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表3 10批制吴茱萸饮片、水煎液、配方颗粒的UPLC特 表5 特征图谱中各特征峰峰面积占比的方差分析结果
征图谱相似度分析 (x±±s,n=10)
Tab 3 Similarity analysis of UPLC characteristic Tab 5 Results of variance analysis of the ratio of each
chromatograms of 10 batches of decoction characteristic peak area in the characteristic
piece,water decoction,formula granules of chromatograms(x±±s,n=10)
processed E. rutaecarpa 共有峰 吴茱萸饮片 吴茱萸水煎液 吴茱萸配方颗粒 制吴茱萸饮片 制吴茱萸水煎液 制吴茱萸配方颗粒
批次 1号峰 1.66±0.68 22.30±0.55 a 21.84±1.00 a 2.05±0.05 bc 20.28±0.65 abcd 20.38±0.73 abcd
样品 a a bc abcd abcd
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2号峰 4.10±2.36 17.23±1.57 16.55±1.77 2.76±0.13 14.90±1.31 14.32±1.18
制吴茱萸饮片与水煎液 0.385 0.324 0.281 0.365 0.313 0.363 0.305 0.330 0.335 0.352 3号峰 1.06±0.06 10.94±0.67 a 11.15±0.49 a 1.33±0.09 bc 10.83±0.76 ad 10.59±1.01 acd
制吴茱萸饮片与配方颗粒 0.380 0.329 0.284 0.376 0.329 0.352 0.306 0.345 0.358 0.349 4号峰 0.24±0.03 1.14±0.05 a 1.00±0.03 ab 0.65±0.05 abc 3.37±0.20 abcd 3.86±0.24 abcde
制吴茱萸水煎液与配方颗粒 0.999 1.000 0.999 0.998 0.998 0.999 0.999 0.998 0.996 0.998 5号峰 0.73±0.09 2.66±0.29 a 2.17±0.08 ab 0.88±0.03 bc 3.05±0.26 abcd 2.61±0.27 acde
6号峰 4.43±0.51 16.17±0.63 a 13.19±0.73 ab 5.27±0.12 abc 19.09±0.98 abcd 18.19±1.20 abcde
45 7号峰 0.99±0.30 1.36±0.12 a 1.13±0.02 ab 0.23±0.03 abc 0.90±0.09 bcd 0.79±0.13 abcd
8号峰 15.37±4.19 18.96±1.17 a 21.04±1.37 ab 11.89±0.41 abc 17.64±0.94 acd 18.74±0.89 acd
30
mV a a bc ad ad
U, 15 9号峰 40.41±3.87 3.41±1.11 4.31±1.33 41.17±0.90 3.13±0.92 3.00±0.78
10号峰 3.01±0.32 1.25±0.20 a 1.46±0.26 ab 3.80±0.16 abc 1.33±0.14 ad 1.46±0.17 abd
0 11号峰 13.82±1.08 2.92±0.73 a 4.30±0.91 ab 14.79±0.29 abc 3.05±0.64 acd 3.52±0.62 acd
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 12号峰 0.90±0.06 0.10±0.06 a 0.09±0.05 a 0.93±0.02 bc 0.10±0.05 ad 0.10±0.04 ad
t,min 13号峰 1.51±0.14 0.18±0.12 a 0.18±0.11 a 1.60±0.05 bc 0.17±0.10 ad 0.15±0.09 ad
图4 甘草酸对照品的UPLC色谱图 14号峰 5.27±0.40 0.86±0.45 a 0.98±0.47 a 5.65±0.07 abc 0.85±0.45 ad 0.91±0.49 ad
Fig 4 UPLC chromatogram of ammonium glycyrrhi- 15号峰 4.26±0.72 0.10±0.12 a 0.09±0.05 a 4.31±0.94 bc 0.21±0.15 ad 0.15±0.07 ad
16号峰 2.25±0.12 0.42±0.23 a 0.50±0.23 a 2.50±0.02 abc 0.50±0.21 ad 0.52±0.26 ad
zic acid control
17号峰 0.18±0.03 0.62±0.10 d 0.71±0.10 de
a
b
表4 10批吴茱萸与制吴茱萸饮片、水煎液、配方颗粒的 注:与吴茱萸饮片比较,P<0.05;与吴茱萸水煎液比较,P<
c
d
UPLC特征图谱相似度分析 0.05;与吴茱萸配方颗粒比较,P<0.05;与制吴茱萸饮片比较,P<
e
Tab 4 Similarity analysis of UPLC characteristic 0.05;与制吴茱萸水煎液比较,P<0.05
Note:vs. E. rutaecarpa decoction piece,P<0.05;vs. E. rutaecar-
a
chromatograms of 10 batches of decoction
c
b
pa water decoction,P<0.05;vs. E. rutaecarpa formula granules,P<
piece,water decoction,formula granules of
0.05;vs. processed E. rutaecarpa decoction piece,P<0.05;vs. pro-
d
E. rutaecarpa and processed E. rutaecarpa cessed E. rutaecarpa water decoction,P<0.05
e
批次 由图 5 可见,吴茱萸饮片和制吴茱萸饮片可聚为Ⅰ
样品
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 类,其中吴茱萸饮片和制吴茱萸饮片又可分别聚为Ⅰa
吴茱萸饮片与制吴茱萸饮片 0.998 0.999 0.999 0.998 0.917 0.999 0.999 0.998 0.981 0.988
吴茱萸水煎液与制吴茱萸水煎液 0.986 0.985 0.988 0.991 0.994 0.989 0.986 0.990 0.994 0.989 和Ⅰb 类;吴茱萸和制吴茱萸的水煎液和配方颗粒可聚
吴茱萸配方颗粒与制吴茱萸配方颗粒 0.973 0.977 0.967 0.986 0.986 0.982 0.977 0.986 0.989 0.985 为Ⅱ类,其中吴茱萸水煎液和制吴茱萸水煎液可聚为Ⅱ
α=0.05,P<0.05 为差异有统计学意义)。由表 5 可见, a 类、吴茱萸配方颗粒和制吴茱萸配方颗粒可聚为Ⅱb
与吴茱萸饮片比较,吴茱萸水煎液和配方颗粒的16个特 类。这表明炮制前后吴茱萸饮片和制吴茱萸饮片成分
征峰均有显著性差异(P<0.05);与制吴茱萸饮片比较, 存在一定差异,但仍可聚为一类;饮片加水煎煮后提取
出的成分变化较大,但其水煎液与配方颗粒之间无明显
制吴茱萸水煎液和配方颗粒的 17 个特征峰均有显著性
差异,可聚为一类。
差异(P<0.05)。这说明吴茱萸和制吴茱萸饮片加水煎
主成分分析结果以特征值大于 1 为判断标准,提取
煮提取后化学成分间的比例关系发生了显著的变化。
出两个主成分,主成分1(PC1)、主成分2(PC2)对总方差
与吴茱萸样品比较,制吴茱萸样品除增加17号特征峰甘
的累积贡献率达89.883%,说明这两个主成分可作为样
草酸外,两种饮片主要区别在于4、6~8、10、11、14、16号
品的主要评价指标。根据主成分分析二维得分散点图
特征峰的峰面积占比,两种水煎液主要区别在于 1、2、
(见图 6)显示,吴茱萸饮片、制吴茱萸饮片各聚为一类,
4~7号特征峰的峰面积占比,两种配方颗粒主要区别在
与水煎液、配方颗粒样品距离较大,表明饮片加水煎煮
于特征图谱前半段水溶性成分1~8、11号特征峰的峰面 或制成配方颗粒后成分变化明显;而吴茱萸水煎液与吴
积占比,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。 茱萸配方颗粒样品距离较小,可聚为一类;制吴茱萸水
2.9.2 聚类分析和主成分分析 将 10 批吴茱萸与制吴 煎液与制吴茱萸配方颗粒样品距离较小,可聚为一类,
茱萸的饮片、水煎液、配方颗粒共60个样品的特征图谱 表明水煎液与配方颗粒之间成分差异较小。
中 16/17 个特征峰的相对峰面积作为变量(缺失特征峰 3 讨论
峰面积记为 0),使用 SPSS 20.0 软件进行聚类分析和主 供试品制备方法对特征图谱的建立影响较大,本研
成分分析,结果见图5、表6。 究分别选取了不同比例的甲醇和乙醇作为提取溶剂。
中国药房 2020年第31卷第14期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 14 ·1743 ·