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20 表4 加样回收率试验结果（n＝6）
mAU 10 0 Tab 4 Results of recovery tests（n＝6）
－10
0 10 20 30
t，min 取样量，g 已知样品含量，μg 加入量，μg 测得量，μg 回收率，％ 平均回收率，％ RSD，％
A.空白对照溶液 0.101 1 228.50 250.00 477.71 99.68
0.098 2 221.97 250.00 481.21 103.70
20
mAU 10 0 山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷 0.102 5 231.66 250.00 489.10 102.98 104.18 2.74
107.72
502.54
250.00
0.103 2
233.24
－10
0 10 20 30 0.099 3 224.52 250.00 491.15 106.65
t，min 0.098 8 223.21 250.00 484.13 104.37
B.对照品溶液
溶液，然后按“2.4.3”项下色谱方法进样测定，记录峰面
50
40
30 积并根据回归方程计算山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷的含
mAU 20 山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷 量。每批样品平行测定2次，取平均值。结果，各批样品
10
0 （S1～S10）中山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷的含量分别为
－10
0 10 20 30
t，min 2 260.32、1 965.76、677.46、1 887.83、1 729.07、5 384.53、
C.供试品溶液 627.12、942.75、4 773.06、2 093.17 mg/kg；最 高 含 量
图2 高效液相色谱图 （5 384.53 mg/kg）与最低含量（657.12 mg/kg）间相差了
Fig 2 HPLC chromatograms 8.19倍，可见不同批次样品中山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷含
液0.05、0.25、1、2.5、5、10 mL，分别置于不同10 mL量瓶 量差异较大。
中，用乙醇定容至刻度，摇匀，分别按“2.4.3”项下色谱条 2.5 木贼水溶性成分指纹图谱的研究
件进样测定，记录色谱图。以山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷质 2.5.1 精密度试验 取木贼样品粉末（编号：S1）约 0.2
量浓度（x）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回 g，精密称定，按“2.4.1”项下方法制备供试品溶液，然后
归，得到回归方程为y＝8.556x+3.210（R ＝0.999 5）。结 按“2.4.3”项下色谱条件连续进样 6 次，记录峰面积。以
2
果表明，山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷质量浓度在 1～200 山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷为参照峰，计算得各共有峰相对
μg/mL范围内线性关系良好。 保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝6），表明
2.4.5 精密度试验 取山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷对照品 方法精密度较好。
溶液（20 μg/mL），按“2.4.3”项下色谱条件连续进样6次， 2.5.2 稳定性试验 取木贼样品粉末（编号：S1）约 0.2
记录峰面积。结果，山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷峰面积的 g，精密称定，按“2.4.1”项下方法制备供试品溶液后，于
RSD为0.59％（n＝6），表明仪器精密度良好。 室温下放置 0、4、8、12、24 h 时，分别按“2.4.3”项下色谱
2.4.6 稳定性试验 取木贼样品粉末（编号：S1）约 0.2 条件进样测定，记录峰面积。以山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷
g，精密称定，按“2.4.1”项下方法制备供试品溶液后，分 为参照峰，计算得各共有峰相对保留时间和相对峰面积
别在室温下放置 0、4、8、12、24 h 时，按“2.4.3”项下色谱 的 RSD 均小于 3％（n＝5），表明样品在室温条件下放置
条件进样测定，记录峰面积。结果，山柰酚-3-O-β-D-槐 24 h内稳定。
糖苷峰面积的RSD为0.98％（n＝5），表明样品溶液在室 2.5.3 重复性试验 取木贼样品粉末（编号：S1）6份，每
温下放置24 h内稳定。 份约 0.2 g，精密称定，按“2.4.1”项下的方法制备供试品
2.4.7 重复性试验 取木贼样品粉末（编号：S1）6份，每 溶液，然后按“2.4.3”项下色谱条件进样测定。以山柰
份约 0.2 g，精密称定，按“2.4.1”项下方法制备供试品溶 酚-3-O-β-D-槐糖苷为参照峰，计算得各共有峰相对保留
液，然后按“2.4.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并 时间和相对峰面积的 RSD 均小于 3％（n＝6），表明方法
按回归方程计算山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷的含量。结果， 重复性良好。
山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷的平均含量为 2 260.11 mg/kg， 2.5.4 木贼水溶性成分指纹图谱的建立及分析 分别
RSD为1.64％（n＝6），表明本方法的重复性良好。 取 10 批木贼样品粉末，各约 0.2 g，精密称定，分别按
2.4.8 加样回收率试验 取已知含量的木贼样品粉末 “2.4.1”项下方法制备供试品溶液，然后按“2.4.3”项下色
（编号：S1）6份，每份约0.1 g，精密称定，每份中精密加入 谱条件进样测定，记录色谱图。将得到的色谱数据导入
与样品中含量等量的山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷对照品，按 《中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件》（2012A 版）
“2.4.1”项下方法制备供试品溶液，然后按“2.4.3”项下色 中，以编号为S2的样品图谱为参照指纹图谱，设置时间
谱条件进样测定，记录峰面积并计算其回收率。结果， 窗宽度为 0.2 min，采用多点校正法进行色谱峰匹配，并
山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷的平均回收率为104.18％，RSD 采用中位数法生成对照指纹图谱（R）。结果，共标出 4
为2.74％（n＝6），表明方法准确度良好，详见表4。 个共有峰，经与对照品图谱比对（见图 1B），确认了 4 号
2.4.9 样品含量测定 取不同批次的木贼样品粉末各 峰为山柰酚-3-O-β-D-槐糖苷。以生成的对照指纹图谱
约 0.2 g，精密称定，分别按“2.4.1”项下条件制备供试品 为参照进行整体相似度评价，发现10批样品的相似度均

中国药房 2020年第31卷第9期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9 ·1083 ·