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取续滤液20 µL，按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录 表3 稳定性试验结果（n＝6）
峰面积。以 Cre 质量浓度为横坐标（x）、Cre 与内标峰面 Tab 3 Results of stability tests（n＝6）
积的比值为纵坐标（y）进行线性回归，得回归方程为y＝ 考察条件 质量浓度，μg/L RSD，％
室温放置24 h 75.0 4.23
0.001 0x－0.022 9（R ＝0.999 9）。结果表明，Cre 检测质
2
1 800.0 1.97
量浓度的线性范围为 45.0～3 600 µg/L，定量限为 45.0 2 700.0 4.43
µg/L。 －4 ℃放置48 h 75.0 2.10
1 800.0 3.28
2.3.4 精密度与准确度试验 分别按“2.3.3”项下的方 2 700.0 4.88
法配制高、中、低质量浓度（75.0、1 800.0、2 700.0 µg/L） －20 ℃-室温冻融1次 75.0 3.23
1 800.0 2.03
的血浆样品，各平行6份，按“2.2”项下的方法处理后，再
2 700.0 1.87
按“2.3.1”项下色谱条件进样分析，考察日内精密度；连
分别于给药后 5、15、30、60、90、120、150、180、240、300
续测定2 d，考察日间精密度；以测得血药浓度与理论血
min 时，在兔耳缘静脉取血 1 mL 于抗凝管中，以 10 000
药浓度比较考察准确度。结果表明，该方法精密度和准
r/min 离心 10 min，分离上层血浆。按“2.2”项下的方法
确度均良好，详见表1。
处理后，再按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面
表1 精密度与准确度试验结果
积。采用内标法，使用标准曲线计算Cre的血药浓度，使
Tab 1 Results of precision and accuracy tests
用DAS 2.0软件绘制平均血药浓度-时间曲线，同时计算
日内（n＝6） 日间（n＝12）
质量浓度， 主要药动学参数。PELGE-Cre-NPs 在家兔体内的平均
μg/L 测得浓度（x±s）， RSD， 准确度（x±s）， 测得浓度（x±s）， RSD， 准确度（x±s），
μg/L ％ ％ μg/L ％ ％ 血药浓度-时间曲线详见图2，主要药动学参数结果详见
75.0 73.84±2.90 3.93 98.45±3.87 72.39±2.82 3.84 97.77±3.76
1 800.0 1 753.92±43.29 2.47 97.44±2.41 1 759.55±40.09 2.29 97.40±2.23 表4。
2 700.0 2 653.51±94.73 3.57 98.28±3.51 2 623.01±78.30 2.97 97.76±2.90 4 500
4 000
2.3.5 萃取回收率试验 分别按“2.3.3”项下的方法配
3 500
制高、中、低质量浓度（75.0、1 800.0、2 700.0 µg/L）的血 3 000
c，g/L μ 2 000
浆样品，各平行 6 份，再按“2.2”项下方法，从“加入乙酸 2 500
乙酯 3 mL”开始进行样品处理。精密量取续滤液 20 1 500
µL，按“2.3.1”项下色谱条件进样分析，记录峰面积 1 000
500
（A1 ）。另将上述相应质量浓度的Cre对照品溶液各稀释 0
0 100 200 300 400
10倍，进样20 μL，记录峰面积（A0 ）。以A1/A0×100％计算 t，min
萃取回收率。结果表明，该方法萃取效果良好，详见 图2 PELGE-Cre-NPs在家兔体内的平均血药浓度-时
表2。 间曲线
表2 萃取回收率试验结果（n＝6） Fig 2 Mean plasma concentration-time curve of
Tab 2 Results of extraction recovery tests（n＝6） PELGE-Cre-NPs in rabbits
质量浓度，μg/L 萃取回收率（x±s），％ 平均萃取回收率，％ RSD，％ 表 4 PELGE-Cre-NPs 在家兔体内的主要药动学参数
75.0 79.06±1.62 （n＝6）
1 800.0 85.77±0.94 81.98 4.19
2 700.0 81.12±3.15 Tab 4 Main pharmacokinetic parameters of PELGE-
2.3.6 稳定性试验 分别按“2.3.3”项下的方法配制高、 Cre-NPs in rabbits（n＝6）
中、低质量浓度（75.0、1 800.0、2 700.0 µg/L）的血浆样 参数 x±s
品，各平行 6 份，共平行制备 3 组。分别于室温放置 24 AUC0-300 min，μg·min/L 211 952.689±5 503.231
AUC0-∞，μg·min/L 221 862.246±8 923.235
h、－4 ℃放置 48 h、－20 ℃-室温冻融 1 次，再按“2.2”项 AUMC0-300 min，μg·min /L 12 188 022.000±989 501.609
2
下方法处理后，按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录 AUMC0-∞，μg·min /L 17 077 406.590±2 270 686.226
2
MRT，min 57.448±3.460
峰面积。结果表明，在上述条件下血浆样品稳定性均良
t1/2，min 109.357±33.917
好，详见表3。 CL，L/（min·kg） 0.016±0.001
2.4 家兔药动学试验 cmax，μg/mL 3 699.458±287.713
取家兔6只，雌雄各半，禁食、不禁水24 h后，于耳缘 由图 2 与表 4 可知，家兔单次静脉注射 PELGE-Cre-
[14]
静脉单次注射PELGE-Cre-NPs，给药剂量为3.5 mg/kg 。 NPs后的平均血药浓度-时间曲线符合二室模型。

·780 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 7 中国药房 2020年第31卷第7期