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－3
7.192×10 CE+0.051DE－0.076A －0.096B －0.073C － 0.65 1.00
0.052D －0.086E 。对其进行方差分析，结果见表4。 mg/g 0.55 g/mL 0.50
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表4 方差分析结果 柠檬酚含量， 0.45 固液比， 0
0.35
Tab 4 Results of variance analysis 1.00 0.50 1.00 －0.50
0
－0.50 －0.50 0 0.50 －1.00
－1.00 －1.00
方差来源 平方和 自由度 F P 固液比， g/mL 乙醇体积分数， ％ －1.00 －0.05 0 0.05 1.00
模型 0.196 6 20 25.642 0 ＜0.000 1 乙醇体积分数，％
A 0.000 2 1 0.430 3 0.517 8 A.乙醇体积分数与固液比的交互作用
B 0.003 8 1 9.661 4 0.004 6 1.00
0.65
C 0.001 8 1 4.565 7 0.042 6 mg/g 0.55 min 0.50
D 0.002 7 1 7.165 3 0.012 9 0.45
E 0.005 7 1 14.790 8 0.000 7 柠檬酚含量， 0.35 超声时间， 0
AB 0.008 3 1 21.560 6 ＜0.000 1 1.00 0.50 0.50 1.00 －0.50
0
0
AC 0.000 9 1 2.472 1 0.128 5 －0.50 －0.50 －1.00
乙醇体积分数， ％
－1.00－1.00
AD 0.009 0 1 23.558 9 ＜0.000 1 超声时间， min －1.00 －0.05 0 0.05 1.00
乙醇体积分数，％
AE 0.001 3 1 3.503 4 0.073 0 B.乙醇体积分数与超声时间的交互作用
BC 8.910 0×10 －5 1 0.232 4 0.633 9
BD 0.000 1 1 0.273 9 0.605 3 0.65 1.00
BE 0.015 9 1 41.575 4 ＜0.000 1 mg/g 0.55 ℃ 0.50
CD 3.234 0×10 －5 1 0.084 4 0.773 9 0.45 0
CE 0.000 2 1 0.539 7 0.469 4 柠檬酚含量， 0.35 超声温度，
DE 0.010 6 1 27.641 6 ＜0.000 1 1.00 0.50 0 0.50 1.00 －0.50
0
固液比， g/mL
A 2 0.050 8 1 132.643 5 ＜0.000 1 －0.50 －0.50 －1.00
－1.00－1.00
B 2 0.080 6 1 210.385 6 ＜0.000 1 超声温度， ℃ －1.00 －0.05 0 0.05 1.00
固液比，g/mL
C 2 0.046 7 1 121.732 6 ＜0.000 1 C.固液比与超声温度的交互作用
D 2 0.023 7 1 61.948 9 ＜0.000 1 1.00
E 2 0.064 8 1 168.937 6 ＜0.000 1 0.65
残差 0.009 6 25 mg/g 0.55 ℃ 0.50
失拟项 0.009 6 20 柠檬酚含量， 0.45 超声温度， 0
误差项 0 5 0.35 1.00 －0.50
1.00
由表 4 中模型的 P 值（＜0.000 1）可知，该模型的拟 0.50 0 0 0.50
－0.50 －0.50 －1.00
－1.00－1.00 超声时间， min －1.00 －0.05 0 0.05 1.00
合程度良好；柠檬酚含量与各试验因素之间的线性关系
超声温度， ℃
超声时间，min
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显 著（R ＝0.953 5），校 正 系 数（R Adj ）为 0.916 3，提 示 D.超声时间与超声温度的交互作用
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91.63％的柠檬酚含量变化可用该模型解释，因此可用该 图4 A与B、A与D、B与E、D与E交互作用对柠檬酚含
模型分析和预测柠檬酚含量。由 F 值可知，5 个因素对 量影响的响应面图和等高线图
柠檬酚含量的影响大小为：E（超声温度）＞B（固液比）＞ Fig 4 Response surface and contour plots of the inter-
D（超声时间）＞C（硫酸铵加入量）＞A（乙醇体积分数）； action of A and B，A and D，B and E，D and E
由各一次项对应的 P 值可知，除 A 外，其余因素均对柠 on the content of citrusinol
檬酚含量具有显著影响（P＜0.05）；由各二次项对应的P 0.638 4、0.625 4 mg/g，平均含量为 0.633 9 mg/g（RSD＝
值可知，5 个因素均对柠檬酚含量具有显著影响（P＜ 1.15％，n＝3），与预测值 0.630 5 mg/g 相近（实测值与预
0.000 1）；在交互相中，A与B、A与D、B与E、D与E之间 测值的RSD为1.16％，n＝3）。
具有显著的交互作用（P＜0.01）。 3 讨论
为进一步评价 A 与 B、A 与 D、B 与 E、D 与 E 之间交 黄酮类化合物在植物体内主要以糖苷形式存在，游
互作用对柠檬酚含量的影响并确定各因素的最佳水平 离的较少，现多采用回流或者超声法进行提取 [10-11，17] 。
范围，本研究采用 Design-Expert 8.0.6 软件绘制响应面 双水相提取由于具有操作简便、分相快等优点，故在中
图和等高线图，结果见图4。由图4可见，上述交互因素 药成分提取分离中的应用日益广泛 。双水相体系含
[12]
的响应面形状均较陡，等高线均呈明显的椭圆形，说明各 水量较高，与植物体内的生理环境相似；反应条件温和，
交互作用均较为明显。求解二次多元回归方程，得柠檬 不容易造成活性成分发生改变；再辅以超声、微波等手
酚最优提取工艺为乙醇体积分数95.35％，固液比1∶50.35 段，可进一步改善提取的效果 。乙醇-硫酸铵系统是常
[18]
（g/mL），硫酸铵加入量 4.49 g，超声时间 48.7 min，超声 见的双水相体系之一，其分离原理为：无机盐在溶液中
温度57.6 ℃；预测柠檬酸含量为0.630 5 mg/g。 可电离出正、负离子，两种离子在两相间的分配系数不
2.5 验证试验 同，故而形成电位差，当被提取物进入双水相体系后，由
精密称取小槐花粗提物 0.2 g，按“2.4”项下最优工 于其中所含化合物表面性质、电荷作用和分子间作用力
艺平行操作 3 次，所得柠檬酚的含量分别为 0.637 8、 的差异，导致其在提取过程中的化学平衡发生了变化，

中国药房 2020年第31卷第9期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9 ·1089 ·