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含总黄酮的空白对照液。                                         品检测液及 S5 检测液,采用紫外分光光度计在 322 nm
        2.2.4  检测波长的确定         分别取“2.2.3”项下芦丁对照             波长处测定其吸光度,连续测定6次。结果,芦丁对照品
        品检测液、S5 检测液、S5′检测液和 S5″检测液,采用紫                      检测液及S5检测液吸光度的RSD分别为0.18%、0.33%
        外分光光度计在 200~700 nm 波长范围内进行扫描(先                     (n=6),表明该方法精密度较好。
        用空白对照液校正基线,下文同)。结果显示,各样品检                           2.2.7  重复性考察      取栀子和淡豆豉(2 ∶ 1)共15.0 g,共
        测液在波长为 322 nm 时均有吸收,因此将 322 nm 确定                   6份,按“2.2.2”“2.2.3”项下方法制备检测液,采用紫外分
        为本研究的检测波长。紫外扫描图见图4。                                 光光度计在 322 nm 波长处测定其吸光度并根据标准曲
            1.00
                                                            线计算芦丁含量。结果,检测液中芦丁含量为 1.574
            0.75                                            mg/mL,RSD为1.69%(n=6),表明本方法重复性较好。
          吸光度  0.50                                         2.2.8  稳定性考察       按“2.2.3”项下方法制备芦丁对照

            0.25                                            品检测液、S5 检测液,分别于室温下放置 0、10、15、30、
              0                                             45、60 min时,采用紫外分光光度计在 322 nm处测定其
              200     300     400    500     600     700
                                时间,min                      吸光度。结果显示,芦丁对照品检测液和 S5 检测液在
                            A.芦丁对照品稀释液
                                                            10 min内的吸光度较为稳定,从10 min后吸光度均开始
            2.000
                                                            下降。稳定性试验结果见表2。
            1.475
                                                                          表2 稳定性试验结果
          吸光度  0.950                                                  Tab 2 Results of stability tests
                                                                                       吸光度
                                                            时间,min
            0.425                                                           芦丁对照品检测液            S5检测液
                                                             0                 0.539             0.593
           -0.100
              200     300     400    500     600     700    10                 0.538             0.589
                                时间,min                      15                 0.530             0.572
                      B.栀子豉汤(栀子和淡豆豉质量比为2∶1)                 30                 0.520             0.551
            2.00
                                                            45                 0.491             0.527
                                                            60                 0.467             0.513
            1.50
          吸光度  1.00                                         2.2.9  加样回收率试验         称取栀子和淡豆豉(2 ∶ 1)适
                                                            量,共 9 份,分别按已知含量的 0.5、1、1.5 倍比例加入芦
            0.50                                            丁对照品,再按“2.2.2”“2.2.3”项下方法制备 S5 检测液,
              0                                             采用紫外分光光度计在 322 nm波长处测定其吸光度并
              200     300     400    500     600     700
                                时间,min                      根据标准曲线计算含量,进而计算加样回收率。结果,
                       C.淡豆豉单煎液(淡豆豉用量为5.0 g)
                                                            芦丁的平均加样回收率为 98.54%,RSD 为 1.25%(n=
            2.00
                                                            9),表明该方法的准确度较好。加样回收率试验结果见
            1.50                                            表3。
                                                                     总黄酮含量测定的加样回收率试验结果
          吸光度  1.00                                         Tab 3 表3 Results of recovery test of content determina-
            0.50                                                   tion of total flavonoids
                                                            样品编号 样品中含量,mg 加入量,mg 测得量,mg 加样回收率,% 平均加样回收率,% RSD,%
              0
              200     300     400    500     600     700    1      31.48   15.00  46.00  96.80
                                时间,min
                        D.栀子单煎液(栀子用量为10.0 g)                2      31.48   15.00  46.08  97.33
                                                            3      31.48   15.00  46.15  97.80
                         图4   紫外扫描图                         4      31.48   30.00  61.43  99.83
                   Fig 4 UV scanning spectrums              5      31.48   30.00  61.53  100.17  98.54  1.25
                                                            6      31.48   30.00  60.93  98.17
        2.2.5  线性关系考察        取“2.2.1”项下系列质量浓度的              7      31.48   45.00  75.65  98.16
        芦丁对照品溶液,分别置于不同 25 mL 量瓶中,同                          8      31.48   45.00  75.78  98.44
       “2.2.3”项下方法制备检测液。采用紫外分光光度计在                          9      31.48   45.00  76.54  100.13
        322 nm 波长处检测,记录吸光度。以芦丁质量浓度(c)                       2.2.10  样品中总黄酮含量的测定            取“2.2.3”项下各样
        为横坐标、吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线并进行回                           品检测液,分别用紫外分光光度计在322 nm波长处测定
                                             2
        归计算,回归方程为A=0.002 8c+0.000 2(R =0.999 7)。            其吸光度,根据标准曲线方程计算总黄酮含量。结果显
        结果表明,芦丁质量浓度在125~250 μg/mL范围内呈良                      示,当栀子与淡豆豉的比例为1∶1时,栀子豉汤中总黄酮
        好的线性关系。                                             含量最高(1.861 mg/mL);当栀子与淡豆豉的比例为1 ∶ 4
        2.2.6  精密度考察       按“2.2.3”项下方法制备芦丁对照               时,淡豆豉单煎液和栀子单煎液中总黄酮含量最高(分


        ·1106  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9                                  中国药房    2020年第31卷第9期
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