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物（如黄豆苷元、染料木素等）也具有较好的抗抑郁活                            离子对质荷比（m/z）：271.3→153.5 ；毛细管电压：1.5
                                                                                          [15]
        性 [7-9] 。                                           kV；离子源温度：150 ℃；雾化气温度：450 ℃；雾化气流
            中药配伍不但可产生促进、抵消或消弱疗效的作                           速：150 L/h；碰撞气流：0.20 mL/min。
        用，而且可降低、消除和产生毒副作用                [10-12] ，故掌握中药     2.1.3  对照品溶液的制备           取染料木素对照品 20.89
        方剂的配伍规律对于临床应用有重要意义。笔者前期                             mg，精密称定，置于10 mL量瓶中，加甲醇适量，超声（功
        在查阅历代中药度量衡演变考论及仲景方用药剂量的                             率：250 W，频率：40 kHz）溶解，甲醇定容，得到质量浓度
        考察文献后，推算出了栀子豉汤中栀子和淡豆豉的配伍                            为 2.09 mg/mL 的染料木素对照品母液。精密吸取上述
                  [13]
        比例为1 ∶ 4 （质量比，下同），但是在栀子豉汤抗抑郁的                       母液 5 µL，加甲醇定容至 1 mL，得到质量浓度为 10.45
        现代临床和实验研究中，应用到的栀子与淡豆豉的比例                            µg/mL的染料木素对照品稀释液。分别取该稀释液0.5、
                [5]
                      [14]
        多为 2 ∶ 1 、1 ∶ 1 和 1 ∶ 2 ，这说明古方记载与现代研究               1、3、10、50、100 µL，加甲醇定容至 1 mL，制成质量浓度
                             [4]
        中所应用的栀子豉汤比例有一定的出入。在前期研究                             分别为5.23、10.46、31.37、104.55、522.75、1 045.50 ng/mL
        中，笔者结合古今栀子豉汤应用的比例，考察了栀子和                            的系列染料木素对照品溶液。
        淡豆豉分别以 2 ∶ 1、1 ∶ 1、1 ∶ 2、1 ∶ 4 配伍后对栀子中抗抑            2.1.4  供试品溶液的制备 （1）栀子豉汤供试品溶液的
        郁活性成分总环烯醚萜苷和栀子苷含量的影响，并发现                            制备：分别按比例（2 ∶ 1、1 ∶ 1、1 ∶ 2、1 ∶ 4，栀子和淡豆豉质
        当栀子与淡豆豉的比例为1∶4时栀子豉汤中上述两种成                           量比，下同）取栀子和淡豆豉共 15.00 g 。先将栀子剪
                                                                                             [13]
        分含量均最高 。在本研究中，笔者将通过考察栀子与                            碎，加200 mL水，煎至水剩余约125 mL时，加淡豆豉（包
                     [13]
        淡豆豉在不同比例（2∶1、1∶1、1∶2、1∶4）配伍时对栀子豉                    煎），继续煎至水剩余约75 mL时，绢布过滤，收集滤液，
        汤中总黄酮和染料木素含量的影响，进一步探究栀子豉                            加水至 75 mL，然后以 12 000 r/min 离心 10 min，取上清
        汤的配伍规律，为其临床应用及后续研究中配伍比例的                            液，即得不同配比栀子豉汤供试品溶液，记为 S1～S4。
        选择提供依据。                                            （2）淡豆豉单煎供试品溶液的制备：分别按配伍比例取
        1 材料                                                淡豆豉5.0、7.5、10.0、12.0 g，各加入125 mL水，煎至水剩
        1.1  仪器                                             余为75 mL时，绢布过滤，收集滤液，加水至75 mL，然后
            Acquity 型超高效液相色谱仪、XEVO TQ-S 型三重                 以12 000 r/min离心10 min，取上清液，即得淡豆豉单煎
        串联四极杆质谱仪（美国Waters公司）；XS105型分析天                      供试品溶液，记为S1′～S4′。
        平（美国Mettler-Toledo公司）；TU-1810型紫外分光光度                2.1.5  线性关系考察        精密吸取“2.1.3”项下系列对照
        计（北京普析通用仪器有限责任公司）；TGL-16-aR型高                       品溶液各 5 μL，分别按“2.1.1”“2.1.2”项下条件进样测
        速离心机（上海安亭科学仪器厂）；KQ-250B型超声波清                        定，记录色谱图。以染料木素质量浓度（x）为横坐标、峰
        洗器（昆山市超声仪器有限公司）；TRW50211KT型超纯                       面积（y）为纵坐标绘制标准曲线并进行回归计算，得到
        水器（美国 Thermo Fisher Scientific公司）。                  染料木素的标准曲线回归方程为 y＝85.236x+428.26
                                                              2
        1.2  药品与试剂                                         （R ＝0.999 7）。结果表明，染料木素质量浓度在 5.23～
            栀 子 饮 片（批 号 ：170101）、淡 豆 豉 饮 片（批 号 ：            1 045.50 ng/mL范围内呈良好的线性关系。
        161001）均购自酒泉市培丰中药材生态种植加工有限公                         2.1.6  精密度试验      取供试品溶液S1，按“2.1.1”“2.1.2”
        司，经长春中医药大学药学院翁丽丽教授鉴定分别为茜                            项下条件下连续进样测定6次，记录色谱图。结果，染料
        草科植物栀子（Gardenia jasminoides Ellis.）的干燥成熟            木素峰面积的RSD为0.88％（n＝6），表明该方法精密度
        果实和豆科植物大豆[Glycine max（L.）Merr.]成熟种子                 良好。
        的发酵加工品；染料木素对照品（批号：111704-201703，                    2.1.7  重复性试验      称取栀子和淡豆豉（2 ∶ 1）共15.0 g，
        纯度：99.5％）、芦丁对照品（批号：100080-201610，纯度：                共 6 份，按“2.1.4（1）”项下方法制备供试品溶液，再按
        91.9％）均购自中国食品药品检定研究院；甲醇、乙腈和                        “2.1.1”“2.1.2”项下条件下进样测定，记录色谱图，并根
        甲酸为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。                             据标准曲线计算含量。结果，染料木素的平均含量为
        2 方法与结果                                             0.027 µg/mL，RSD 为 1.32％（n＝6），表明该方法重复性
        2.1 栀子豉汤中染料木素含量的测定                                  良好。
        2.1.1  色谱条件       色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18          2.1.8  稳定性试验      取供试品溶液 S1 和“2.1.3”项下染
        （50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流动相：0.01％甲酸乙腈溶液               料木素对照品稀释液，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、
        （A）-0.01％甲酸水溶液（B），梯度洗脱（0～2.2 min，                   24 h 时，按“2.1.1”“2.1.2”项下条件下进样测定，记录色
        10％A→100％ A；2.2～2.5 min，100％ A；2.5～2.6 min，         谱图。结果，供试品溶液 S1、染料木素对照品稀释液中
        100％A→10％ A；2.6～3.0 min，10％ A）；柱温：40 ℃；流            染料木素峰面积的 RSD 分别为 1.71％、1.23％（n＝6），
        速：0.4 mL/min；进样量：8 µL。                              表明两种溶液在室温下放置24 h内稳定性均良好。
        2.1.2  质谱条件     离子源：电喷雾离子源（ESI）；检测模                 2.1.9  加样回收率试验         称取栀子和淡豆豉（2 ∶ 1）适
        式：正离子电离；质谱扫描方式：多反应监测（MRM）；选择                        量，共 9 份，分别按已知含量的 0.5、1、1.5 倍比例加入染


        ·1104  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9                                  中国药房    2020年第31卷第9期
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