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80 2.3 大孔吸附树脂类型的筛选
70
60 芦丁 2.3.1 静态吸附与解吸试验 参照文献方法 [15-16] 对6种
50
mAU 40 大孔吸附树脂（HPD100、HPD300、HPD450、AB-8、X-5、
30
20
10 D101）进行预处理，并采用静态吸附与解吸法 [17-18] 筛选
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 纯化草果总黄酮的最佳树脂类型。
时间，min
A.芦丁对照品稀释溶液 精密称取6种经预处理的大孔吸附树脂各1.0 g，平
350 行3份，分别置于50 mL具塞磨口三角瓶中，然后分别加
300
250 入草果总黄酮水溶液（“2.1”项下所得粗品用水稀释而
mAU 200 得，按“2.2”项下方法测得质量浓度为0.463 6 mg/mL；下
150
100
50 芦丁 同）20 mL，于25 ℃恒温振荡器中振摇吸附24 h，充分吸
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 附后，抽滤，将滤液蒸干后用甲醇定容至10 mL，即得吸
时间，min 附液。取上述吸附已达饱和并经洗净、滤干的树脂，加
B.供试品溶液
400 入 75％乙醇 20 mL，于 25 ℃恒温振荡器中振摇解吸 24
300 h，充分解吸后，抽滤，将滤液蒸干后用甲醇定容至 10
mAU 200 mL，即得解吸液。分别吸取上述吸附液和解吸液各 1.0
100
mL，经 0.45 μm 微孔滤膜滤过后，取续滤液适量，按
0
“2.2.4”项下色谱条件进样分析，再按“2.2.12”项下方法
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
时间，min 计算各溶液中总黄酮的含量，并根据公式①～④计算 6
C.阴性对照溶液
图1 高效液相色谱图 种大孔吸附树脂对草果总黄酮的比吸附量、吸附率以及
比解吸量、解吸率：
Fig 1 HPLC chromatograms
比吸附量＝（c0V0－c1V1 ）/m … … … … … … … … … ①
0.112 mg/mL 的芦丁对照品标准溶液适量，按“2.2.4”项
吸附率＝[（c0V0－c1V1 ）/c0V0]×100％ … … … … … ②
下色谱条件连续测定6次，记录峰面积。结果，芦丁峰面
比解吸量＝c2V2/m … … … … … … … … … … … … ③
积的RSD为1.85％（n＝6），表明仪器精密度良好。
解吸率＝[c2V2/（c0V0－c1V1 ）]×100％ … … … … … ④
2.2.9 重复性试验 取草果总黄酮粗品粉末，共6份，按
式中，m 为树脂质量（g），c0为上样液中总黄酮的质
“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.2.4”项下色谱
量浓度（mg/mL），V0为上样液的体积（mL），c1为吸附液
条件连续进样测定6次，记录峰面积，根据回归方程计算
中总黄酮的质量浓度（mg/mL），V1为吸附液体积（mL），
供试品溶液中总黄酮的质量浓度。结果，供试品溶液中
c2为乙醇洗脱液中总黄酮的质量浓度（mg/mL），V2为乙
总黄酮的平均质量浓度为0.032 3 mg/mL，RSD为0.60％
醇洗脱液体积（mL）。静态吸附和解吸试验结果见表1。
（n＝6），表明本法重复性良好。
表1 不同类型大孔吸附树脂的静态吸附和解吸试验结
2.2.10 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于室温
果（n＝3）
下放置 0、2、4、6、8、10 h 时按“2.2.4”项下色谱条件进样
Tab 1 Results of static adsorption-desorption tests of
分析，记录峰面积。结果，芦丁峰面积的 RSD 为 0.79％
different types of macroporous resins（n＝3）
（n＝6），表明供试品溶液在室温放置10 h内稳定。
树脂类型 比吸附量，mg/g 吸附率，％ 比解吸量，mg/g 解吸率，％
2.2.11 加样回收率试验 取已知含量的草果总黄酮粗 HPD100 8.122 87.86 4.542 55.92
品粉末，分别按已知含量的 50％、100％、150％加入 HPD300 7.463 80.49 4.056 54.35
0.056 mg/mL 芦丁对照品标准溶液，按“2.2.2”项下方法 HPD450 7.162 77.24 5.158 72.02
AB-8 7.560 81.54 4.524 59.84
制备低、中、高质量浓度供试品溶液，再按“2.2.4”项下色
X-5 5.877 63.38 3.579 60.90
谱条件进样分析，记录峰面积并计算加样回收率，每质 D101 6.859 73.98 3.698 53.91
量浓度平行操作6次。结果，低、中、高质量浓度供试品 由表 1 可见，6 种大孔吸附树脂的吸附率由高到低
溶液的加样回收率分别为 96.24％、99.75％、98.13％（平 依 次 为 HPD100＞AB-8＞HPD300＞HPD450＞D101＞
均加样回收率为 98.04％），RSD 分别为 1.83％、1.76％、 X-5；解吸率依次为 HPD450＞X-5＞AB-8＞HPD100＞
1.78％（n＝6）。 HPD300＞D101。尽管 HPD100 型树脂的吸附率最高，
2.2.12 草果总黄酮含量测定 取草果总黄酮粗品或纯 但解吸率相对较低；而HPD450型树脂的解吸率最高，且
化后样品粉末适量，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶 吸附率居中。综合考虑，选择 HPD450 型大孔吸附树脂
液，经 0.45 μm 微孔滤膜滤过后，取续滤液 10 μL，再按 作进一步考察。
“2.2.4”项下色谱条件进样分析，并根据回归方程计算溶 2.3.2 静态吸附和解吸动力学考察 精密称取经预处
液中总黄酮的质量浓度，并换算为含量（mg/g）。 理的HPD450型大孔吸附树脂2.0 g，平行3份，分别置于

中国药房 2020年第31卷第7期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 7 ·833 ·