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黑豆药材的HPLC指纹图谱建立及5种异黄酮类成分的含量测定 Δ

1＊
郭千祥 ，梁幼玲 ，史旭华 ，白俊其 ，黄 娟 ，黄志海 ，丘小惠 （1.广东省中医院/广州中医药大学第二临床
1，2 #
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医学院，广州 510120；2.广东省中医症候临床研究重点实验室，广州 510006）
中图分类号 R282；R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）04-0428-07
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.04.08
摘 要 目的：建立黑豆药材的指纹图谱和5种异黄酮类成分的含量测定方法，为更好地控制该药材的质量提供参考。方法：采
用高效液相色谱法（HPLC）建立指纹图谱并检测5种异黄酮类成分的含量。色谱柱为Phenomenex C18，流动相为乙腈-0.12％甲酸
水溶液（梯度洗脱），流速为1 mL/min，检测波长为260 nm，柱温为30 ℃，进样量为10 µL。以大豆苷为参照，绘制12批黑豆药材样
品的HPLC指纹图谱，采用《中药特征指纹图谱相似度评价系统》（2012A版）进行相似度评价，确定共有峰；分别采用SPSS 20.0软
件和SIMCA 13.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果：12批黑豆药材样品共有19个共有峰，相似度均大于0.94；指认了5个成
分，分别为大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素。聚类分析结果显示，12批黑豆药材样品可聚为两类，即S1～ S3聚
为一类，S4～S12聚为一类。主成分分析结果显示，2个主成分因子的方差贡献率分别为53.261％、40.715％，累积方差贡献率为
93.976％。上述 5 种成分的质量浓度线性范围分别为 5.97～191.00 µg/mL（r＝0.999 9）、1.05～33.46 µg/mL（r＝0.999 9）、8.93～
285.61 µg/mL（r＝0.999 5）、0.82～26.33 µg/mL（r＝0.999 9）、0.93～29.64 µg/mL（r＝0.999 7）；定量限分别为0.881 1、0.611 6、0.078 6、
0.243 3、0.511 6 µg/mL，检测限分别为 0.264 3、0.244 7、0.021 4、0.124 8、0.106 7 µg/mL；精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的
RSD 均小于 5％；加样回收率为 95.15％～96.56％（RSD＝0.51％，n＝6）、98.52％～103.45％（RSD＝1.88％，n＝6）、95.37％～
97.91％（RSD＝0.95％，n＝6）、99.75％～102.00％（RSD＝0.78％，n＝6）、100.26％～103.65％（RSD＝1.21％，n＝6）。12 批黑豆药
材中上述 5 种成分的含量分别为 0.178 3～0.265 9、0.021 7～0.096 2、0.288 5～0.597 2、0.014 1～0.058 8、0.012 9～0.082 9 mg/g。
结论：所建指纹图谱和 5 种异黄酮类成分的含量测定方法均可用于黑豆药材的质量控制；不同产地黑豆药材中异黄酮类成分相
似，但含量有所差异。
关键词 黑豆；异黄酮类；高效液相色谱法；指纹图谱；聚类分析；主成分分析；含量测定

matory activity of linalool and linalyl acetate constituents 析[J].中草药，2002，33（10）：21-22.
of essential oils[J]. Phytomedicine，2002，9（8）：721-726. [22] 王俊华，符红.广佛手挥发油化学成分的GC-MS分析[J].
[17] PEANA AT，D’AQUILA PS，CHESSA ML，et al.（－）- 中药材，1999，22（10）：516-517.
linalool produces antinociception in two experimental [23] 刘盼，雷素娟，唐鹏，等.不同产地佛手 GC 指纹图谱及 4
models of pain[J]. Eur J Pharmacol，2003，460（1）： 种成分测定[J].中成药，2018，40（11）：2491-2496.
37-41. [24] 赵磊，籍保平，周峰，等. 12 种金华佛手挥发油成分的比
[18] DE SOUSA DP，NÓBREGA FF，SANTOS CC，et al. Anti- 较研究[J].食品科学，2006，27（6）：179-184.
convulsant activity of the linalool enantiomers and race- [25] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：四部[S]. 2015 年
mate：investigation of chiral influence[J]. Nat Prod Com- 版.北京：中国医药科技出版社，2015：203.
mun，2010，5（12）：1847-1851. [26] 辛晓伟.石韦药材挥发油成分分析及抑菌活性研究[D].
[19] CHENG BH，SHEEN LY，CHANG ST.Evaluation of an- 济南：山东中医药大学，2016.
xiolytic potency of essential oil and S-（+）-linalool from [27] LEGGIO A，LEOTTA V，BELSITO EL，et al. Aromathera-
Cinnamomum osmophloeum ct. linalool leaves in mice[J]. py：composition of the gaseous phase at equilibrium with
J Tradit Complement Med，2015，5（1）：27-34. liquid bergamot essential oil[J]. Chem Cent J，2017. DOI：
[20] 金晓玲，徐丽珊，施潇，等. 4种佛手挥发油化学成分的研 10.1186/s13065-017-0340-y.
究[J].中国药学杂志，2002，37（10）：737-739． [28] 陈菲，吴永江，马丽，等. GC-MS联用分析松针和佛手挥
[21] 高幼衡，黄海波，徐鸿华.广佛手挥发性成分的GC-MS分 发油化学成分的差异[J].中国医药导报，2014，11（6）：
90-92.
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.81373967）；广东省
[29] 黄海波，贺红，潘超美，等. 3种不同产地佛手挥发油含量
中医药局科研项目（No.20184013）；广东省中医院中医药科学技术研
测定和GC-MS分析[J].医药世界，2002，43（7）：57-59.
究专项——中药精准煮散饮片标准化研究及应用启动项目
[30] 杨君，郜海燕，储国海，等.基于 GC-MS 和 GC-O 联用法
＊硕士研究生。研究方向：中药制剂及药效物质基础。E-mail：
1143665641@qq.com 分析佛手精油关键香气成分[J].食品科学，2015，36
# 通信作者：研究员，硕士生导师，硕士。研究方向：中药制剂及 （20）：194-197.
药效物质基础。电话：020-39318571。E-mail：qiuxiaohui@gzucm.edu. （收稿日期：2019-08-08 修回日期：2020-01-03）
cn （编辑：陈 宏）

·428 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 4 中国药房 2020年第31卷第4期