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50 mL 磨口锥形瓶中，分别加入质量浓度为 0.927 2 3A。综合考虑，选择 0.927 2 mg/mL 为上样液的最佳质
mg/mL的草果总黄酮水溶液40 mL，于25 ℃恒温振荡器 量浓度。
中振摇，分别于1、2、4、8、12、24 h时吸取上清液4 mL，浓 100 100
缩蒸干后用甲醇定容至2 mL，即得吸附液。取吸附24 h 80 80
％ 60 ％
后的大孔吸附树脂，用水洗净并滤干，加入 75％乙醇 40 吸附率， 吸附率， 60
mL，于 25 ℃的恒温振荡器中振摇解吸，分别于 1、2、4、 40 40
20 20
8、12、24 h 时吸取上清液 4 mL，浓缩蒸干后用甲醇定容 0 0
至2 mL，即得解吸液。分别吸取上述各个时间点的吸附 0.115 9 0.231 8 0.463 6 0.927 2 1.854 4 3 4 5 6 7
质量浓度，mg/mL pH
液和解吸液 1 mL，经 0.45 μm 微孔滤膜滤过后，取续滤 A.上样液质量浓度 B.上样液pH
液适量，按“2.2.4”项下色谱条件进样分析，按“2.2.12”项 100 8
下方法计算各溶液中总黄酮的含量，再按“2.3.1”项下方 mg/g 80 mg/g 6
法计算比吸附量和比解吸量。分别以比吸附量和比解 总黄酮含量， 60 总黄酮含量， 4
40
吸量（mg/g）为纵坐标、时间（h）为横坐标，绘制 HPD450 20 2
型大孔吸附树脂的静态吸附和解吸动力学曲线，结果详 0 0
50 60 70 80 90 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
见图2。
乙醇体积分数，％ 乙醇用量，BV
12 12 C.乙醇体积分数 D.乙醇洗脱用量
10 10 图3 单因素试验结果
mg/g 8 mg/g 8 Fig 3 Results of single tests
比吸附量， 6 4 比解吸量， 6 4 2.4.2 上样液 pH 精密量取 5 份经预处理的 HPD450

0 2 2 0 型大孔吸附树脂 15 mL，置于玻璃柱中，分别加入 pH 为
1 2 4 8 12 24 1 2 4 8 12 24
时间，h 时间，h 3、4、5、6、7（pH 经 1 mol/L 盐酸溶液或 1 mol/L 氢氧化钠
A.静态吸附 B. 静态解吸
溶液调节）的 0.927 2 mg/mL 草果总黄酮水溶液 20 mL，
图 2 HPD450 型大孔吸附树脂的静态吸附和解吸动力 吸附 12 h 后，放出吸附液，并用适量水洗脱至流出液无
学曲线 色。将吸附液和水洗脱液合并，浓缩蒸干后，用甲醇定
Fig 2 Kinetic curves of static adsorption and desorp- 容至2 mL，吸取1 mL，经0.45 μm微孔滤膜滤过后，取续
tion for HPD450 macroporous resin
滤液适量，按“2.2.4”项下色谱条件进样分析，按“2.2.12”
由图 2A 可见，在静态吸附过程中，HPD450 型大孔 项下方法计算各溶液中总黄酮的含量，再按“2.3.1”项下
吸附树脂的比吸附量在 1～12 h 内呈上升趋势，12 h 后 公式②计算吸附率。结果，当上样液pH为3～6时，吸附
则吸附饱和；由图2B可见，在静态解吸过程中，HPD450 率有随pH升高而上升的趋势；但当pH＞6时，吸附率反
型大孔吸附树脂的比解吸量在 1～12 h 内波动明显，而 而有所降低，结果详见图3B。综合考虑，选择pH 6为上
12 h后基本达到平衡。为此，本研究选择最佳静态吸附 样液的最佳pH。
与解吸时间均为12 h。 2.4.3 乙 醇 体 积 分 数 精 密 量 取 5 份 经 预 处 理 的
2.4 草果总黄酮纯化工艺优化的单因素试验 HPD450型大孔吸附树脂15 mL，置于玻璃柱中，分别加
2.4.1 上样液质量浓度 精密量取 5 份经预处理的 入 pH 为 6 的 0.927 2 mg/mL 草果总黄酮水溶液 20 mL，
HPD450 型大孔吸附树脂 15 mL，湿法装于径高比约 1 ∶ 吸附 12 h，放出吸附液，并用适量水洗脱至流出液无色
13 的玻璃柱（直径：1.5 cm、高：20 cm，下同）中，分别加 后，分别用体积分数为50％、60％、70％、80％、90％的乙
入 pH 为 6、质量浓度分别为 0.115 9、0.231 8、0.463 6、 醇进行动态解吸。将醇洗脱液浓缩蒸干，用甲醇定容至
0.927 2、1.854 4 mg/mL 的草果总黄酮水溶液 20 mL，吸 2 mL，吸取1 mL，经0.45 μm微孔滤膜滤过后，取续滤液
附 12 h 后，放出吸附液，并用适量水洗脱至流出液无 适量，按“2.2.4”项下色谱条件进样分析，按“2.2.12”项下
色。将吸附液和水洗脱液合并，浓缩蒸干后，用甲醇定 方法计算各溶液中总黄酮的含量。结果，当乙醇体积分
容至2 mL，吸取1 mL，经0.45 μm微孔滤膜滤过后，取续 数为50％～70％时，大孔吸附树脂洗脱下来的总黄酮含
滤液适量，按“2.2.4”项下色谱条件进样分析，按“2.2.12” 量有随乙醇体积分数升高而上升的趋势；而当乙醇体积
项下方法计算各溶液中总黄酮的含量，再按“2.3.1”项下 分数＞70％时，总黄酮含量反而有所降低，这可能与乙
公式②计算吸附率。结果，当质量浓度≤0.927 2 mg/mL 醇体积分数越高，其洗脱下来的杂质也越多有关，结果
时，吸附率有随上样液质量浓度增加而上升的趋势；但 详见图 3C。综合考虑，选择 70％为乙醇洗脱的最佳体
当质量浓度＞0.927 2 mg/mL 时，吸附率不再受上样液 积分数。
质量浓度增加的影响，反而还略有下降，结果详见图 2.4.4 乙醇洗脱用量 精密量取5份经预处理的HPD450

·834 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 7 中国药房 2020年第31卷第7期