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2.3.6 线性关系考察 精密量取“2.3.1”项下混合对照 表4 加样回收率试验结果（n＝6）
品溶液 0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、10 mL，分别置于 10 Tab 4 Results of recovery tests（n＝6）
mL 量瓶中，加 30％甲醇稀释至刻度，摇匀，得系列混合 称样量， 已知含量， 加入量， 测得量， 加样回收 平均加样回 RSD，
待测成分
对照品溶液，按“2.3.4”项下色谱条件进样测定，以质量 g mg mg mg 率，％ 收率，％ ％
新绿原酸 0.100 6 0.110 6 0.093 0 0.205 4 101.94 103.30 2.33
浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性 0.100 6 0.110 6 0.093 0 0.203 4 99.78
回归，结果见表3。 0.100 7 0.110 7 0.093 0 0.205 7 102.15
0.100 8 0.110 8 0.093 0 0.208 7 105.27
表3 回归方程与线性范围
0.100 4 0.110 3 0.093 0 0.207 5 104.52
Tab 3 Regression equation and linear range 0.100 1 0.110 0 0.093 0 0.208 7 106.13
待测成分 回归方程 r 线性范围，μg/mL 绿原酸 0.100 6 0.270 3 0.205 0 0.471 2 98.00 99.02 2.72
4
新绿原酸 y＝2.017 6×10 x+5.147 2×10 3 0.999 9 2.325～93 0.100 6 0.270 3 0.205 0 0.465 2 95.07
绿原酸 y＝2.221 4×10 x+9.601 0×10 3 0.999 9 5.125～205 0.100 7 0.270 6 0.205 0 0.475 7 100.05
4
荭草苷 y＝2.264 4×10 x+2.566 3×10 3 0.999 3 1.150～46 0.100 8 0.270 8 0.205 0 0.473 4 98.83
4
4
异荭草苷 y＝2.759 7×10 x+1.905 2×10 3 0.999 9 2.625～105 0.100 4 0.269 8 0.205 0 0.472 4 98.83
异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷 y＝1.628 9×10 x+3.732 4×10 3 0.999 9 4.725～189 0.100 1 0.269 0 0.205 0 0.480 8 103.32
4
荭草苷 0.100 6 0.087 7 0.046 0 0.133 7 100.00 100.69 2.98
2.3.7 精密度试验 取“2.3.1”项下混合对照品溶液1.0 0.100 6 0.087 7 0.046 0 0.134 9 102.61
mL，置于10 mL量瓶中，加30％甲醇稀释至刻度，摇匀， 0.100 7 0.087 8 0.046 0 0.132 5 97.17
0.100 8 0.087 9 0.046 0 0.136 4 105.43
按“2.3.4”项下色谱条件连续测定 6 次，记录峰面积。结
0.100 4 0.087 5 0.046 0 0.132 7 98.26
果，新绿原酸、绿原酸、荭草苷、异荭草苷、异荭草苷-2′- 0.100 1 0.087 3 0.046 0 0.133 6 100.65
O- 鼠 李 糖 苷 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 2.27％ 、0.39％ 、 异荭草苷 0.100 6 0.154 0 0.105 0 0.258 6 99.62 98.40 2.46
0.100 6 0.154 0 0.105 0 0.254 3 95.52
0.42％、0.59％、0.35％（n＝6），表明仪器精密度良好。 0.100 7 0.154 2 0.105 0 0.259 4 100.19
2.3.8 稳定性试验 取“2.3.2”项下供试品溶液（批号： 0.100 8 0.154 3 0.105 0 0.254 7 95.62
0.100 4 0.153 7 0.105 0 0.256 7 98.09
20170726）适量，分别于室温下放置0、2、4、6、8、12 h时，
0.100 1 0.153 3 0.105 0 0.259 7 101.33
按“2.3.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果， 异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷 0.100 6 0.279 2 0.189 0 0.469 0 100.42 102.02 2.34
新绿原酸、绿原酸、荭草苷、异荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠 0.100 6 0.279 2 0.189 0 0.467 1 99.42
0.100 7 0.279 4 0.189 0 0.476 6 104.34
李糖苷峰面积的 RSD 分别为 2.99％、0.31％、0.91％、 0.100 8 0.279 7 0.189 0 0.479 2 105.56
0.26％、0.27％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置 0.100 4 0.278 6 0.189 0 0.469 9 101.22
0.100 1 0.277 8 0.189 0 0.469 0 101.16
12 h内稳定性良好。
2.3.9 重复性试验 精密称取样品（批号：20170726）约 对校正因子） [11-12] 。按上述公式计算内参物异荭草苷与
0.2 g，共 6 份，按“2.3.2”项下方法制备供试品溶液，按 其余成分的相对校正因子，再通过校正因子计算含量。
“2.3.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按 ESM Cm＝Am/（ak ·fm/k ）（式中，Cm为其余成分质量浓度，Am为其
法计算样品中 5 种成分的含量。结果，新绿原酸、绿原 余成分峰面积，ak为内参物异荭草苷标准曲线斜率，fm/k
酸、荭草苷、异荭草苷、异荭草苷-2′-O-鼠李糖苷的平均 为相对校正因子）；fm/k＝am （式中，am为其余成分标准曲线
含量分别为 1.073、2.628、0.830、1.397、2.118 mg/g，RSD 斜率）。
分别为 1.45％、2.59％、2.65％、2.77％、2.63％（n＝6），表 2.3.12 相对校正因子的计算 以异荭草苷为内参物，
明方法重复性良好。 按“2.3.11”项下公式计算新绿原酸、绿原酸、荭草苷、异
2.3.10 加样回收率试验 取已知含量的样品（批号： 荭草苷-2′-O-鼠李糖苷对内参物异荭草苷的相对校正因
20170726）约 0.1 g，共 6 份，分别精密加入“2.3.1”项下混 子。结果，上述 4 种成分的相对校正因子分别为 0.731、
合对照品溶液 1 mL，按“2.3.2”项下方法制备供试品溶 0.805、0.821、0.590。
液，再按“2.3.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并 2.1.13 QAMS 法与 ESM 法测定结果比较 取 3 批样
计算加样回收率，结果见表4。 品，分别按QAMS法、ESM法测定其中5种成分的含量，
2.3.11 QAMS设计与内参物的选择 选择含量相对较 采用 SPSS 20.0 软件以 Pearson 相关系数评价两种方法
高且对照品较易得到的活性成分异荭草苷为内参物，根 测得结果的相关性，P＜0.05 为差异有统计学意义。结
据标准曲线斜率的比值计算相对校正因子 [11-12] ，并通过 果，QAMS法与ESM法的测定结果呈正相关，结果组间
线性回归拟合排除偏差，建立同时测定样品中5种成分 比较差异无统计学意义（P＞0.05），提示所建的 QAMS
含量的QAMS法。在一定线性范围内，成分的质量或浓 法结果准确、可靠，可用于配方颗粒中5种有效成分的含
度（W）与检测器响应值（A）成正比，即 W＝f·A（f 表示相 量测定，详见表5。

中国药房 2020年第31卷第8期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 8 ·943 ·