Page 23 - 2020年1月第31卷第2期
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        油类成分，具有抗氧化 、降糖 、镇静、催眠                 [9-11] 等作用；  mL水，煎煮30 min后，滤过，滤液蒸干，得到苏格木勒-3
                           [12]
        荜茇为佐药，具有抑赫依、调理体素、化痰、止痛等功                           汤水提物（9 g，得率为18％）。共制备9批样品。
          [6]
        效 ，主要含有生物碱及酰胺类、挥发油类、木脂素类、萜                         2.1.2  色 谱 条 件     色 谱 柱 ：Agilent Eclipse XDB-C18
                       [14]
        类、甾醇类等成分 ，具有保护胃黏膜 、镇静、催眠                     [9-11]  （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.1％磷酸水溶
                                         [15]
        等作用。                                               液；流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL；柱温：30 ℃；检测
            目前关于苏格木勒-3汤的研究主要为临床观察，对                        波长：225 nm（芹菜素）、342 nm（胡椒碱）。
        于其质量控制及有效物质基础等方面的研究较少。本                            2.1.3  混合对照品溶液的制备            取芹菜素、胡椒碱对照
        课题组前期对苏格木勒-3 汤的挥发油部位与水提物部                          品各适量，精密称定，加甲醇制成含芹菜素、胡椒碱质量
        位分别进行了药效学研究，结果发现两者均具有治疗失                           浓度分别为0.200、1.397 mg/mL的混合对照品溶液。
        眠的作用。虽然有研究对苏格木勒-3 水提物或挥发油                          2.1.4  供试品溶液的制备          精密称取“2.1.1”项下苏格
        的药效组分进行了测定          [16-18] ，但这些研究多以单一成分           木勒-3 汤水提物约 1 g，加 25％盐酸溶液 2 mL、甲醇 10
        作为评价指标，难以全面评估其质量。基于此，本研究                           mL，称定质量，超声（功率：100 W，频率：40 kHz）处理
        采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定苏格木勒-3汤水                        30 min，放冷，再次称定质量，用甲醇补足减失的质量，
        提物芹菜素、胡椒碱（分别来自组方药材香旱芹、荜茇）                          摇匀，经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
        的含量；采用气相色谱法（GC）同时测定其挥发油中桉                          2.1.5 空白对照溶液        以甲醇为空白对照溶液。
        油精、枯茗醛的含量，旨在为该方剂质量标准的提高和                           2.1.6  系统适用性试验         取上述混合对照品溶液、供试
        后续二次开发及体内药效物质基础研究提供依据。                             品溶液、空白对照溶液各10 μL，按“2.1.2”项下色谱条件
        1 材料                                               进样测定，记录色谱，详见图 1。由图 1 可知，在混合对
        1.1  仪器                                            照品溶液和供试品溶液色谱图上有相同保留时间的色
            U3000型HPLC仪，包括二极管阵列检测器、四元梯                     谱峰，理论板数按芹菜素、胡椒碱计均不低于 3 000，各
        度泵（美国Thermo Fisher公司）；AL204型电子分析天平                 成分分离度均大于1.5，空白对照对测定无干扰。
       （美国Mettler-Toledo公司）；KQ-250型超声波清洗机（巩                2.1.7  线性关系考察        取“2.1.3”项下混合对照品溶液
        义予华仪器有限责任公司）；GC-2014AFSC型GC仪，包                     适量，用甲醇依次稀释 1、2、4、8、16 倍后分别精密吸取
        括自动进样器、氢火焰离子化检测器[岛津企业管理（中                          10 μL，按“2.1.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。
        国）有限公司]。                                           以质量浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进
        1.2  药品与试剂                                         行线性回归，得芹菜素回归方程为 y＝673.24x+1.212 1
            芹菜素对照品（批号：111901-201603，纯度：99.2％）、             （r＝0.999 6），胡椒碱回归方程为 y＝1 145.2x+9.370 5
        胡椒碱对照品（批号：110775-201405，纯度：98.9％）、桉                （r＝0.999 9）。结果表明，芹菜素、胡椒碱分别在 12.5～
        油精对照品（批号：110788-201707，纯度：100％）均由中                 200、87.3～139.7 μg/mL范围内线性关系良好。
        国食品药品检定研究院提供；枯茗醛对照品[安倍尔实                           2.1.8  定量限与检测限考察           取“2.1.3”项下混合对照
        验室技术（上海）有限公司，批号：R4030004，纯度：95％]；                  品溶液适量，用甲醇倍比稀释，按“2.1.2”项下色谱条件
        正己烷为分析纯，甲醇及其余试剂均为色谱纯，水为蒸                           进行测定，记录峰面积。分别以信噪比 10 ∶ 1、3 ∶ 1 计算
        馏水。                                                定量限、检测限。结果，芹菜素、胡椒碱的定量限分别为
        1.3  药材                                            0.02、0.06 μg/mL，检测限分别为0.01、0.02 μg/mL。
            白 豆 蔻（批 号 ：冀 20100139）、香 旱 芹（批 号 ：冀            2.1.9  精密度试验       取“2.1.3”项下混合对照品溶液适
        20100139）、荜茇（批号：冀20100139）均购于内蒙古田里                 量，按“2.1.2”项下色谱条件连续进样测定 5 次，记录峰
        药材公司，经内蒙古医科大学蒙医药学院图门巴雅尔教                           面积。结果，芹菜素、胡椒碱峰面积的 RSD 分别为
        授 鉴 定 分 别 为 姜 科 植 物 白 豆 蔻（Amomum kravanh           1.29％、0.85％（n＝5），表明仪器精密度良好。
        Pierre ex Gagnep）和爪哇白豆蔻（A. compactum Soland.       2.1.10  稳定性试验       取“2.1.4”项下供试品溶液适量，
        ex Maton）的果实、伞形科植物孜然芹（Cuminum cymi-                分别在制备后于室温下放置 2、4、8、10、12 h 时，按
        num L.）的成熟果实、胡椒科植物荜茇（Piper longum L．）             “2.1.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，芹
        的干燥未成熟或成熟果穗。                                       菜素、胡椒碱峰面积的 RSD 分别为 3.27％、1.84％（n＝
        2 方法与结果                                            5），表明供试品溶液制备后12 h内基本稳定。
        2.1  HPLC 法测定苏格木勒-3 汤水提物中芹菜素和胡                     2.1.11  重复性试验       取“2.1.1”项下苏格木勒-3汤水提
        椒碱的含量                                              物约1 g，共6份，按“2.1.4”项下方法制备供试品溶液，再
        2.1.1  苏格木勒-3 汤水提物的制备              取苏格木勒-3         按“2.1.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标
        汤[白豆蔻-香旱芹-荜茇（3 ∶ 2 ∶ 1，m/m/m）]50 g，加 1 000         法计算样品含量。结果，芹菜素、胡椒碱含量的 RSD 分


        中国药房    2020年第31卷第2期                                               China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 2  ·145  ·
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