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S11）0.5 g，共6份，精密称定，按“2.2.2”项下方法制备供 表2 11批啤酒花药材样品的相似度评价结果
试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，以黄腐酚 Tab 2 Similarity evaluation results of 11 batches of
峰的保留时间和峰面积为参照，记录各共有峰的相对保 H. lupulus
留时间和相对峰面积。结果，19个共有峰相对保留时间 编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
S1 1.000 0.915 0.944 0.960 0.897 0.911 0.928 0.895 0.919 0.929 0.909
的RSD均小于0.41％（n＝6），相对峰面积的RSD均小于
S2 0.915 1.000 0.872 0.965 0.990 0.986 0.897 0.922 0.928 0.994 0.920
2.17％（n＝6），表明该方法重复性良好。 S3 0.944 0.872 1.000 0.957 0.837 0.838 0.980 0.935 0.966 0.881 0.947
2.4 HPLC指纹图谱的生成与相似度、共有峰分析 S4 0.960 0.965 0.957 1.000 0.937 0.935 0.954 0.971 0.983 0.963 0.973
S5 0.897 0.990 0.837 0.937 1.000 0.996 0.865 0.876 0.886 0.993 0.876
2.4.1 HPLC 指纹图谱的生成 取 11 批啤酒花药材样 S6 0.911 0.986 0.838 0.935 0.996 1.000 0.858 0.871 0.880 0.994 0.873
品各适量，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按 S7 0.928 0.897 0.980 0.954 0.865 0.858 1.000 0.916 0.948 0.897 0.922
S8 0.895 0.922 0.935 0.971 0.876 0.871 0.916 1.000 0.993 0.908 0.998
“2.1”项下色谱条件进样测定，采用《中药色谱指纹图谱
S9 0.919 0.928 0.966 0.983 0.886 0.880 0.948 0.993 1.000 0.921 0.995
相似度评价系统》（2012 版）对 11 批啤酒花药材样品的 S10 0.929 0.994 0.881 0.963 0.993 0.994 0.897 0.908 0.921 1.000 0.910
指纹图谱进行分析，得HPLC指纹图谱，详见图1、图2。 S11 0.909 0.920 0.947 0.973 0.876 0.873 0.922 0.998 0.995 0.910 1.000
对照品的 HPLC 分析结果，指认出 11 号峰为黄腐酚、13
44
40 号峰为类葎草酮、14号峰为葎草酮、15号峰为加葎草酮、
36 17号峰为类蛇麻酮、18号峰为蛇麻酮、19号峰为加蛇麻
32
酮，详见图 3。因黄腐酚峰分离度良好、峰面积大且稳
28
mV 24 R（19） 定，故以其保留时间和峰面积为参照，计算其他峰的相
U， 20 S11（19）
S10（19） 对保留时间和相对峰面积，详见表3、表4。
16 S9（19）
S8（19）
12 S7（19）
S6（19） 60
8 S5（19）
S4（19）
4 S3（19） 50
S2（19）
0 S1（19） 40
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60
t，min mV 30
图1 11批啤酒花药材样品的HPLC叠加指纹图谱 U， 20
Fig 1 HPLC superimposed fingerprint of 11 batches 10
of H. lupulus 0
24 0 10 20 30 40 50 60
22 t，min
20 注：11.黄腐酚；13.类葎草酮；14.葎草酮；15.加葎草酮；17.类蛇麻
18
16 酮；18.蛇麻酮；19.加蛇麻酮
mV 14 Note：11. xanthohumol；13. cohumulone；14. humulone；15. ad-
U， 12 humulone；17. colupulone；18. lupulus；19.adlupulus
10
8 图3 混合对照品的HPLC图
6
4 Fig 3 HPLC chromatogram of mixed control
2
0 2.5 抗氧化作用考察
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 2.5.1 DPPH 自由基清除率 按“2.2.2”项下方法制备
t，min
图2 啤酒花药材样品的HPLC对照指纹图谱 11 批供试品溶液（编号：S1～11），每批取 1 mL，加 50％
Fig 2 HPLC control fingerprint of H. lupulus 乙醇稀释制成系列质量浓度的供试品溶液；精密称取
2.4.2 相似度评价 采用《中药色谱指纹图谱相似度评 DPPH 4 mg，加甲醇溶解并定容至 100 mL 量瓶中，即得
价系统》（2012 版）进行相似度评价。结果，11 批啤酒花 浓度为 40 μg/mL 的 DPPH 自由基溶液。取上述系列质
药材样品的相似度均大于 0.830，提示不同产地和不同 量浓度的供试品溶液各 100 μL、DPPH 自由基溶液 100
品种的啤酒花药材样品间的化学成分差异较小。相似 μL，先后加入至 96 微孔板中，置于室温避光处反应 30
度评价结果见表2。 min 后，采用酶标仪于540 nm 波长处测定DPPH自由基
2.4.3 共有峰的指认 11批啤酒花药材样品共有19个 溶液+系列质量浓度供试品溶液的吸光度（As ）；取系列
共有峰。以 S10 作为参照图谱，时间窗口为 0.1 min，选 质量浓度的供试品溶液各 100 μL、无水乙醇 100 μL，同
择指纹图谱中峰形较好的色谱峰进行多点校正，采用平 法反应并测得系列质量浓度供试品溶液的吸光度（Ac ）；
均数法生成对照图谱，同时结合啤酒花药材样品和混合 取 DPPH 自由基溶液 100 μL、50％乙醇溶液 100 μL，同
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