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珠 芽 景 天 为 景 天 科 植 物 珠 芽 景 天（Sedum bul-                      表1 13批药材样品来源
        biferum Makino.）的干燥全草，又名小箭草、珠芽半支，广                        Tab 1 Source of 13 batches of samples
        泛分布于我国南部地区，野生资源丰富，是我国民间常                           编号   批号         产地        编号  批号         产地
        用的植物药，可用于治疗寒热疟疾、食积腹痛、热毒痈肿                          S1  20160602  贵阳市清镇市百花湖乡  S8  20160609  安顺市平坝县城关镇
                                                           S2  20160605-1  贵阳市清镇市百花湖乡  S9  20160610-1  贵阳市清镇市百花湖乡
        等症  [1-3] 。化学成分研究显示，珠芽景天主要含有生物碱
                                                           S3  20160605-2  贵阳市南明区云关乡  S10  20160610-2  贵阳市清镇市百花湖
        类、多糖类、三萜类、黄酮类、矿质元素等化学成分                     [4-9] 。  S4  20160605-3  贵阳市南明区机场路  S11  20160610-3  贵阳市清镇市百花湖乡
        本课题组前期研究中发现，黄酮类化合物为珠芽景天的                           S5  20160605-4  贵阳市南明区云关乡  S12  20160702  贵阳市清镇市百花湖乡
                                                           S6  20160607-1  贵阳市修文县小箐乡  S13  20160618  贵阳市清镇市百花湖乡
        主要成分，并分离得到以山柰酚、槲皮素为母核的苷类
                                                           S7  20160607-2  贵阳市修文县扎佐镇
        化合物，包括山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-（1→2）-α-L-                 2 方法与结果
        吡 喃 葡 萄 糖 -7-O-α-L- 吡 喃 鼠 李 糖 苷（KGGR）、山 柰
                                                           2.1 色谱条件
        酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（KGR）、
                                                               色谱柱：Waters CORTECS C18 （150 mm×4.6 mm，2.7
        槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷（QRR）、Bul-
                                                           μm）；流动相：乙腈（A）- 0.1％磷酸水溶液（B）；梯度洗脱
        biferumosideⅡ、山柰酚-3-O-（6-香豆酰基）-β-D-葡萄糖-
                                                           （0～5 min，5％A→12％A；5～15 min，12％A→13％A；
       （1→2）-β-D-葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷（KcGGR）、山柰
                                                           15～30 min，13％A；30～45 min，13％A→14％A；45～
        酚-3-O-（2-β-D-葡萄糖）-α-L-鼠李糖-7-O-α-L-鼠李糖苷
                                                           60 min，14％A→15％A）；流速：0.8 mL/min；柱温：35 ℃；
       （KGRR）、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷-7-O-α-L-鼠李糖苷                检测波长：254 nm；进样量：5 μL。
       （KRR）、山柰酚-3-O-（6″-乙酰基-β-D-葡萄糖）-7-O-α-L-
                                                           2.2 溶液的制备
        鼠李糖苷（KaGR）等。已有药理活性研究表明，珠芽景
                                                           2.2.1  混合对照品溶液的制备            取KGGR、KGR、QRR、
        天的黄酮类成分对人肝癌细胞株HepG2、人食管癌细胞
                                                           Bulbiferumoside Ⅱ、KcGGR、KGRR、KRR 和 KaGR 对照
        株EC109、人结肠癌细胞株SW480的体外增殖有抑制作
                                                           品适量，精密称定，分别用甲醇溶解并定容至 10 mL 量
        用 [10-11] 。
                                                           瓶中，得单一对照品贮备液。精密吸取上述单一对照品
            中药成分复杂多样且质量不易控制，这在一定程度
                                                           贮备液各适量，置于同一 10 mL 量瓶中，用甲醇溶解并
        上制约了中药的研究与开发。目前，有关珠芽景天质量
                                                           稀释至刻度，制成每1 mL含KGGR 13.0 μg、KGR 4.6 μg、
        控制的研究报道较少，仅见黄酮苷元槲皮素和山柰素的
                                                           QRR 7.7 μg、Bulbiferumoside Ⅱ 10.4 μg、KcGGR 9.4 μg、
        定量研究    [10-11] ，然而仅通过单一化学成分的含量测定难
                                                           KGRR 7.5 μg、KRR 9.3 μg、KaGR 32.4 μg 的混合对照品
        以全面评估珠芽景天的质量。近年来，多指标含量测定                           溶液，保存于4 ℃冰箱中，备用。
        已广泛应用于中药材的质量控制，如白花蛇舌草、大黄、
                                                           2.2.2  供试品溶液的制备          取珠芽景天药材适量，粉碎
        三叶青等    [12-14] 。因此，本研究拟建立同时测定珠芽景天
                                                           后，过 40 目筛。精密称取上述粉末 1 g，加入 50％乙醇
        药材中上述8种主要黄酮苷类成分含量的高效液相色谱                           20 mL，称定质量后，水浴加热回流 1 h，冷却至室温，再
        法（HPLC），旨在为该药材的质量控制研究提供参考。
                                                           次称定质量，用50％乙醇补足减失质量，摇匀，以12 000
        1 材料                                               r/min离心10 min，取上清液，即得供试品溶液。
        1.1  仪器                                            2.3  方法学考察
            UltiMate 3000 型 HPLC 仪，包括系统控制器、输液              2.3.1  专属性考察       精密吸取空白对照溶液（甲醇溶
        泵、脱气组件、低压梯度组件、自动进样器、柱温箱、温控                         液）和“2.2”项下供试品溶液（编号：S5）、混合对照品溶
        样品室、二极管阵列检测器、Chromeleon 7.0色谱数据工                   液适量，空白对照溶液和供试品溶液按“2.1”项下色谱条
        作站（美国Thermo Fisher Scientific公司）；Allegra 64R型      件进样测定，混合对照溶液用甲醇稀释5倍后进样测定，
        低温高速离心机（美国 Beckman Coulter 公司）；WP-UP-              记录色谱图，详见图1。结果，在该色谱条件下，KGGR、
        Ⅳ-20 型超纯水机（四川沃特尔科技发展有限公司）；                         KGR、QRR、Bulbiferumoside Ⅱ、KcGGR、KGRR、KRR 和
        EL204 型电子天平[梅特勒-托利多仪器（上海）有限公                       KaGR的分离度均良好，且色谱峰峰形对称，理论板数按
        司]。                                                QRR峰计均不低于17 000。
        1.2 药品与试剂                                          2.3.2  标准曲线绘制        精密吸取“2.2.1”项下混合对照
            珠芽景天药材采自贵州省各地，经贵州中医药大学                         品溶液1.0 mL，置于5 mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻
        药学院孙庆文教授鉴定为景天科景天属植物珠芽景天                            度，制成 KGGR、KGR、QRR、Bulbiferumoside Ⅱ、KcG-
       （S. bulbiferum Makino.）的干燥全草，13批药材样品来源              GR、KGRR、KRR 和 KaGR 质量浓度分别为 2.60、0.92、
        见表 1。KGGR、KGR、QRR、BulbiferumosideⅡ、KcG-            1.54、2.08、1.88、1.50、1.86、6.48 μg/mL的混合溶液，分别
        GR、KGRR、KRR、KaGR 对照品均为本实验室自制，经                     精密吸取 5、8、10、12、15、18、20 μL，按“2.1”项下色谱条
        HPLC面积归一法检测纯度均大于98.0％；乙腈、甲醇均                       件进样测定，记录峰面积。以待测成分进样量（x，μg）为
        为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。                              横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，结果见表2。


        中国药房    2020年第31卷第12期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 12  ·1437  ·
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