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表2 不同产地黄芩水提物的细胞毒性和抗病毒活性测 其对应的黄酮类成分模拟样品的抗病毒活性测定结果
定结果（n＝3） 详见表2、表3。
Tab 2 Cytotoxicity and antiviral activity of S. ba- 由表 2 可知，S4 样品（产地：河北承德）水提物的
icalensis water extract from different origins IC50 最小（11.11 μg/mL），S3 样品（产地：山西）水提物的
（n＝3） IC50最大（51.74 μg/mL）；S1 样品（产地：内蒙古-1）和 S6
样品编号 TC50，μg/mL IC50，μg/mL TI 样品（产地：内蒙古-2）水提物的 IC50均为 19.24 μg/mL；
S1 100.04 19.24 5.20 S5 样品（产地：甘肃）和 S8 样品（产地：山东）水提物的
S2 115.47 41.23 2.80
S3 96.15 51.74 1.86 IC50均为33.33 μg/mL。综合考虑TI值大小后认为，S4样
S4 57.74 11.11 5.20 品（产地：河北承德）水提物的抗病毒作用最强（TI＝
S5 101.02 33.33 3.03 5.2），S3 样品（产地：山西）水提物的抗病毒作用最弱
S6 75.04 19.24 3.90
S7 100.89 25.87 3.90 （TI＝1.9）。
S8 129.99 33.33 3.90 由表 3 可知，8 批黄酮类成分模拟样品都呈现出
利巴韦林 85.90 2.47 34.78
不同程度的抗 RSV 活性。综合考虑 IC50 值和 TI 值的
表3 不同产地黄芩对应的黄酮类成分模拟样品的细胞 大小，按照 4 种成分含量构成比 1 ∶ 0.235 ∶ 0.261 ∶ 0.042
毒性和抗病毒活性测定结果（n＝3） 配制的 E1 样品（模拟内蒙古-1 产黄芩）和按照含量构
Tab 3 Cytotoxicity and antiviral activity of corre-
成比 1 ∶ 0.224 ∶ 0.111 ∶ 0.013 配制的 E4 样品（模拟河北承
sponding simulated samples of flavonoids for
德产黄芩）的 TI 较大（均大于 4），且后者的 IC50明显更
S. baicalensis from different origins（n＝3）
低，因此认为E4样品的抗病毒作用更强。而按照4种成
模拟样品编号 黄酮类成分的含量构成比 TC50，μg/mL IC50，μg/mL TI 分含量构成比 1 ∶ 0.194 ∶ 0.101 ∶ 0.033 配制的 E3 样品（模
E1 1∶0.235∶0.261∶0.042 35.83 8.62 4.16
E2 1∶0.234∶0.455∶0.064 52.23 14.61 3.57 拟山西产黄芩）IC50较大（13.37 μg/mL）、TI 较小（1.85），
E3 1∶0.194∶0.101∶0.033 24.68 13.37 1.85 表现出较弱的抗病毒活性。
E4 1∶0.224∶0.111∶0.013 23.11 4.87 4.75 2.3 两种样品中黄酮类成分含量与其抗病毒活性相关
E5 1∶0.272∶0.204∶0.061 28.74 9.85 2.92
E6 1∶0.241∶0.713∶0.106 33.22 8.76 3.79 性分析
E7 1∶0.201∶0.057∶0.022 35.44 13.57 2.61 采用SPSS 17.0软件分别对不同产地黄芩样品的黄
E8 1∶0.214∶0.140∶0.037 34.68 10.29 3.37 芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量与其抗RSV活性
利巴韦林 85.90 2.47 34.78
（以IC50值为指标）进行Pearson相关性分析。结果显示，
量（TCID50 ）。取上述病毒稀释液 100 μL，分别与“2.2.1” 上述 4 种成分的含量与抗病毒活性的相关系数（r）依次
“2.2.2”项下不同质量浓度药物溶液（黄芩水提物：2、5、 为0.132 7、0.343 9、0.153 3、0.164 0（均小于0.5）。根据r
10、20、40、80、160、320 μg/mL，以水提物计；模拟样品： 值判断黄芩中各黄酮类成分含量与其抗病毒活性无显
2、5、10、20、40、80、160、320 μg/mL，以混合对照品总量 著相关性。
计）100 μL 混合。取对数生长期 Hep-2 细胞，分别以 5× 3 讨论
10 个/孔接种至 96 孔板中，培养 16 h 后，加入上述药物 已有多项研究证实，黄芩具有确切的抗病毒作用，
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与病毒的混合液，在倒置显微镜下观察各给药孔细胞的 且其疗效的发挥与其所含的黄酮类成分密切相关 [7-14] 。
CPE，直至 CPE 值达到 4+（即细胞死亡比例为 75％～ 大量文献报道了不同产地、不同生长年限、野生与栽培
100％ ）时，记录各组细胞病变情况。试验同时设置对 黄芩中主要黄酮类成分的含量 [20-24] 。结合本课题组的前
[18]
照组和阳性对照组，其中对照组加入细胞但不加入药 期研究，笔者初步总结了黄芩中黄酮类成分的含量构成
物，阳性对照组加入细胞和利巴韦林（0.2、0.5、1、2、4、8、 特征。据郭玲玲等 的报道，不同生长年限（1、2、3 年
[20]
16、32 μg/mL），同法处理并测定。各给药剂量均参照文 生）陕西产栽培黄芩中的黄酮类成分的含量情况如下：
献[18]和前期预试验结果设定。试验重复3次操作。采 随着生长年限的延长，黄芩苷和汉黄芩苷的含量呈上升
[18]
用 Reed-Muench 法 计算两种样品对 RSV 病毒的半数 趋势，黄芩素和汉黄芩素的含量呈下降趋势。申洁等 [21]
抑制浓度（IC50 ），并结合“2.2.3”项下测得的 TD50值计算 的研究结果则略有不同：河北、山西产3年生黄芩中上述
药物的治疗指数（TI）：TI＝TC50/IC50。当TI＞1时判定为 黄酮苷类和苷元类成分的含量普遍高于1、2年生黄芩。
药物有效；且该值越大，其安全范围越大 。结果显示， 本课题组也曾对陕西、山西、河南、山东产的不同生产年
[18]
不同产地黄芩水提物及其黄酮类成分模拟样品和阳性 限（1、2、3年生）栽培黄芩中上述4种成分的含量进行了
对照利巴韦林对 RSV 均有抗病毒作用（TI＞1），抗病毒 考察。结果发现，陕西、山西、河南产2年生栽培黄芩中
作用的强弱顺序依次为利巴韦林＞黄酮类组分模拟样 上述黄酮类成分含量普遍高于1、3年生黄芩，而山东产
品＞黄芩水提物（按IC50排序）。不同产地黄芩水提物及 3 年生栽培黄芩的上述成分含量则高于 1、2 年生黄芩。

中国药房 2020年第31卷第10期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10 ·1169 ·