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基于蛋白质组学研究七味清肝散的抗肝纤维化作用及机制 Δ

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梁 洁 ，孟根斯立木 ，颜羽昕 ，金 蓉 ，包小妹 ，马丽杰 ，那日苏 ，苏晓丽 ，谢敏琦 ，马月宏 （1.内蒙古医
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科大学基础医学院，呼和浩特 010110；2.内蒙古医科大学药学院，呼和浩特 010110；3.内蒙古自治区第三医
院睡眠科，呼和浩特 010110）
中图分类号 R285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）11-1294-09
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.11.03
摘 要 目的：探讨七味清肝散的抗肝纤维化（HF）作用，并挖掘其潜在机制。方法：将雄性Wistar大鼠随机分为空白组、HF模型
组和七味清肝散低、中、高剂量组[135、270、405 mg/（kg·d），以生药总量计]，每组12只。除空白组外，其余各组均灌胃50％四氯化
碳花生油溶液（2 mL/kg，每周2次，连续8周）以复制HF模型；与此同时，空白组和HF模型组大鼠均灌胃等容0.5％羧甲基纤维素
钠溶液，各给药组大鼠均灌胃相应药物，每日1次，连续8周。观察各组大鼠的一般情况，于末次给药后观察其肝脏形态，并测定肝
脏指数；检测大鼠血清肝功能指标[丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、羟脯氨酸（HYP）]含量以及
肝组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况，并采用苏木精-伊红染色和Masson染色进行组织病理学观察。采用串联质谱标
签（TMT）技术，以蛋白表达量的差异倍数为指标，筛选药物组（合并七味清肝散各剂量组肝组织样品）和HF模型组的差异表达蛋
白，并借助Uniprot-GOA数据库以及KAAS、KEGG mapper在线工具等对其进行基因本体（GO）和KEGG通路富集分析。结果：空
白组大鼠健康状况好；肝脏呈鲜红色且表面光滑，肝小叶完整，未见变性坏死、炎症细胞浸润或纤维组织增生。与空白组比较，HF
模型组大鼠饮食减少、精神萎靡、皮毛杂乱且无光泽；肝脏呈暗红色或黄色，表面粗糙，质地较硬，可见炎症细胞浸润、纤维组织破
坏、桥间连接等现象；其肝脏系数、肝功能指标含量和α-SMA的表达水平均显著升高（P＜0.05）。与HF模型组比较，七味清肝散各
剂量组大鼠上述症状均有不同程度的改善，且低剂量组肝脏系数、高剂量组 ALP 含量以及各剂量组 ALT、AST、HYP 含量和
α-SMA的表达水平均显著降低（P＜0.05）。共筛选出与HF有关的差异表达蛋白42个，其中表达上调15个、表达下调27个，包括
脂肪酸结合蛋白4（FABP4）、胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1）等。富集分析结果显示，差异表达蛋白主要富集于细胞外空间、血液微
粒等细胞部位，涉及氧化还原酶活性、脂肪酸结合等分子功能，异型细胞间黏附的调控、蛋白质活化级联等生物过程以及视黄醇代
谢、花生四烯酸代谢、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）等信号通路。结论：七味清肝散可降低HF模型大鼠的肝脏系数以及
血清中ALT、AST、ALP、HYP含量，下调α-SMA的表达，改善肝组织的炎症及纤维化程度，具有一定的肝保护作用。该方潜在抗
HF作用机制可能涉及FABP4、CYP7A1、PPAR等多个靶点和信号通路。
关键词 肝纤维化；七味清肝散；蛋白质组学；串联质谱标签技术；差异表达蛋白；大鼠

Effects and Mechanism of Qiwei Qinggan Powder on Hepatic Fibrosis Based on Proteomics
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LIANG Jie ，Menggensilimu ，YAN Yuxin ，JIN Rong ，BAO Xiaomei ，MA Lijie ，Narisu ，SU Xiaoli ，XIE Minqi ，
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MA Yuehong（1. School of Basic Medicine，Inner Mongolia Medical University，Hohhot 010110，China；
2. School of Pharmacy，Inner Mongolia Medical University，Hohhot 010110，China；3. Dept. of Sleep，Inner
Mongolia Autonomous Third Hospital，Hohhot 010110，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate the anti-hepatic fibrosis（HF）effects of Qiwei qinggan powder and explore its possible
mechanism. METHODS：Male Wistar rats were randomly divided into blank group，HF model group，Qiwei qinggan powder
low-dose，medium-dose and high-dose groups [135，270，405 mg/（kg·d），by total amount of crude drugs]，with 12 rats in each
group. Except for blank group，other groups were given 50％ CCl4-peanut oil solution intragastrically（2 mL/kg，twice a week，for
consecutive 8 weeks） to induce HF model. At same time，
Δ 基 金 项 目 ：国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 项 目（No.81560706，
No.81960759）；内蒙古自治区自然科学基金资助项目（No.2014MS0841， blank group and model group were given constant volume of
No.2019MS08010）；内蒙古自治区“草原英才”工程青年创新人才培养 0.5％ CMC-Na solution intragastrically；administration groups
计划（No.内人社办发〔2016〕348 号）；内蒙古医科大学 2018 年校级人 were given relevant medicine intragastrically，once a day，for
才项目
consecutive 8 weeks. General situation of rats were observed，
＊硕士研究生。研究方向：中蒙药药理学。E-mail：904697460
and liver morphology was observed after last administration
@qq.com
#通信作者：教授，硕士生导师，硕士。研究方向：中蒙药药理学。 and hepatic indexes were detected. The contents of liver
电话：0471-6657028。E-mail：myh19982002@sina.com function indexes（ALT，AST，ALP，HYP）in serum and the

·1294 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 11 中国药房 2020年第31卷第11期