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5 kg，每日喷洒人工汗液（含 L-组氨酸盐酸盐 0.5 g/L、                  料均以 x±s 表示，组间比较采用单因素方差分析。P＜
        氯化钠 5 g/L、二水合磷酸二氢钠 2.2 g/L，用 0.05 mol/L            0.05为差异有统计学意义。
        氢氧化钠溶液调节pH至5.5，即得），每100 kg药材粗粉                     3 结果
                         [14]
        喷洒人工汗液 30 kg ，拌匀，闷润，待吸尽水分后置于                       3.1  了哥王生品及炮制品醇提物对迟发型超敏反应模
       （37.0±0.5）℃的干燥箱中烘干 24 h。同法反复炮制 14                   型小鼠耳肿胀情况的影响
        d，即得了哥王汗渍法炮制品药材。取上述炮制品药材                               与空白组比较，模型组小鼠耳肿胀度显著升高（P＜
        适量，按“2.1.1”项下渗漉法提取，制得了哥王炮制品醇                       0.05）。与模型组比较，了哥王生品及炮制品醇提物各剂
                                          [13]
        提物（每100 g醇提物相当于992 g生药） 。                          量组小鼠耳肿胀度均显著降低（P＜0.05），且肿胀抑制
        2.2 分组、造模与给药                                       率有随剂量增加而升高的趋势。了哥王生品及炮制品
            取雄性小鼠 150 只，随机分为空白组、模型组、了哥                     醇提物抗小鼠迟发型超敏反应耳肿胀的 ED50及 95％CI
        王生品醇提物1～6组（简称“生品1～6组”；剂量分别为                        分别为 0.239 6（0.129 0，0.445 2）g/kg、0.147 3（0.076 8，
        0.13、0.20、0.26、0.52、1.04、2.6 g/kg，按人用临床最高剂         0.282 7）g/kg，详见表1。
        量的10倍换算得最高剂量 ，以1.0％羧甲基纤维素钠溶                        表1    了哥王生品及炮制品醇提物对迟发型超敏反应模
                              [1]
        液为溶剂，下同）、了哥王炮制品醇提物1～6组（简称“炮                              型小鼠耳肿胀情况的影响（n＝10）
        制品 1～6 组”；剂量分别为 0.13、0.20、0.26、0.52、1.04、          Tab 1 Effects of ethanol extract of W. indica raw and
        2.6 g/kg）和阳性组（环磷酰胺，36.4 mg/kg，按人用临床                       processed products on ear swelling of delayed
                        [15]
        最高剂量换算而得 ，以1.0％羧甲基纤维素钠溶液为溶                                type hypersensitivity model mice（n＝10）
        剂），每组10只。除空白组外，其余各组小鼠均于腹部去                         组别      肿胀度（x±s），mg  肿胀抑制率（x±s），％  ED50，g/kg  95％CI，g/kg
        毛（面积约为 3 cm×3 cm），并将 1％DNFB-丙酮-麻油混                 空白组      11.1±1.6
                                                           模型组      22.5±6.6 ＊
        合溶液[将DNFB 50 mg溶于丙酮-麻油溶液（1 ∶ 1，V/V）5
                                                           阳性组      13.2±1.9 #  37.60±9.19
        mL 中，即得]50 μL 均匀涂抹至去毛处致敏以复制迟发                      生品1组     15.2±2.1 #  28.12±10.10  0.239 6  0.129 0，0.445 2
        型超敏反应模型。模型复制成功（即出现皮肤红肿胀、                           生品2组     14.5±1.8 #  31.28±7.63
                                                           生品3组     14.0±1.8 #  33.57±7.69
        局部有渗出液、水肿等症状 ）后，空白组和模型组小鼠
                               [15]
                                                           生品4组     11.6±3.8 #  45.02±16.00
        均灌胃等容 1.0％羧甲基纤维素钠溶液，各给药组按 20                       生品5组     11.7±4.9 #  44.71±11.31
        mL/kg灌胃相应药液，每日1次，连续5 d。                            生品6组     11.3±0.6 #  46.29±2.74
                                                           炮制品1组    15.0±1.3 #  28.91±5.47  0.147 3  0.076 8，0.282 7
        2.3  小鼠耳肿胀情况及脏器指数检测                                炮制品2组    14.5±1.4 #  31.28±6.53
            末次给药后，将 1％DNFB-丙酮-麻油混合溶液 10                    炮制品3组    13.2±2.8 #  37.60±13.20
                                                           炮制品4组     9.2±4.8 #  56.56±12.90
        μL均匀涂抹于小鼠右耳（两面）进行攻击。攻击24 h后，
                                                           炮制品5组     9.0±3.4 #  57.35±16.14
        于眼内眦静脉丛取血，随后颈椎脱臼处死小鼠，剪下双                           炮制品6组     8.7±1.5 #  58.93±7.13
        耳，用9 mm直径打孔器分别在两耳同一部位处打孔，取                             注：与空白组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05
                                                                           ＊
                                                                                             #
        圆耳片称定质量，以右耳片与左耳片的质量之差（即肿                               Note：vs. blank group，P＜0.05；vs. model group，P＜0.05
                                                                                                #
                                                                              ＊
        胀度）为观察指标，计算每只小鼠的耳肿胀抑制率：肿胀                          3.2  了哥王生品及炮制品醇提物对迟发型超敏反应模
        抑制率＝（给药组肿胀度－空白组肿胀度）/空白组肿胀                          型小鼠脏器指数的影响
        度×100％。采用 Bliss 法 计算生品与炮制品的半数有                         与空白组比较，模型组小鼠肝指数显著升高，肺指
                             [16]
        效剂量（ED50 ）及其95％置信区间（CI）。将小鼠解剖后，                    数显著降低（P＜0.05）；与模型组比较，阳性组、生品3组
        取心、肝、脾、肺、肾并精密称定质量，计算脏器指数：脏                         和炮制品 1～6 组小鼠肝指数均显著降低，阳性组、生品
        器指数＝某脏器质量/体质量×100％。                                3～6 组及炮制品 3～6 组小鼠肺指数均显著升高（P＜
        2.4 小鼠炎症因子及肝肾功能指标检测                                0.05）；而其余脏器指数组间比较差异均无统计学意义
            取“2.3”项下血液样品适量，以 4 500 r/min 离心 15             （P＞0.05），详见表2。
        min，取血清，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）以酶标                      3.3  了哥王生品及炮制品醇提物对迟发型超敏反应模
        仪检测血清 TNF-α、IL-10 水平，采用改良化学氧化法以                    型小鼠炎症因子的影响
        全自动生化分析仪测定血清 ALT、AST、TBIL、BUN、                         与空白组比较，模型组小鼠血清TNF-α水平显著升
        CREA水平。严格按照相应试剂盒说明书操作。                             高，IL-10水平显著降低（P＜0.05）。与模型组比较，阳性
        2.5  统计学方法                                         组、生品 1～3 组以及炮制品 1～4 组小鼠血清 TNF-α水
            采用SPSS 13.0软件对数据进行统计分析。计量资                     平均显著降低，生品1、2、4、5组以及炮制品2～6组小鼠


        中国药房    2020年第31卷第6期                                               China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 6  ·663  ·
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