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101.6％ 、103.8％（n＝5），批 间 精 密 度 分 别 为 6.2％ 、
50
40 2.0％ 、4.1％（n＝3）；批 间 准 确 度 分 别 为 102.8％ 、
mAU 30 102.1％、102.5％（n＝3），符合精密度＜15％，准确度均
20
10 值在标示值的±15％之内的要求。
0
0 2 4 6 8 10 （5）提取回收率。取吉非替尼适量，加入空白血浆，
t，min 按“2.2.3”项下方法制备吉非替尼低、中、高（0.078 12、
A.空白血浆样品
0.625、4 μg/mL）质量浓度血浆样品溶液，各浓度平行 5
14 份，按“2.2.1”项下色谱条件进样分析，记录经提取的吉
12
10 内标 非替尼峰面积（A1 ）和内标峰面积（A2 ）。另取空白血浆样
mAU 8 6 品，同法预处理至氮气吹干，在残渣中加入低、中、高
4
2 吉非替尼 （0.078 12、0.625、4 μg/mL）质量浓度的吉非替尼对照品
0
0 2 4 6 8 10 溶液各 20 µL，加入内标（10 μg/mL）对照品溶液 20 µL，
t，min
B.空白血浆+吉非替尼对照品 加入流动相 60 μL，涡旋振荡 5 min，混匀 30 s，各浓度平
行5份，按“2.2.1”项下色谱条件进样分析，记录未经提取
60
50 的吉非替尼峰面积（A1′）和内标峰面积（A2′），按公式（A1/
mAU 40 A1′×100％、A2/A2′×100％）分别计算吉非替尼和内标的
30
20
10 内标 吉非替尼 提取回收率。结果，吉非替尼低、中、高质量浓度的提取
0 回收率分别为 97.3％、95.9％、94.2％（n＝5），内标的提
0 2 4 6 8 10
t，min 取回收率为94.5％（n＝5），均符合生物样本测定的相关
C.大鼠单次灌胃给药4 h后的血浆样品
要求。
图1 高效液相色谱图 （6）稳定性试验。取吉非替尼适量，加入空白血浆，
Fig 1 HPLC chromatograms 按照“2.2.3”项下方法处理，配制吉非替尼低、中、高

（2）线性关系考察。取质量浓度为1 mg/mL的吉非 （0.078 12、0.625、4 μg/mL）质量浓度的血浆样品溶液，分
替尼对照品溶液，用甲醇逐级稀释成质量浓度为50、25、 别在进样条件下存放24 h后，按“2.2.1”项下色谱条件进
12.5、6.25、3.125、1.562 5、0.781 2、0.390 6 μg/mL 的系列 样分析，记录色谱图。结果，吉非替尼低、中、高质量浓
吉非替尼对照品工作溶液。分别精密吸取上述溶液 20 度血浆样品的测得浓度与标示浓度的偏差在±15％范
μL，按“2.2.3”项下方法处理，即得吉非替尼质量浓度为 围内，表明血浆样品溶液在进样条件下放置24 h稳定。
5、2.5、1.25、0.625、0.312 5、0.156 2、0.078 12、0.039 06 2.3 药动学研究
μg/mL的系列标准血浆样品溶液，按“2.2.1”项下色谱条 2.3.1 吉非替尼原料药给药溶液的配制
件进样分析，记录色谱图。以吉非替尼与内标的色谱峰 称取0.1 g羧甲基纤维素钠（CMC-Na），少量多次地
面积比值为纵坐标（y），以系列标准血浆样品溶液质量 加入至 70～80 ℃的 20 mL 水中，加入过程中不停搅拌，
浓度为横坐标（x），进行线性回归，得到线性回归方程y＝ 使 CMC-Na 充分溶胀，即得 0.5％ CMC-Na 溶液。称取
0.902 5x+0.004 0（r＝0.999 5），其吉非替尼质量浓度检 50 mg 吉非替尼原料药，加入至 0.5％的 CMC-Na 4 mL
测线性范围为0.039 06～5 μg/mL。 中，研磨至无明显颗粒或块状固体，然后继续加入0.5％
（3）定量下限与检测限的考察。取“2.2.4（2）”项下 的 CMC-Na 6 mL，继续研磨至均匀，得吉非替尼质量浓
5 μg/mL的标准血浆样品溶液，逐级稀释，按“2.2.1”项下 度为5 mg/mL的原料药给药溶液，灌胃前摇匀即可。
色谱条件进样分析，记录峰面积，以信噪比为10 ∶ 1得定 2.3.2 单次灌胃给予吉非替尼乳剂的药动学研究
量下限，以信噪比为3∶1得检测限。结果，吉非替尼的定 将12只健康SD大鼠随机分成吉非替尼原料药组和
量下限为0.039 06 μg/mL，检测限为0.019 53 μg/mL。 吉非替尼乳剂组，每组6只（♀♂各半），分别单次灌胃给
[15]
（4）精密度与准确度试验。取吉非替尼适量，加入 予吉非替尼原料药（50 mg/kg，给药剂量参考文献 ，下
空白血浆，按照“2.2.3”项下方法，配制吉非替尼低、中、 同）和吉非替尼乳剂（50 mg/kg，以吉非替尼计）。其中，
高（0.078 12、0.625、4 μg/mL）质量浓度的血浆样品，每个 吉非替尼原料药组于给药前和给药后 1、2、2.5、3、3.5、
浓度平行制备 5 份。按照“2.2.1”项下色谱条件进样分 3.75、4、4.25、4.5、6、8、12和24 h经大鼠眼球后静脉丛取
析，测定吉非替尼低、中、高质量浓度的批内精密度、准 血 0.3 mL。吉非替尼乳剂组于给药前和给药后 2、4、6、
确度；连续3 d进样，计算批间精密度、准确度。结果，吉 8、9、10、11、12、13、14、16、24、36和48 h经大鼠眼球后静
非替尼低、中、高质量浓度的批内精密度分别为 8.0％、 脉丛取血 0.3 mL。血液置于肝素化抗凝管内，3 000
1.7％ 、1.5％（n＝5），批 内 准 确 度 分 别 为 106.5％ 、 r/min 离 心 10 min 分 离 血 浆 ，－ 20 ℃ 保 存 备 用 。 按

·50 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 1 中国药房 2020年第31卷第1期