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疆药用植物志》和《宁夏中药志》等多部典籍。各典籍均                                        表1 药材样品来源信息
        记载了啤酒花的基源和功能主治内容,但仅有药典记载                                       Tab 1 Regions of H. lupulus
        了采用滴定法测定啤酒花浸膏中啤酒花软树脂的含                             编号     品种           产地                   采集时间
        量 [2-4] 。啤酒花含有黄酮类、树脂类、挥发油、多酚类及多                    S1     野生           阿勒泰市布尔津县             2017年7月
                                                           S2     野生           阿勒泰市云母二矿             2017年7月
                          [5]
        糖类等多种活性成分 ,而仅靠滴定法不能全面控制啤                           S3     栽培           塔城市裕民县               2017年7月
        酒花中多种活性成分的含量,且目前对于啤酒花的研究                           S4     栽培           昌吉市吉木萨尔县红旗农场1        2017年7月
        大多为对其多酚类或黄酮类成分的分离和结构分析,具                           S5     栽培/马克波罗品种    阜康市222团              2017年8月
                                                           S6     栽培/萨斯特品种     阜康市222团              2017年8月
        有一定的局限性       [6-8] 。                              S7     栽培           昌吉市吉木萨尔县红旗农场2        2017年7月
            中药谱效学是基于解决中药活性成分复杂、药理作                         S8     栽培           哈密市伊吾县               2017年8月
                                                           S9     栽培           昌吉市奇台县               2017年8月
        用机制不明等问题的一门学科,也是中药学质量和活性
                                                           S10    栽培           喀什市乃则尔巴格镇            2017年7月
        研究的一个新方向,其可利用多种数据分析中药药理活                           S11    栽培/扎一品种      昌吉市军户农场              2017年7月
                    [9]
        性的物质基础 。啤酒花中的黄酮类成分黄腐酚及多酚
                                                           动相:0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~10
        类成分均具有抗氧化活性            [10-11] ,但目前尚未见关于啤酒
                                                           min,20%B→25%B;10~12 min,25%B→75%B;12~
        花中各成分与其抗氧化活性的研究。基于此,本研究采
                                                           30 min,75% B→78% B;30~40 min,78% B→81% B;
        用高效液相色谱(HPLC)法建立了啤酒花的指纹图谱,
                                                           40~42 min,81%B→83%B;42~60 min,83%B→90%
        并对其指纹图谱中的特征峰与清除 1,1-二苯基-2-三硝
                                                           B);流速:1.0 mL/min;柱温:30 ℃;检测波长:358 nm;进
        基苯肼(DPPH)、2,2′-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)
                                                           样量:2 μL。
        二氨盐(ABTS)自由基作用的相关性进行分析,探讨特
                                                           2.2  溶液的制备
        征峰与其抗氧化活性的相关性,以阐明其体外抗氧化活
                                                           2.2.1  混合对照品溶液         精密称取黄腐酚对照品26.46
        性的物质基础,旨在为其质量控制和抗氧化作用谱效关
                                                           mg,置于100 mL量瓶中,加甲醇溶解至刻度,摇匀,得黄
        系研究提供依据。
                                                           腐 酚 对 照 品 贮 备 液 。 精 密 称 取 啤 酒 花 浸 膏 ICE-3
        1 材料
                                                           466.27 mg,置于 100 mL 量瓶中,加甲醇溶解至刻度,摇
        1.1  仪器
                                                           匀,得浸膏贮备液。取上述两种贮备液各5 mL,置于同
            LC-20AD 型 HPLC 仪,包括四元梯度系统、二极管
                                                           一 10 mL 量瓶中,混合均匀,经 0.45 μm 微孔滤膜滤过,
        阵列检测器、LC-solution 色谱工作站(日本岛津株式会
                                                           取续滤液,即得。
        社);AG285 型万分之一电子分析天平(瑞士 Mettler-To-
                                                           2.2.2  供试品溶液       取啤酒花药材样品适量,粉碎,称
        ledo 公司);DL-1000B 型智能超声波清洗仪(上海之信
                                                           取粉末0.5 g,置于具塞锥形瓶中,加50%乙醇20 mL,称
        仪器有限公司);ELx 800 型多功能酶标仪(美国 Biotek
                                                           定质量,超声(功率:300 W,频率:50 kHz)处理 30 min,
        公司)。
        1.2  试剂                                            放凉至室温,再次称定质量,用 50%乙醇补足减失的质
                                                           量,经0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
            黄腐酚对照品(上海历鼎生物技术有限公司,批号:
        20181103,纯度:≥98%);啤酒花浸膏 ICE-3(美国酿造                 2.3  方法学考察
        化学家协会,含有类葎草酮、葎草酮、加葎草酮、类蛇麻                          2.3.1  精密度试验       取“2.2.2”项下供试品溶液(编号:
        酮、蛇麻酮、加蛇麻酮等 6 种成分);维生素 C[生工生物                      S11)适量,按“2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次,以
        工程(上海)股份有限公司,批号:RS0328B4013J,纯                     黄腐酚峰的保留时间和峰面积为参照,记录各共有峰的
        度:≥99%];DPPH(批号:STBD2362V)、ABTS(批号:                相对保留时间和相对峰面积。结果,19个共有峰相对保
        SLBV6099)均由美国 Sigma 公司提供;甲醇为色谱纯,                   留时间的RSD均小于0.13%(n=6),相对峰面积的RSD
        其余试剂均为分析纯,水为超纯水。                                   均小于1.47%(n=6),表明本方法精密度良好。
        1.3 药材                                             2.3.2  稳定性试验       取“2.2.2”项下供试品溶液(编号:
            啤酒花药材(编号:S1~S11)经解放军海军军医大                      S11)适量,分别于室温下放置0、2、4、8、12、16、24 h时按
        学药学院生药教研室辛海量副教授鉴定为桑科植物啤                           “2.1”项下色谱条件进样测定,以黄腐酚峰的保留时间和
        酒花(H. lupulus L.)的雌性球穗花序。药材样品来源信                   峰面积为参照,记录各共有峰的相对保留时间和相对峰
        息见表1。                                              面积。结果,19 个共有峰相对保留时间的 RSD 均小于
        2 方法与结果                                            0.37%(n=7),相对峰面积的 RSD 均小于 2.93%(n=
        2.1  色谱条件                                          7),表明供试品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。
            色谱柱:Diamonsil C18 (250 mm × 4.6 mm,5 μm);流     2.3.3  重复性试验        取啤酒花药材样品粉末(编号:


        中国药房    2020年第31卷第2期                                               China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 2  ·139  ·
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