耐药组 索拉非尼组 脱脂膏组 CⅡ-3组 # P＜0.05，P＜0.01；vs. sorafenib group， P＜0.01
▲▲
##
B. Cleaved-Caspase-9 p37 3.4.2 MDR 相关蛋白表达 与敏感组比较，耐药组细
图 3 各组细胞中 Bcl-2、Cleaved-Caspase-9 p37 蛋白表 胞中 P-gp、LRP、BCRP 蛋白表达水平显著升高（P＜0.05
达电泳图 或 P＜0.01）。与耐药组比较，各给药组细胞中 LRP、
Fig 3 Electrophoretograms of protein expression of BCRP 蛋白表达水平均显著降低（P＜0.01），但细胞中
Bcl-2 and Cleaved-Caspase-9 p37 in cells in P-gp蛋白表达水平均显著升高（P＜0.01）。与索拉非尼
each group 组比较，脱脂膏组、CⅡ-3组细胞中P-gp蛋白表达水平均
显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01），CⅡ-3 组细胞中 LRP、
3.4 美洲大蠊提取物对 HepG2/ADM 细胞中 MDR 相 BCRP 蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。各
关基因mRNA及其蛋白表达的影响 组细胞中P-gp、LRP、BCRP蛋白表达的免疫细胞化学染
3.4.1 MDR 相关基因 mRNA 表达 与敏感组比较，耐 色显微图见图4，蛋白表达水平测定结果见表4。
药组细胞中MDR1、LRP、BCRP mRNA表达水平均显著 3.5 美洲大蠊提取物对 HepG2/ADM 细胞中酶介导
升高（P＜0.01）。与耐药组比较，索拉非尼组细胞中 MDR途径中相关基因mRNA及其蛋白表达的影响
LRP、BCRP mRNA 表达水平均显著降低（P＜0.01），但 3.5.1 酶介导MDR途径中相关基因mRNA表达 与敏
MDR1 mRNA 表达水平显著升高（P＜0.01）；脱脂膏组 感组比较，耐药组细胞中GST-π mRNA表达水平显著升
·1820 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 15 中国药房 2020年第31卷第15期