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疆药用植物志》和《宁夏中药志》等多部典籍。各典籍均 表1 药材样品来源信息
记载了啤酒花的基源和功能主治内容,但仅有药典记载 Tab 1 Regions of H. lupulus
了采用滴定法测定啤酒花浸膏中啤酒花软树脂的含 编号 品种 产地 采集时间
量 [2-4] 。啤酒花含有黄酮类、树脂类、挥发油、多酚类及多 S1 野生 阿勒泰市布尔津县 2017年7月
S2 野生 阿勒泰市云母二矿 2017年7月
[5]
糖类等多种活性成分 ,而仅靠滴定法不能全面控制啤 S3 栽培 塔城市裕民县 2017年7月
酒花中多种活性成分的含量,且目前对于啤酒花的研究 S4 栽培 昌吉市吉木萨尔县红旗农场1 2017年7月
大多为对其多酚类或黄酮类成分的分离和结构分析,具 S5 栽培/马克波罗品种 阜康市222团 2017年8月
S6 栽培/萨斯特品种 阜康市222团 2017年8月
有一定的局限性 [6-8] 。 S7 栽培 昌吉市吉木萨尔县红旗农场2 2017年7月
中药谱效学是基于解决中药活性成分复杂、药理作 S8 栽培 哈密市伊吾县 2017年8月
S9 栽培 昌吉市奇台县 2017年8月
用机制不明等问题的一门学科,也是中药学质量和活性
S10 栽培 喀什市乃则尔巴格镇 2017年7月
研究的一个新方向,其可利用多种数据分析中药药理活 S11 栽培/扎一品种 昌吉市军户农场 2017年7月
[9]
性的物质基础 。啤酒花中的黄酮类成分黄腐酚及多酚
动相:0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~10
类成分均具有抗氧化活性 [10-11] ,但目前尚未见关于啤酒
min,20%B→25%B;10~12 min,25%B→75%B;12~
花中各成分与其抗氧化活性的研究。基于此,本研究采
30 min,75% B→78% B;30~40 min,78% B→81% B;
用高效液相色谱(HPLC)法建立了啤酒花的指纹图谱,
40~42 min,81%B→83%B;42~60 min,83%B→90%
并对其指纹图谱中的特征峰与清除 1,1-二苯基-2-三硝
B);流速:1.0 mL/min;柱温:30 ℃;检测波长:358 nm;进
基苯肼(DPPH)、2,2′-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)
样量:2 μL。
二氨盐(ABTS)自由基作用的相关性进行分析,探讨特
2.2 溶液的制备
征峰与其抗氧化活性的相关性,以阐明其体外抗氧化活
2.2.1 混合对照品溶液 精密称取黄腐酚对照品26.46
性的物质基础,旨在为其质量控制和抗氧化作用谱效关
mg,置于100 mL量瓶中,加甲醇溶解至刻度,摇匀,得黄
系研究提供依据。
腐 酚 对 照 品 贮 备 液 。 精 密 称 取 啤 酒 花 浸 膏 ICE-3
1 材料
466.27 mg,置于 100 mL 量瓶中,加甲醇溶解至刻度,摇
1.1 仪器
匀,得浸膏贮备液。取上述两种贮备液各5 mL,置于同
LC-20AD 型 HPLC 仪,包括四元梯度系统、二极管
一 10 mL 量瓶中,混合均匀,经 0.45 μm 微孔滤膜滤过,
阵列检测器、LC-solution 色谱工作站(日本岛津株式会
取续滤液,即得。
社);AG285 型万分之一电子分析天平(瑞士 Mettler-To-
2.2.2 供试品溶液 取啤酒花药材样品适量,粉碎,称
ledo 公司);DL-1000B 型智能超声波清洗仪(上海之信
取粉末0.5 g,置于具塞锥形瓶中,加50%乙醇20 mL,称
仪器有限公司);ELx 800 型多功能酶标仪(美国 Biotek
定质量,超声(功率:300 W,频率:50 kHz)处理 30 min,
公司)。
1.2 试剂 放凉至室温,再次称定质量,用 50%乙醇补足减失的质
量,经0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
黄腐酚对照品(上海历鼎生物技术有限公司,批号:
20181103,纯度:≥98%);啤酒花浸膏 ICE-3(美国酿造 2.3 方法学考察
化学家协会,含有类葎草酮、葎草酮、加葎草酮、类蛇麻 2.3.1 精密度试验 取“2.2.2”项下供试品溶液(编号:
酮、蛇麻酮、加蛇麻酮等 6 种成分);维生素 C[生工生物 S11)适量,按“2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次,以
工程(上海)股份有限公司,批号:RS0328B4013J,纯 黄腐酚峰的保留时间和峰面积为参照,记录各共有峰的
度:≥99%];DPPH(批号:STBD2362V)、ABTS(批号: 相对保留时间和相对峰面积。结果,19个共有峰相对保
SLBV6099)均由美国 Sigma 公司提供;甲醇为色谱纯, 留时间的RSD均小于0.13%(n=6),相对峰面积的RSD
其余试剂均为分析纯,水为超纯水。 均小于1.47%(n=6),表明本方法精密度良好。
1.3 药材 2.3.2 稳定性试验 取“2.2.2”项下供试品溶液(编号:
啤酒花药材(编号:S1~S11)经解放军海军军医大 S11)适量,分别于室温下放置0、2、4、8、12、16、24 h时按
学药学院生药教研室辛海量副教授鉴定为桑科植物啤 “2.1”项下色谱条件进样测定,以黄腐酚峰的保留时间和
酒花(H. lupulus L.)的雌性球穗花序。药材样品来源信 峰面积为参照,记录各共有峰的相对保留时间和相对峰
息见表1。 面积。结果,19 个共有峰相对保留时间的 RSD 均小于
2 方法与结果 0.37%(n=7),相对峰面积的 RSD 均小于 2.93%(n=
2.1 色谱条件 7),表明供试品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。
色谱柱:Diamonsil C18 (250 mm × 4.6 mm,5 μm);流 2.3.3 重复性试验 取啤酒花药材样品粉末(编号:
中国药房 2020年第31卷第2期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 2 ·139 ·