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was 1 ∶ 0.241 ∶ 0.713 ∶ 0.106. TC50 of S. baicalensis water extracts from different origins to Hep-2 cells was all higher than 50 μg/mL,
        IC 50 to RSV was 11.11-51.74 μg/mL;TI was 1.86-5.20. TC 50 of corresponding simulated samples of flavonoids was 23.11-52.23
        μg/mL,while IC50 to RSV was 4.87-14.61 μg/mL;TI was 1.85-4.75. The anti-RSV effects of water extract of S4 from genuine
        origins (Hebei Chengde) and its corresponding simulated sample E4 were the strongest. Correlation analysis showed that the
        correlation coefficient between the contents of 4 flavonoids and antiviral activity was less than 0.5,and there was no significant
        correlation between them. CONCLUSIONS:When the content constituent ratio of 4 main flavonoids in S. baicalensis was 1 ∶ 0.224 ∶
        0.111 ∶ 0.013,it has a strong inhibition effect on RSV. S. baicalensis from genuine origins has better constituent characteristics of
        flavonoids,which may be the important material basis for the best antiviral effect of genuine medicinal material.
        KEYWORDS     Scutellaria baicalensis;Genuine medicinal material; Flavonoids; Content determination;Antiviral activity;
        Quality-efficiency relationship


            黄 芩 是 唇 形 科 植 物 黄 芩(Scutellaria baicalensis    品(批号:15080513,纯度:>98%)均购自成都曼斯特生
        Georgi)的干燥根,其入药始见于《神农本草经》。黄芩性                      物科技有限公司;利巴韦林原料药(新乡制药股份有限
        寒、味苦,归肺、胆、脾、大肠、小肠经,具有清热燥湿、泻                        公司,批号:20081227,纯度:99%);MTT试剂(美国Sig-
        火解毒等作用      [1-2] 。在我国,其主要分布于北部地区,河                ma公司);F-12K Nutrient Mixture(1×)培养基、胎牛血清
        北地区的“热河黄芩”为道地药材,品质最佳 。黄芩中                          (FBS)、青链霉素双抗混合液(美国 Gibco 公司);乙腈、
                                              [3]
        的主要活性成分是黄酮类成分,其中以黄芩苷、汉黄芩                           甲酸(美国Thermo Fisher Scientific公司)均为色谱纯,二
        苷、黄芩素和汉黄芩素这4种成分的含量较高                   [4-6] 。现代   甲基砜(DMSO)等其余试剂(北京化工厂)均为分析纯,
        研究表明,黄芩药材提取物及分离所得的黄酮类单体成                           水为自制超纯水。
        分均具有抗病毒活性         [7-11] ,且临床疗效确切   [12-14] 。已有研       8批黄芩药材均于2014年采集或收集,产地分别为
        究发现,不同产地黄芩提取物的抗病毒作用差异显著,                           内蒙古-1、陕西、山西、河北承德(黄芩道地产区)、甘肃、
        道地黄芩的抗病毒作用明显优于非道地药材                   [15-16] 。但尚  内蒙古-2、北京、山东等 8 个地区,依次编号为 S1~S8
        未有研究探索造成不同产地黄芩抗病毒药效差异的物                            (注:其中 2 批药材均购自内蒙古,但并非同时、同地购
        质基础以及道地药材质优的化学本质特征。为此,本研                           进,故将产地分为内蒙古-1和内蒙古-2以示区别),每批
        究通过建立体外感染呼吸道合胞病毒(RSV)的细胞模                          药材干质量约200 g。上述药材经中国中医科学院中药
        型,考察不同产地黄芩水提物及其黄酮类成分模拟样品                           研究所李化副研究员鉴定为唇形科植物黄芩(S. ba-
        的体外抗病毒活性,同时结合黄芩中4种主要黄酮类成                           icalensis Georgi)的干燥根。药材粉碎后,过 40 目筛,密
        分的含量及其构成特征,探讨不同比例构成的黄酮类成                           闭包装后保存于防潮柜中,备用。
        分对黄芩抗RSV活性的影响,为初步阐明黄芩抗病毒作                          1.3  细胞和病毒
        用的物质基础提供思路,为黄芩药材的质-效评价提供                               人喉癌细胞Hep-2由中国科学院上海生命科学研究
        参考。                                                院细胞资源中心提供;RSV购自美国典型菌种保藏中心
        1 材料                                               (ATCC)。
        1.1  仪器                                            2 方法与结果
            ACQUITY H-Class UPLC  TM  型 超 高 效 液 相 色 谱      2.1  不同产地黄芩中黄酮类成分的含量测定
                                                                                                  [5]
       (UPLC)仪(美国Waters公司);2004MBP6型半微量电子                      采用本课题组前期研究建立的UPLC法 测定黄芩
        天平(德国 Sartorius 公司);KQ-100DE 型控超声波清洗               中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量。
                                                                                                 [17]
        器(昆山市超声仪器有限公司);FW-80型高速万能粉碎                        2.1.1  黄芩水提物的制备          参考文献方法 并略作调
        机(天津市泰斯特仪器有限公司);ALPHR 2-4 LD Plus                  整,取黄芩药材粉末25 g,精密称定,依次加入10、8、8倍
        型冷冻干燥机(德国 Christ 公司);NU-425-400S 型生物               量水(mL/g,下同),煎煮3次,每次1 h;滤过,合并3次滤
        安全柜(美国Nuaire公司);EXL-808型酶联免疫检测仪                    液,经预冻后再冷冻干燥,得水提物冻干粉(得率为
       (美国 BioTek 仪器公司);MCO-15AC 型 CO2培养箱(日                35%~45%),置于-20 ℃冰箱保存,备用。
        本 Sanyo 公司);CKX-41 型倒置式生物显微镜(日本                    2.1.2  混合对照品溶液的制备            分别精密称取黄芩苷、
        Olympus 公司);Milli-Q 型超纯水制备仪(美国 Millipore           汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对照品各适量,加20%乙腈
        公司)。                                               水溶液溶解制成质量浓度分别为 64.8、31.0、28.0、2.72
        1.2  药品与试剂                                         μg/mL的混合对照品溶液。
            黄芩苷对照品(批号:15062716,纯度:>98%)、汉                  2.1.3  供试品溶液的制备          取“2.1.1”项下黄芩水提物
        黄芩苷对照品(批号:15080512,纯度:>98%)、黄芩素                    冻干粉 0.1 g,精密称定,置于具塞锥形瓶中,精密加入
        对照品(批号:15031608,纯度:>98%)、汉黄芩素对照                    70%乙醇 100 mL,称定质量,超声(功率:200 W,频率:


        中国药房    2020年第31卷第10期                                            China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 10  ·1167  ·
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