Page 20 - 2020年1月第31卷第2期

步提示黄腐酚、葎草酮和类蛇麻酮可能是啤酒花具有抗 2.7 黄腐酚体外抗氧化验证试验
氧化作用的物质基础，结果见图5。 2.7.1 DPPH 自由基清除率 精密称取黄腐酚对照品
50.04 mg，加甲醇溶解并定容至 5 mL 量瓶中；另取上述
2×10 －5
溶液适量，再分别用甲醇稀释 10、100 倍，制成质量浓度
1.5×10 －5
1×10 －5 分别为10.0、1.0、0.1 mg/mL的系列工作溶液。精密称取
（ DPPH ） 5×10 －6 0 维生素 C 10 mg，加水溶解并定容至 100 mL 量瓶中，制

回归系数 －5×10 －6 －5 成质量浓度为 0.01 mg/mL 的维生素 C 溶液。按“2.5.1”
项下方法操作并计算黄腐酚和维生素C对DPPH自由基
－1×10
－1.5×10 －5
的清除率，详见图 6A。由图 6A 可知，黄腐酚在质量浓
－2×10 －5
－2.5×10 －5 度 0.1～10.0 mg/mL 范围内对 DPPH 自由基的清除率由
峰1 峰2 峰3 峰4 峰5 峰6 峰7 峰8 峰9 峰10 峰11 峰12 峰13 峰14 峰15 峰16 峰17 峰18 峰19 42.6％增加至88.8％，且0.1 mg/mL黄腐酚与0.01 mg/mL
A.清除DPPH自由基
维生素 C 对 DPPH 自由基的清除率相当（P＝0.050），提
8×10 －5 示黄腐酚具有较强的清除DPPH自由基的能力，是啤酒
6×10 －5 花具有清除DPPH自由基作用的主要成分之一。
4×10 －5 ％ 100 60
（ ABTS ） 2×10 －5 0 80 ％ 40
回归系数 －2×10 －5 DPPH自由基清除率， 60 ABTS自由基清除率， 20
40
－4×10 －5 20
－6×10 －5 0 0
0.01 0.1 1 10 mg/mL 0.1 0.1 1 10 mg/mL
－8×10 －5 维生素C 黄腐酚 维生素C 黄腐酚
峰1 峰2 峰3 峰4 峰5 峰6 峰7 峰8 峰9 峰10 峰11 峰12 峰13 峰14 峰15 峰16 峰17 峰18 峰19 A.清除DDPH自由基 B.清除ABTS自由基
B.清除ATBS自由基 图6 黄腐酚体外抗氧化试验结果
图4 偏最小二乘回归分析谱效关系图 Fig 6 Antioxidant activity results of xanthohumol in
Fig 4 PLSR regression analysis spectral efficiency dia- vitro
gram
2.7.2 ABTS自由基清除率 取“2.7.1”项下系列工作溶
液各适量；另精密称取维生素 C 10.02 mg，加水溶解并
2.5
2.0 定容至 10 mL 量瓶中，制成质量浓度为 0.1 mg/mL 的维
1.5 生素 C 溶液。按“2.5.1”项下方法操作计算黄腐酚和维
1.0 生素C对ABTS自由基的清除率，详见图6B。由图6B可
VIP
0.5
知，在质量浓度0.1～10.0 mg/mL范围内，以10.0 mg/mL
0
的黄腐酚对ABTS自由基的清除率最高，为33.5％，但小
－0.5
于 0.1 mg/mL 维生素 C 对 ABTS 自由基的清除率；结合
－1.0
峰11 峰14 峰13 峰17 峰15 峰7 峰8 峰10 峰1 峰2 峰18 峰5 峰4 峰9 峰19 峰6 峰12 峰3 峰16 图5B，提示啤酒花药材样品在清除ABTS自由基时葎草
A.清除DPPH自由基 酮的作用最大，是其具有清除ABTS自由基作用的主要
成分之一。
2.5
3 讨论
2.0
1.5 本研究采用 HPLC 法建立了啤酒花药材样品的指
VIP 1.0 纹图谱，该方法精密度高、稳定性好、重复性好，能够同
0.5 时检测啤酒花中的多种有效成分。本研究前期分别考
0 察了乙腈-水、甲醇-水不同流动相系统的分离效果，结果
－0.5 显示，以乙腈-水为流动相时的分离效果优于甲醇-水，但
峰14 峰11 峰13 峰17 峰15 峰2 峰7 峰8 峰10 峰18 峰1 峰4 峰5 峰9 峰19 峰6 峰12 峰3 峰16 存在色谱峰拖尾现象；随后在水相中加入0.1％磷酸后，
B.清除ABTS自由基
图 5 偏最小二乘回归分析药效模型中各共有峰的 色谱峰的拖尾现象得到改善。
VIP值 DPPH法和ABTS法是常用的检测化合物或植物提
[16]
Fig 5 VIP value of common peaks in pharmacodyna- 取物抗氧化活性的方法 ，因此本研究以 DPPH 和
mic model of PLSR regression analysis ABTS自由基的清除率来评价啤酒花药材样品的抗氧化

·142 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 2 中国药房 2020年第31卷第2期