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及假小叶。七味清肝散各剂量组大鼠肝组织纤维增生
减少,炎症细胞浸润减少,细胞变性、坏死减少,详见图
1、图2。
3.1.5 α-SMA 表达 与空白组比较,HF 模型组大鼠肝
组织中α-SMA的表达水平显著升高(P<0.05);与HF模
型组比较,七味清肝散各剂量组大鼠肝组织中α-SMA的
A.空白组 B. HF模型组
表达水平均显著降低(P<0.05),详见图3、表1。
3.2 差异表达蛋白分析结果
经质谱数据解析,共鉴定出药物组表达蛋白 5 013
个,HF 模型组表达蛋白 5 012 个;两组差异表达蛋白有
146个,其中表达上调82个、表达下调64个;经查阅中国
知网、万方数据、PubMed 等数据库中的相关文献发现,
其中有 42 个差异表达蛋白与 HF 有关(表达上调 15 个、 C.七味清肝散低剂量组 D.七味清肝散中剂量组
表达下调27个),详见表2。
3.3 生物学功能分析结果
3.3.1 差异表达蛋白 GO 注释 GO 注释内容主要包括
生物过程、细胞组分和分子功能。结果显示,生物过程
以参与单一生物体过程、代谢过程、细胞进程为主,分别
富集差异表达蛋白 97、86、83 个;细胞成分以细胞、细胞
E.七味清肝散高剂量组
器、膜为主,分别富集差异表达蛋白96、77、51个;分子功
图1 各组大鼠肝组织HE染色病理切片显微图(×100)
能以结合、催化活性为主,分别富集差异表达蛋白91、76 Fig 1 Micrographs of pathological sections by HE
个,详见图4。亚细胞定位分析结果显示,差异表达蛋白 staining in rats of each group(×100)
主要分布于细胞质(定位比例为29.45%,即某生物学功
能项下差异表达蛋白占所有注释到该生物学功能的蛋
白总数的比例,下同)、细胞外区(27.4%)和细胞膜
(10.96%),详见图5。
3.3.2 差异表达蛋白富集分析 将差异表达蛋白在
GO、KEGG 通路这两个方面均进行富集分析,得到了
GO 一级分类描述下的三大类(即生物过程、分子功能、 A.空白组 B. HF模型组
细胞组分)富集结果以及 KEGG 通路富集结果,分别见
图6、图7(图中,条形图越长,则表示差异表达蛋白在该
分类或功能上的富集越显著)。
GO富集结果显示,差异表达蛋白在细胞外空间、血
液微粒、内质网部分等细胞组分,在氧化还原酶活性、脂
肪酸结合、单羧酸结合等分子功能,以及在异型细胞间 C.七味清肝散低剂量组 D.七味清肝散中剂量组
黏附的调控、蛋白质活化级联、调节血管大小等生物过
程上显著富集。
KEGG通路富集结果显示,差异表达蛋白主要富集
于类固醇激素的生物合成、视黄醇代谢、组氨酸代谢、花
生四烯酸代谢、细胞色素 P450代谢外源物质和过氧化物
酶体增殖物激活受体(PPAR)等信号通路(P<0.05)。其
E.七味清肝散高剂量组
中,视黄醇代谢、花生四烯酸代谢和 PPAR 信号通路与 图 2 各组大鼠肝组织 Masson 染色病理切片显微图(×
HF 有关 [13-14] ,且 PPAR 信号通路中富集到了经七味清肝 100)
散作用后下调的脂肪酸结合蛋白 4(FABP4)和胆固醇7 Fig 2 Micrographs of pathological sections by Mas-
α-羟化酶(CYP7A1),二者亦与HF密切相关 [15-17] 。 son staining in rats of each group(×100)
·1298 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 11 中国药房 2020年第31卷第11期