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木精-伊红（HE）法染色后封片。参照文献方法 ，对 HE
[6]
染色切片采用PV二步法制作免疫组化标本。
2.3 相关指标观察与检测
2.3.1 兔膝关节软骨形态 在“2.2”项下切开兔膝关节
囊并充分暴露软骨之后、取材软骨组织之前，肉眼观察
关节软骨破坏情况。 A.空白组 B.模型组
2.3.2 兔膝关节软骨组织学变化及 Mankin 评分 取
“2.2”项下各组 HE 染色切片，置于光镜下观察，拍摄并
记录组织学变化情况；参照 Mankin 关节软骨病理评分
[7]
标准 进行评分，评分越高，则病变程度越高。
2.3.3 兔膝关节液中 COMP、p53 蛋白含量 取“2.2”项
下 各 组 关 节 液 上 层 清 液 样 品 ，采 用 ELISA 法 检 测 C.玻璃酸钠组 D.乌头注射液组
COMP、p53蛋白含量，严格按照相应试剂盒说明书要求 图 1 各组兔膝关节软骨组织形态学显微图（HE 染色，
进行操作。 ×200）
2.3.4 兔膝关节软骨组织中BMP-2表达情况 取“2.2” Fig 1 Histomorphology micrographs of knee joint car-
项下免疫组化标本，用显微摄影成像系统摄片（200倍）， tilage tissue of rabbits in each group（HE stain-
采用 Image-pro plus 6.0 病理图像分析系统定量分析，以 ing，×200）
积分光密度（IOD）表示蛋白相对表达量。每组兔同一部
表1 各组兔膝关节软骨组织Mankin评分（x±±s）
位选取6个高倍视野进行分析，取平均值。
Tab 1 Mankin score of knee joint cartilage of rabbits
2.4 统计学方法 in each group（x±±s）
采用SPSS 19.0软件对实验数据进行统计处理。计
组别 n Mankin评分
量资料以x±s表示，组间比较采用t检验。P＜0.05为差 空白组 6 1.11±0.98
异有统计学意义。 模型组 6 5.02±1.20 ＊
3 结果 玻璃酸钠组 6 2.90±1.60 #
乌头注射液组 6 2.70±1.18 #
3.1 各组兔膝关节软骨形态观察结果
＊
注：与空白组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05
#
肉眼可见，空白组兔膝关节软骨表面光滑无缺损； Note：vs. blank group，P＜0.05；vs. model group，P＜0.05
#
＊
模型组兔膝关节软骨边缘破坏，软骨面有缺损；玻璃酸 量显著降低（P＜0.05）；与模型组比较，玻璃酸钠组和乌
钠组兔膝软骨表面不光滑，有少量缺损；乌头注射液组 头注射液组兔膝关节液中 COMP、p53 蛋白含量均显著
兔膝关节软骨边缘欠光滑，关节软骨面有轻微缺损。 降低，膝关节软骨组织中BMP-2相对表达量均显著升高
3.2 各组兔膝关节软骨组织形态学观察及 Mankin 评 （P＜0.05）；乌头注射液组与玻璃酸钠组比较，上述因子
分结果 含量或相对表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）。各
光镜下可见，空白组兔膝关节软骨组织结构正常， 组兔膝关节液中 COMP、p53 蛋白含量及膝关节软骨组
软骨细胞分布均匀；模型组兔膝关节软骨组织结构明显 织中BMP-2相对表达量的检测结果见表2，膝关节软骨
不规则，软骨细胞可见明显扩大，有白泡样改变，细胞分 组织中BMP-2表达显微图见图2。
布紊乱；玻璃酸钠组兔膝关节软骨组织结构排列不规 表 2 各组兔膝关节液中 COMP、p53 蛋白含量及膝关
则，软骨细胞分布紊乱；乌头注射液组兔膝关节软骨组 节软骨组织中BMP-2相对表达量（x±±s）
织结构趋于正常，软骨细胞分布较均匀。各组兔膝关节 Tab 2 Contents of COMP and p53 protein in joint
软骨组织形态学显微图见图1。 fluid and relative expression of BMP-2 in knee
与空白组比较，模型组兔膝关节软骨组织的Mankin joint cartilage tissue of rabbits in each group
评分显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，玻璃酸钠组和 （x±±s）
乌头注射液组兔膝关节软骨组织的Mankin评分均显著 组别 n COMP，μg/L p53蛋白，pg/mL BMP-2
降低（P＜0.05）；玻璃酸钠组和乌头注射液组兔膝关节 空白组 6 4.91±0.12 1 145.29±121.22 1 191.69±144.78
模型组 6 8.42±0.14 ＊ 1 912.55±168.46 ＊ 621.39±82.22 ＊
软骨组织的 Mankin 评分比较，差异无统计学意义（P＞
玻璃酸钠组 6 7.05±0.09 # 1 685.40±140.08 # 865.71±82.16 #
0.05），详见表1。 乌头注射液组 6 6.85±0.42 # 1 745.32±145.32 # 931.26±103.14 #
3.3 各组兔膝关节液中COMP、p53蛋白含量及膝关节 注：与空白组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05
＊
#
软骨组织中BMP-2相对表达量检测结果 Note：vs. blank group，P＜0.05；vs. model group，P＜0.05
#
＊
与空白组比较，模型组兔膝关节液中COMP、p53蛋 4 讨论
白含量均显著升高，膝关节软骨组织中BMP-2相对表达 KOA的发病机制目前尚未完全明确，有学者认为是

·716 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6 中国药房 2020年第31卷第6期