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最终使得目标成分转移至乙醇相,从而增加了目标成分                            [ 4 ]  卢文杰,陆国寿,谭晓,等.壮瑶药小槐花化学成分研究
        的溶出速度和效率         [19-20] 。有研究指出,影响双水相成相                  [J].中药材,2013,36(12):1953-1956.
        的因素很多,如温度、pH值、双水相物质组成及含量等;                          [ 5 ]  刘瑛,陆国寿,卢文杰,等.柠檬酚对人肝癌 HepG2 细胞
        同时,目标成分的结构差异也是能否形成双水相及各成                                 增殖的影响[J].天然产物开发与研究,2017,29(1):
        分在两相中分布的关键因素 。因此,对双水相提取条                                 135-140.
                                 [21]
                                                            [ 6 ]  陆国寿,叶勇,卢文杰,等.壮、瑶药小槐花中异柠檬酚的
        件进行优化可准确预测体系中的分配规律,从而有效指
                                                                 分离鉴定及含量测定研究[J].天然产物开发与研究,
        导该技术的应用。基于此,本研究以柠檬酚含量为指
                                                                 2014,26(9):1450-1453.
        标,在单因素试验的基础上,采用 Box-Behnken 设计-响
                                                            [ 7 ]  陆国寿,谭晓,陈家源,等.小槐花中的脂溶性成分分析
        应面法对超声辅助乙醇-硫酸铵双水相提取小槐花中柠
                                                                 [J].广西科学,2012,19(4):355-357.
        檬酚的工艺进行了优化。                                         [ 8 ]  李燕婧,钟正贤,卢文杰.小槐花水提物药理作用研究[J].
            在前期预试验中,本课题组对柠檬酚的定量分析条                               中医药导报,2013,19(4):76-78.
        件进行了筛选,包括流动相(乙腈-0.1%磷酸水溶液、甲                         [ 9 ]  李燕婧,钟正贤,卢文杰.小槐花醇提物药理作用研究[J].
        醇-0.1%磷酸水溶液、甲醇-0.05%磷酸水溶液)、流速                            云南中医中药杂志,2013,34(5):64-65.
        (1.0、0.8、0.6 mL/min)、柱温(20、25、30 ℃)等。综合考            [10]  李晓斌,陈振斌,杨旸,等.响应面分析法优化槐叶中黄酮
        虑色谱响应以及色谱峰峰形、分离度等因素,最终确定                                 类化合物的提取工艺[J].中国药房,2015,26(7):960-
        了“2.2.1”项的色谱条件。                                          964.
                                     [13]
            本研究进一步参考已有文献 ,对超声辅助乙醇-硫                         [11]  罗旭东,李成义,李俊岳,等.当归叶总黄酮提取工艺优化
        酸铵双水相提取工艺的乙醇体积分数、固液比、硫酸铵                                 [J].辽宁中医杂志,2018,45(7):1456-1459.
        加入量、超声温度、超声时间等 5 个因素进行单因素试                          [12]  刘磊磊,李秀娜,赵帅.双水相萃取在中药活性成分提取
                                                                 分离中的应用进展[J].中草药,2015,46(5):766-773.
        验;在此基础上,采用 Box-Behnken 设计-响应面法对提
                                                            [13]  何自强,张惠玲,苏天明.响应面法优化超声波辅助乙
        取工艺进行优化。结果,由回归模型预测超声辅助乙
                                                                 醇-K2HPO4双水相提取红景天苷[J].天然产物研究与开
        醇-硫酸铵双水相提取柠檬酚的最佳条件为乙醇体积分
                                                                 发,2018,30(7):1257-1265.
        数95.35%,固液比1∶50.35(g/mL),硫酸铵加入量4.49 g,
                                                            [14]  宋力飞,刘常青,李曼莎,等.星点设计-响应面法优化黄
        超声时间 48.7 min,超声温度 57.6 ℃;柠檬酚预测含量
                                                                 芪双水相萃取工艺[J].中成药,2017,39(1):71-75.
        为0.630 5 mg/g。经过3次验证试验,得柠檬酚的平均含                     [15]  张琳,周欣,赵凤平,等.乙醇-硫酸铵双水相提取陈皮黄
        量为 0.633 9 mg/g,与预测值相近。柠檬酚为一种 A 环                        酮工艺的优化[J].中成药,2018,40(7):1510-1514.
        并吡喃环黄酮类化合物,回流或超声提取所得产物的含                            [16]  赵立辉,武文洁,杨昱涵.双水相系统纯化山楂叶黄酮类
        量较低 ,而本研究优化的超声辅助乙醇-硫酸铵双水相                                物质的研究[J].天然产物研究与开发,2009,21(5):
              [17]
        提取工艺可大大提高小槐花提取物中该化合物的含量。                                 849-853.
            综上所述,本研究优化所得的小槐花中柠檬酚的超                          [17]  邢东旭,廖森泰,李庆荣,等.僵蚕总黄酮超声提取工艺的
        声辅助乙醇-硫酸铵双水相提取工艺稳定、可行。中药                                 优化[J].中成药,2017,39(8):1727-1730.
        成分复杂,传统分离手段步骤繁多且耗时长,双水相作                            [18]  朱红菊,丁玉,贾亚伟,等. 桔皮中橙皮苷的新型双水相
        为一种绿色环保的新型分离技术,可简化样品前处理过                                 萃取[J].食品与生物技术学报,2013,32(9):995-1001.
                                                            [19]  肖星辉,张向前,李桂芳,等.双水相萃取荒漠肉苁蓉总黄
        程,易于放大生产且可连续化操作,有助于单体化合物
                                                                 酮及其抗氧化活性[J].食品研究与开发,2017,38(16):
        的分离    [12-15] 。但该法在应用时也存在一些不足,如分离
                                                                 5-9.
        选择性偏低、易乳化、相分离时间较长等,后续可结合联
                                                            [20]  陈丽娟,柳福智,岳强兵.正交试验法优化微波协同双水
        用高速逆流色谱、电泳等技术               [22]  来进一步提高提取
                                                                 相提取甘草中总黄酮的工艺[J].中国药房,2016,27(4):
        效率。                                                      525-528.
        参考文献                                                [21]  刘绍鹏,宗志敏,魏晴,等.双水相体系中成相及有机物分
        [ 1 ]  广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准:第 1 册[S].                      配机理的初步研究[J].化工时刊,2010,24(12):21-24.
             1990年版.南宁:广西科学技术出版社,1990:24.                   [22]  李挺,曹学丽,董银卯.双水相体系逆流色谱技术在蛋白
        [ 2 ]  广西壮族自治区食品药品监督管理局.广西壮族自治区                          质分离中的应用[J].中国生物工程杂志,2006,26(2):
             壮药质量标准:第 1 卷[S].南宁:广西科学技术出版社,                       83-88.
             2008:49.                                                    (收稿日期:2019-08-07  修回日期:2020-02-07)
        [ 3 ]  覃迅云,罗金裕,高志刚.中国瑶药学[M].北京:民族出版                                                      (编辑:张元媛)
             社,2002:934.




        ·1090  ·  China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9                                  中国药房    2020年第31卷第9期
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