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水为纯化水。 有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，18个共有峰
淫羊藿饮片（批号：1901001，产地：甘肃陇南）购自 相对保留时间的 RSD 均小于 3％（n＝6），相对峰面积的
安国仁德兴饮片有限公司，经山东中医药大学附属医院 RSD 均小于 5％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置
药学部张学顺教授鉴定为小檗科淫羊藿（E. brevicornu 24 h内稳定性良好。
Maxim.）的干燥叶。淫羊藿羊脂油烘制品制备方法：取 2.1.6 重复性试验 取样品（编号：S1）粉末约 0.2 g，共
淫羊藿饮片300 g，加羊脂油60 g，拌匀后置于干燥箱中， 6份，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项
以不同条件烘制，得22批淫羊藿羊脂油烘制样品（编号： 下色谱条件进样测定，以淫羊藿苷为参照，计算各共有
S1～S22），其信息见表1。 峰的相对保留时间和相对峰面积。结果，18个共有峰相
表1 样品信息 对保留时间的 RSD 均小于 3％（n＝6），相对峰面积的
Tab 1 Information of samples RSD均小于4％（n＝6），表明本方法重复性良好。
编号 烘制温度，℃ 烘制时间，min 编号 烘制温度，℃ 烘制时间，min 2.1.7 HPLC 指纹图谱的生成 取 22 批样品（编号：
S1（生品） S12 150 30 S1～S22）适量，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再
S2 90 10 S13 180 5 按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，采用《中药色谱指纹
S3 90 20 S14 180 10
S4 90 30 S15 180 20 图谱相似度评价系统（2012 年版）》，以 S1 样品的 HPLC
S5 120 5 S16 180 30 图谱为对照图谱（R），对 22 批样品的 HPLC 图谱进行分
S6 120 10 S17 210 5 析，得 HPLC 叠加指纹图谱。其中，叠加指纹图谱见图
S7 120 20 S18 210 10
S8 120 30 S19 210 20 1，对照指纹图谱见图2。
S9 150 5 S20 240 5
S10 150 10 S21 240 10 1 000
S11 150 20 S22 240 15 R S22
800 S21
2 方法与结果 S20
S19
S18
S17
2.1 指纹图谱的建立 600 S16
mV S15
S14
2.1.1 色谱条件 色谱柱：Zorbax SB-C18 （250 mm×4.6 U， 400 S13
S12
S11
S10
mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-0.1％磷酸水溶液（B），梯 S9 S8
S7
200 S6
度洗脱（0～3 min，20％A；3～6 min，20％A→25％A；6～ S5
S4
S3
20 min，25％A→30％A；20～25 min，30％A→55％A； 0 S2 S1
25～30 min，55％ A→80％ A；30～35 min，80％ A→ 5 10 15 20 25 30 35
t，min
20％A）；检测波长：280 nm；流速：1.0 mL/min；柱温：
图1 22批淫羊藿羊脂油烘制品的HPLC叠加指纹图谱
30 ℃；进样量：10 μL。
Fig 1 HPLC superimposed fingerprints of 22 batches
2.1.2 混合对照品溶液的制备 分别取淫羊藿苷、宝藿
of suet oil-baked E. brevicornum
苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、箭藿苷A、箭藿苷B
200
对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成上述7种成分
质量浓度分别为0.101 2、0.099 6、0.100 4、0.100 8、0.101 8、 150
0.100 2、0.099 8 mg/mL的混合对照品溶液。
mV 100
2.1.3 供试品溶液的制备 取样品粉碎，过三号筛，取 U，
粉末约0.2 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加50％乙醇 50
50 mL，称定质量，超声（功率：250 W，频率：50 kHz）处理
0
60 min，放冷，再次称定质量，用50％乙醇补足减失的质 0 5 10 15 20 25 30 35
量，滤过，取续滤液，即得。 t，min
图2 淫羊藿羊脂油烘制品的HPLC对照指纹图谱
2.1.4 精密度试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（编号：
Fig 2 HPLC control fingerprint of suet oil-baked E.
S1）适量，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，以
brevicornum
淫羊藿苷为参照，计算各共有峰的相对保留时间和相对
峰面积。结果，18 个共有峰相对保留时间的 RSD 均小 2.1.8 共有峰的指认 22 批样品（编号：S1～S22）共有
于2％（n＝6），相对峰面积的RSD均小于3％（n＝6），表 18 个共有峰，通过与混合对照品溶液的 HPLC 图（图 3）
明本方法精密度良好。 对比，指认了7个共有峰，分别为5号峰（朝藿定A）、6号
2.1.5 稳定性试验 取“2.1.3”项下供试品溶液（编号： 峰（朝藿定B）、7号峰（朝藿定C）、9号峰（淫羊藿苷）、15
S1）适量，分别于室温放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.1.1” 号峰（箭藿苷 A）、16 号峰（箭藿苷 B）、17 号峰（宝藿苷
项下色谱条件进样测定，以淫羊藿苷为参照，计算各共 Ⅰ）。由于9号峰峰面积较大且分离度良好，故以其为参

·1482 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 12 中国药房 2020年第31卷第12期