Page 108 - 2019年11月第30卷第21期

表3 10批马海治瘫胶囊相似度评价结果 2.407、0.212 7～2.127、0.070 1～0.701、0.189～1.89 µg范
Tab 3 Similarity evaluation of 10 batches of Mahai 围内与其各自峰面积线性关系良好。
zhitan capsules （2）检测限与定量限试验。取混合对照品溶液逐级
样品 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 稀释，分别以信噪比（S/N）为 3 和 10 时的对照品质量浓
S1 1.000 0.999 0.999 0.998 0.995 0.998 0.999 0.998 0.999 0.994 度为检测限和定量限。结果，马钱苷酸、士的宁、马钱子
S2 0.999 1.000 0.999 0.994 0.990 0.994 0.996 0.995 1.000 0.993
－4
S3 0.999 0.999 1.000 0.997 0.994 0.997 0.998 0.997 1.000 0.995 碱、大黄素和大黄酚的检测限分别为 1.19×10 、1.60×
S4 0.998 0.994 0.997 1.000 0.999 0.999 0.999 1.000 0.995 0.995 10 、2.13×10 、2.36×10 、3.15×10 －4 µg，定量限分别为
－4
－4
－4
S5 0.995 0.990 0.994 0.999 1.000 0.999 0.998 0.999 0.992 0.995 3.58×10 、4.81×10 、6.38×10 、7.07×10 、9.45×10 －4
－4
－4
－4
－4
S6 0.998 0.994 0.997 0.999 0.999 1.000 1.000 0.999 0.995 0.996
S7 0.999 0.996 0.998 0.999 0.998 1.000 1.000 0.999 0.997 0.997 µg。
S8 0.998 0.995 0.997 1.000 0.999 0.999 0.999 1.000 0.996 0.995 （3）精密度试验。精密吸取同一混合对照品溶液
S9 0.999 1.000 1.000 0.995 0.992 0.995 0.997 0.996 1.000 0.993 10 μL，在“2.1.1”项下色谱条件下重复进样测定 6 次，测
S10 0.994 0.993 0.995 0.995 0.995 0.996 0.997 0.995 0.993 1.000
对照指纹图谱 0.999 0.997 0.999 0.999 0.997 0.999 1.000 0.999 0.998 0.996 得马钱苷酸、士的宁、马钱子碱、大黄素和大黄酚的峰面
谱条件进样检测，记录色谱图，通过色谱峰对比，对马海 积 RSD 分别为 1.15％、0.62％、0.89％、1.20％、1.19％
治瘫胶囊中主要的共有峰进行指认。结果，指认了1、4、 （n＝6），表明仪器精密度良好。
6、7、8、16、17、18、19、20号色谱峰分别为没食子酸、马钱 （4）重复性试验。精密称取同一批马海治瘫胶囊粉
苷酸、士的宁、马钱子碱、阿魏酸、芦荟大黄素、大黄酸、 末（批号：2017060104）6份，按“2.2.1（2）”项下方法制备
大黄素、大黄酚和大黄素甲醚，对照品色谱图见图3。 成供试品溶液，在“2.1.1”项下色谱条件下进样分析，计
2.2 马海治瘫胶囊中5个成分的含量测定 算得马钱苷酸、士的宁、马钱子碱、大黄素和大黄酚的平
2.2.1 溶液的制备 均含量分别为 2.436 2、1.925 7、1.413 2、1.667 5、0.236 5
（1）混合对照品溶液的制备。分别取马钱苷酸、士 mg/g，RSD分别为1.68％、1.35％、0.96％、1.64％、0.62％
的宁、马钱子碱、大黄素和大黄酚对照品适量，精密称 （n＝6），表明该方法重复性良好。
定，置于同一 10 mL 棕色量瓶中，用适量 75％的甲醇溶 （5）稳定性试验。取“2.2.1（2）”项下同一供试品溶
解后定容至刻度，制成每1 mL含马钱苷酸0.074 54 mg、 液（批号：2017060104），室温放置0、2、4、6、8、12 h后，分
士 的 宁 0.120 35 mg、马 钱 子 碱 0.106 36 mg、大 黄 素 别按“2.1.1”项下色谱条件下进样分析，计算得马钱苷
0.035 33 mg、大黄酚0.094 5 mg的混合对照品溶液。 酸、士的宁、马钱子碱、大黄素和大黄酚峰面积的RSD分
（2）供试品溶液的制备。制备方法同“2.1.2（1）” 别为 0.50％、0.94％、1.81％、1.43％、0.52％（n＝6），表明
项下。 供试品溶液室温放置12 h稳定。
2.2.2 色谱条件与系统适用性试验 （6）加样回收试验。精密称取已知含量的马海治瘫
取混合对照品溶液和供试品溶液，按“2.1.1”项下色 胶囊粉末（批号：2017060104）0.5 g，共称取 6 份，置于
谱条件进样检测，记录色谱图。结果，各待测峰与相邻 具塞三角瓶中，分别按待测成分质量比为1 ∶ 1的比例加
峰间的分离度均大于 1.5，理论板数以马钱苷酸峰计为 入相应对照品溶液，按“2.2.1（2）”项下方法制备供试品
100 185，以士的宁峰计为 56 395，以马钱子碱峰计为 溶液后，按“2. 1.1”项下色谱条件下进样分析，测定其
111 486，以大黄素峰计为 1 168 203，以大黄酚峰计为 含量并计算其回收率。结果，5 个成分的平均回收率为
1 131 014，色谱图见图4。 98.88％～100.31％，RSD 为 0.71％～1.31％（n＝6）。回
2.2.3 含量测定方法学考察及结果 收率测定结果见表4。
（1）线性关系考察。精密吸取“2.2.1（1）”项下混合 （7）样品含量测定。取10批马海治瘫胶囊样品粉末
对照品溶液2、4、8、12、16和20 μL，在“2.1.1”项下色谱条 各1.0 g，精密称定，按“2.2.1（2）”项下方法制备供试品溶
件下进样分析，记录色谱图并测定峰面积。以进样量为 液后，按“2.1.1”项下色谱条件下进样分析，计算得马钱
横坐标（x，μg）、峰面积为纵坐标（y）绘制标准曲线，得 苷酸、士的宁、马钱子碱、大黄素和大黄酚的含量分别为
到马钱苷酸的回归方程为 y＝1 097.8x－4.714 5（r＝ 2.477 1～2.785 9、1.746 1～1.946 0、1.374 6～1.505 8、
0.999 8），士的宁的回归方程为y＝2 129.1x－35.112（r＝ 1.573 2～1.824 1和0.232 1～0.261 7 mg/g，结果见表5。
0.999 6），马钱子碱的回归方程为 y＝1 152.5x+6.378 4 3 讨论
（r＝0.999 9），大黄素的回归方程为 y＝13 070x+19.5 3.1 色谱条件优选
（r＝0.999 7），大黄酚的回归方程为y＝855.38x－3.030 4 在前期研究中，笔者参考文献报道 [6-8] ，分别对不同
（r＝0.999 6），表明马钱苷酸、士的宁、马钱子碱、大黄素 色谱柱[Inertsil ODS-3（250 mm×4.6 mm，5 μm）、Agilent
和大黄酚分别在进样量为 0.149 1～1.491、0.240 7～ Zorbax SB-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）、Diamonsil C18

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