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2.6 线性关系考察 表3 重复性试验测定结果（μg/g）
分别精密吸取混合对照品溶液 0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 Tab 3 Results of repeatability tests（μg/g）
mL 置于 2 mL 的量瓶中，甲醇定容，即得系列质量浓度 次数 芍药内酯苷 芍药苷 阿魏酸 柚皮苷 橙皮苷 苯甲酰芍药苷 甘草酸 α-香附酮

的混合对照品溶液。经0.22 μm的微孔滤膜滤过后进样 1 60.005 432.043 22.846 627.473 200.657 15.404 68.335 ND
2 61.064 430.149 22.947 630.217 200.626 15.527 68.301 ND
分析，记录色谱图。以峰面积值为纵坐标（y），各成分的 3 60.103 431.829 22.841 627.814 200.109 15.082 68.266 ND
质量浓度为横坐标（x）进行线性回归，结果表明，8 个成 4 60.224 433.558 22.972 629.478 200.701 14.866 67.911 ND
5 59.315 433.298 22.910 629.863 198.290 15.395 68.212 ND
分在各自的检测质量浓度范围内线性关系良好，详见 6 60.871 431.900 22.680 626.996 202.071 14.816 68.279 ND
表2。 平均值 60.142 432.175 22.903 628.969 200.077 15.255 68.205
RSD，％ 1.04 0.32 0.26 0.20 0.51 1.79 0.25
表2 8个成分的线性关系考察结果
注：“ND”指未检测出
Tab 2 Linear range of 8 components
Note：“ND”means not detected
序号 成分 线性范围，μg/mL 线性方程 r 2.11 回收率试验
1 芍药内酯苷 3.606～8.414 y=11 241x+38 273 0.999 7
2 芍药苷 23.988～55.972 y=12 506x+336 343 0.999 5 称 0.50 g 柴胡疏肝散水煎液冻干物 6 份，加入高、
3 阿魏酸 1.218～2.842 y=228 308x+47 444 0.999 7 中、低质量的混合对照品溶液，按照“2.3”项下方法制备
4 柚皮苷 35.964～83.916 y=9 711x+533 035 0.999 6
5 橙皮苷 12.009～28.021 y=10 428x+243 667 0.999 8 供试品溶液，进样测定，结果表明该方法回收率良好，详
6 苯甲酰芍药苷 1.194～2.786 y=38 508x+16 572 0.999 8 见表4。
7 甘草酸 3.609～8.421 y=88 549x+973 0.999 9
8 α-香附酮 5.294～12.352 y=592 543x-61 254 0.999 7 2.12 含量测定结果
2.7 定量限试验 按照“2.1”项下方法平行制备 6 批柴胡疏肝散水煎
取各对照品溶液加甲醇逐级稀释，按“2.4”项下色谱 液冻干物，再按照“2.3”项下的方法制备成供试品溶液，
条件进样分析，记录峰面积。当信噪比为10∶1时得定量 按照“2.4”项下的色谱条件将 6 批供试品溶液注入色谱
限。结果，芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、柚皮苷、橙皮 仪中测定。结果，柴胡疏肝散水煎液冻干物中芍药苷、
苷、苯甲酰芍药苷、甘草酸、α-香附酮定量限分别为 芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、阿魏酸、橙皮苷、柚皮苷、甘
0.206、0.178、0.256、0.168、0.196、0.242、0.268、0.157 草酸、α-香附酮的平均含量见表5。
μg/mL。 3 讨论
2.8 精密度试验 3.1 冻干物的制备
精密取混合对照品溶液，重复进样5次，记录色谱图 中药水煎液制备不便，难以储存，不利于大规模开
及色谱峰的峰面积。结果，芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰 展试验。鉴于此，笔者考虑到中药水煎液具有水分含量
芍药苷、阿魏酸、橙皮苷、柚皮苷、甘草酸、α-香附酮的峰 较高的特点，采用真空冷冻干燥法除去水煎液里的水

面 积 的 RSD 分 别 为 1.34％ 、0.80％ 、0.37％ 、0.27％ 、 分，获得了疏松多孔、水溶性好的水煎液冻干物，便于长
0.41％、1.03％、1.58％、0.72％（n＝5），表明仪器精密度 期储存，临用前复溶即可给药。通过改进给药方式和受
良好。 试物形态，可提高后续研究的效率和质量，为同类研究
2.9 稳定性试验 提供借鉴。
取 1 份冻干物样品溶液分别于制备后 0、2、4、6、8、 3.2 检测方法的选择
12 h 注入色谱仪中测定，共记录 6 个时间点的峰面积。 本文结合UPLC仪和常规液相色谱柱完成了对柴胡
结果，芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷、阿魏酸、橙皮 舒肝散水煎液冻干物中 8 个成分的质量控制。由于
苷、柚皮苷、甘草酸、α-香附酮色谱峰面积的RSD分别为 UPLC 仪较小的管路内径和特殊的检测池结构，填料粒
0.50％、1.15％、0.89％、1.06％、1.65％、1.96％、1.72％、未 度较小，故具有“高分离度、高峰容量、高灵敏度”的优
测出（n＝6），表明该供试品溶液在12 h内稳定性良好。 势 [17-18] 。但是对于组成较为复杂、含量较高的中药提取
2.10 重复性试验 物而言，可能具有色谱柱会产生吸附作用、色谱柱过载、

称取柴胡疏肝散水煎液冻干物第 6 批，按照供试品 压力升高、寿命缩短等问题，故本文采用了UPLC仪结合
溶液的制备方法平行制备6份，依法测定各成分色谱峰 常规色谱柱完成了方法学的试验。结果表明，二者结合
的峰面积，结果，含量的 RSD 值均＜2％（n＝6），表明该 后，避免了柴胡疏肝散水煎液冻干物样品成分对 UPLC
方法重复性良好，结果见表3。 色谱柱的不利影响，且所建立的分析方法具有良好的适

中国药房 2020年第31卷第1期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 1 ·45 ·