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料木素对照品，再按“2.1.4（1）”项下方法制备栀子豉汤 100
供试品溶液，然后按“2.1.1”“2.1.2”项下条件进样测定， ％
记录色谱图，并根据标准曲线计算含量进而计算加样回 相对强度，
收率。结果，染料木素的平均加样回收率为 99.78％，
RSD为1.81％（n＝9），表明本方法准确度较好。加样回 0 60 100 140 180 220 260 300 340 380 420
收率试验结果见表1。 m/z
表1 染料木素含量测定的加样回收率试验结果 图2 染料木素的二级质谱图
Tab 1 Results of recovery test of content determina- Fig 2 MS/MS spectra of genistein
tion of genistein 0.45
0.40
样品编号 样品中含量，μg 加入量，μg 测得量，μg 加样回收率，％ 平均加样回收率，％ RSD，％ 0.35
1 0.270 0.125 0.393 98.40 μ 0.30 淡豆豉单煎液
2 0.270 0.125 0.397 101.60 染料木素含量，g/mL 0.25 栀子豉汤
3 0.270 0.125 0.397 101.60 0.20
0.15
4 0.270 0.261 0.538 102.68 0.10
5 0.270 0.261 0.528 98.85 99.78 1.81 0.05
6 0.270 0.261 0.529 99.23 0 2∶1 1∶1 1∶2 1∶4
7 0.270 0.366 0.627 97.54 栀子和淡豆豉质量比
8 0.270 0.366 0.629 98.09 图3 栀子豉汤、淡豆豉单煎液中染料木素含量的变化
9 0.270 0.366 0.636 100.00
Fig 3 Change of genistein content in Zhizichi decoc-
2.1.10 染料木素含量的测定 精密吸取“2.1.3”项下染
tion and femented soybean single decoction
料木素对照品稀释液、“2.1.4”项下供试品溶液 S1～S4
和 S1′～S4′，分别按“2.1.1”“2.1.2”项下条件下进样测 密称定，加甲醇溶解并定容至 50 mL，得质量浓度为
定，记录色谱图，根据标准曲线计算各溶液中染料木素 300.00 μg/mL 的芦丁对照品母液。取该母液 18.3 mL，
的含量。结果显示，栀子和淡豆豉不同比例配伍栀子豉 加甲醇定容至25 mL量瓶中，得质量浓度为219.60 μg/mL
汤中染料木素的含量均低于淡豆豉单煎液；随着淡豆豉 的芦丁对照品稀释液。另分别吸取上述母液1.25、1.50、
用量的增加，栀子豉汤中染料木素含量呈现出先升高后 1.75、2.00、2.25、2.50 mL，加甲醇定容至 3 mL，得质量浓
降低的趋势，当栀子与淡豆豉的配伍比例为1 ∶ 1、1 ∶ 2时 度分别为125、150、175、200、225、250 μg/mL的系列芦丁
栀子豉汤中染料木素含量最高。不同溶液的MRM图见 对照品溶液。
图1，染料木素的二级质谱图见图2，栀子豉汤、淡豆豉单 2.2.2 供试品溶液的制备 （1）不同配比栀子豉汤供试
煎液中染料木素含量的变化趋势见图3。 品溶液：按“2.1.4（1）”项下方法制备 75 mL 栀子和淡豆
豉不同配比的栀子豉汤；分别取该煎液10 mL，蒸干，再
100
％ 用甲醇溶解并定容至25 mL量瓶中，得栀子和淡豆豉不
相对强度， 同配比的栀子豉汤供试品溶液，记为S5～S8。（2）淡豆豉

0 单煎供试品溶液：按“2.1.4（2）”方法称取淡豆豉适量并
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8
时间，min 制备 75 mL 淡豆豉单煎液；分别取该煎液 10、20、10、10
A.染料木素对照品稀释液 mL，蒸干，用甲醇溶解并定容至25 mL量瓶中，即得淡豆
100 豉单煎供试品溶液，记为S5′～S8′。（3）栀子单煎供试品
％
相对强度， 溶液：按栀子豉汤中栀子比例分别取栀子10、7.5、5、3 g，
分别加入 200 mL 水煎煮，煎至水剩余 75 mL 时，绢布过
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 滤，收集滤液，加水稀释至75 mL，即得栀子单煎液；分别
时间，min
B.栀子豉汤（栀子和淡豆豉的质量比为2∶1） 取该煎液 10 mL，蒸干，甲醇溶解并定容至 25 mL 量瓶
100 中，即得栀子单煎供试品溶液，记为S5″～S8″。
％ 2.2.3 检测液和空白对照液的制备 取“2.2.1”项下芦
相对强度， 丁对照品稀释液 3 mL，“2.2.2”项下溶液 S5～S8 各 0.9、

0 1.0、1.1、1.5 mL，溶液S5′～S8′各3 mL，溶液S5″～S8″各
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8
时间，min 500 μL，分别置于不同 25 mL 量瓶中，先加甲醇补足 3
C.淡豆豉单煎液（淡豆豉用量为5.0 g）
mL 后，加 5％NaNO2溶液 1 mL，摇匀，静置 6 min；再加
图1 MRM图 10％ Al（NO3 ） 3溶液1 mL，摇匀，继续静置6 min；最后加
Fig 1 MRM chromatograms NaOH 溶液 5 mL，然后用水稀释至刻度，摇匀，静置 15
2.2 栀子豉汤中总黄酮的含量测定 min，即得到各溶液的相应检测液 。另在25 mL量瓶中
[16]
2.2.1 对照品溶液的制备 取芦丁对照品15.00 mg，精 加3 mL甲醇，按相同方法加入相应试剂并显色，制备不

中国药房 2020年第31卷第9期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9 ·1105 ·