Page 83 - 202004

表3 提取回收率试验结果（n＝6） 同）条件下将上述AP溶液加至其中，以15 000 r/min离心
Tab 3 Results of extraction recovery tests（n＝6） 10 min，弃去上清液，再用水补至 20 mL；重复操作 2 次
样品 理论质量浓度，μg/mL 提取回收率（x±s），％ RSD，％ 以除去DMSO，随后将沉淀物摇匀，倒入西林瓶中，以超
血浆 0.2 80.28±2.76 2.27 声 2 s、间 歇 2 s 处 理 10 min，即 得 AP-NPs（每 毫 升
5.0 95.26±1.55 1.33 AP-NPs含AP原料药约4.35 mg，载药量为43.52％）。
20.0 97.19±3.84 2.59 2.2.2 体内分布实验 所有小鼠均禁食、不禁水 12 h
心 0.2 83.73±4.36 6.54
5.0 91.33±2.35 3.86 后，随机分为 AP 溶液组[将 AP 原料药溶于聚乙二醇-乙
20.0 90.55±3.38 3.26 醇-生理盐水混合溶液（5 ∶ 2 ∶ 3，V/V/V）中，混悬液质量浓
肝 0.2 80.36±2.52 1.49 度为10.00 mg/mL]和AP-NPs混悬液组（将AP-NPs 溶于
5.0 87.67±1.66 2.58 生理盐水中，混悬液质量浓度为 10.88 mg/mL），各 45
20.0 98.98±0.89 1.53 只。各组小鼠均单次灌胃相应药物80 mg/kg（剂量设置
脾 0.2 76.24±5.42 4.81
5.0 90.62±1.37 1.95 参考文献[19]及本课题组前期预实验结果）。分别于给
20.0 94.44±2.11 4.24 药前（0 h）及给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8、10 h 摘取眼球
肺 0.2 76.32±5.94 3.77 取血 500 μL，置于含肝素钠的离心管中，以 5 000 r/min
5.0 94.75±2.35 2.89 离心 10 min，分离血浆。末次取血后立即脱颈处死小
20.0 98.20±0.56 2.85 鼠，取其心、肝、脾、肺、肾以及脑组织，用生理盐水将组
肾 0.2 79.55±2.71 4.49 织表面的残血洗净，用滤纸吸干后精确称定质量。将血
5.0 95.81±1.25 1.39
20.0 96.47±2.34 3.76 浆及组织样品分别按“2.1.3”或“2.1.4”项下方法处理（其
脑 0.2 82.73±1.44 4.42 中肝组织样品经甲醇稀释1倍后进样）后，再按“2.1.1”项
5.0 92.34±2.48 1.19 下色谱条件进样分析，记录峰面积，根据随行标准曲线
20.0 97.37±1.86 3.12
计算各时间点各样品中 AP 的质量浓度，每个时间点各
2.2 AP-NPs在小鼠体内组织分布研究及靶向性评价 组取5只小鼠平行操作。采用Excel 2010软件绘制组织
2.2.1 AP-NPs 的制备 采用微量超声沉淀法 [18] 制备 分布图；采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析，计
AP-NPs。精密称取 AP 原料药 100 mg，加二甲基亚砜 量资料以 x±s 表示，组间比较采用 t 检验，P＜0.05 为差
（DMSO）适量使溶解；另称取PVP、TPGS各50 mg，溶解 异有统计学意义。各样品中 AP 的质量浓度见表 4，AP
于水 20 mL 中，于超声（功率：750 W，频率：20 kHz，下 的组织分布见图4。
表4 小鼠灌胃AP原料药和AP-NPs后各时间点血浆和组织样品中AP的质量浓度（x±±s，n＝5，μg/mL）
Tab 4 The concentration of AP in plasma 1 tissue samples at different time points after intragastric administra-
tion of AP raw material and AP-NPs（x±±s，n＝5，μg/mL）
时间点
组别 样品
0 h 0.25 h 0.5 h 1 h 2 h 4 h 6 h 8 h 10 h
AP溶液组 血浆 － 5.30±1.10 7.79±1.01 4.82±0.35 3.95±0.68 3.03±0.46 2.26±0.31 1.16±0.27 －
心 － 4.01±0.31 4.99±0.46 3.94±0.92 3.18±1.06 2.60±0.26 1.76±0.32 1.10±0.31 0.79±0.25
肝 － 12.41±2.68 18.36±1.20 13.05±3.41 11.51±1.74 9.54±0.68 8.47±1.27 5.18±1.24 4.99±0.46
脾 － 4.11±1.04 5.15±1.12 4.63±0.52 3.27±0.75 2.81±0.73 2.01±0.51 1.04±0.32 －
肺 － 5.11±0.73 6.58±1.25 5.26±1.10 4.31±0.46 3.18±0.61 2.87±0.51 1.69±0.46 0.68±0.32
肾 － 7.96±1.73 10.01±1.41 8.52±0.62 7.01±0.74 6.52±0.67 4.84±0.66 3.72±0.63 1.77±0.28
脑 － 2.07±0.26 2.63±0.43 2.10±0.21 1.89±0.42 1.01±0.28 － － －
AP-NPs混悬液组 血浆 － 5.48±1.23 9.34±1.04 ＊ 6.99±1.87 ＊ 4.93±1.11 ＊ 3.67±0.38 ＊ 2.85±0.81 ＊ 1.38±0.39 0.87±0.29
心 － 3.66±0.74 4.36±0.98 4.01±1.65 3.02±1.08 2.49±0.39 1.25±0.42 ＊ 0.81±0.22 －
肝 － 20.80±2.43 ＊＊ 24.68±2.82 ＊＊ 23.74±4.35 ＊＊ 21.81±2.33 ＊＊ 15.70±2.21 ＊ 12.27±2.21 ＊＊ 8.31±1.06 ＊＊ 3.39±0.48 ＊
脾 － 5.55±1.11 ＊ 6.59±1.44 ＊ 5.78±1.65 ＊ 4.79±0.83 ＊ 3.89±0.92 ＊＊ 2.97±0.34 ＊ 1.68±0.46 ＊ 0.85±0.29
肺 － 4.98±0.89 5.54±2.23 ＊ 5.13±0.64 4.29±0.37 3.35±0.45 2.92±0.44 1.71±0.37 －
肾 － 6.28±0.66 ＊ 8.03±1.83 ＊ 7.11±1.77 ＊ 5.43±1.69 ＊＊ 3.99±1.01 ＊＊ 2.98±0.57 ＊＊ 1.77±0.54 ＊＊ 1.11±0.37 ＊
脑 － 2.63±0.43 ＊ 3.43±0.47 ＊ 2.80±0.40 ＊ 2.39±0.39 ＊ 1.26±0.48 ＊ 0.98±0.21 － －
＊＊
＊
注：“－”代表未检测到或低于定量下限；与AP溶液组比较，P＜0.05， P＜0.01
＊＊
＊
Note：“－”stands for undetected or below the lowest quantitation limit；vs. AP solution group， P＜0.05， P＜0.01
由表 4、图 4 可见，与 AP 溶液组比较，AP-NPs 混悬 品中AP的质量浓度均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。
液组小鼠血浆样品（0.5～6 h各时间点）以及肝（0.25～8 2.2.3 体内靶向性评价 以 AP 原料药作为参比，采用
h 各时间点）、脾（0.25～8 h 各时间点）、脑（0.25～4 h 各 DAS 2.0 软件和 Excel 2010 软件计算药-时曲线下面积
时间点）组织样品中 AP 的质量浓度均显著升高（P＜ （AUC）、峰浓度（cmax ）、峰浓度比值（ce ）、相对摄取率
0.05或P＜0.01），且以肝组织中AP含量最高；而心脏（6 （RUE），并以上述参数为主要指标评价 AP 在小鼠体内
h）肝（10 h）、肺（0.5 h）、肾（0.25～10 h各时间点）组织样 的靶向性。其中，ce越大，表示对应剂型对药物分布的改

中国药房 2020年第31卷第4期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 ·461 ·